一种从梅片树叶片中提取天然右旋龙脑的预处理方法技术

技术编号:20646161 阅读:22 留言:0更新日期:2019-03-23 03:31
本发明专利技术属于生物制药技术领域,公开了一种从梅片树叶片中提取天然右旋龙脑的预处理方法。该方法是先将梅片树叶片经过深度共熔溶剂预处理,所述深度共熔溶剂包括氢键受体、氢键供体和水;再将预处理之后的混合物经离心处理分离固体颗粒并用清水冲洗,采用索氏提取法用无水乙醇循环提取至提取液体的颜色不再变化,提取液过滤后采用气相色谱法测定右旋龙脑含量。本发明专利技术采用深度共熔溶剂预处理梅片树叶片,能显著提高梅片树叶片提取天然右旋龙脑的提取效率。提取右旋龙脑的提取效率能够达到4.936mg/g,显著高于未经过预处理的提取效率2.011mg/g。

A Pretreatment Method for Extracting Natural D-Borneol from Plum Leaves

The invention belongs to the field of biopharmaceutical technology, and discloses a pretreatment method for extracting natural dextroborneol from plum leaf leaves. The method is to pretreat plum leaves with deep eutectic solvents, which include hydrogen bond acceptors, hydrogen bond donors and water. The pretreated mixture is centrifuged to separate solid particles and rinsed with clean water. Soxhlet extraction method is used to recycle ethanol to extract liquids with no change in color. The extracts are filtered and then filtered by gas chromatography. The content of dextroborneol was determined. The method adopts deep eutectic solvent to pretreat plum leaf, which can significantly improve the extraction efficiency of natural dextroborneol from plum leaf. The extraction efficiency of D-borneol was 4.936 mg/g, which was significantly higher than that of the untreated extraction efficiency of 2.011 mg/g.

【技术实现步骤摘要】
一种从梅片树叶片中提取天然右旋龙脑的预处理方法
本专利技术属于生物制药
,更具体地,涉及一种从梅片树叶片中提取天然右旋龙脑的预处理方法。
技术介绍
天然右旋龙脑是从樟科植物龙脑香中提取的一种珍贵药材和名贵香料,有抗癌治癌、抗菌消炎、消肿止痛、祛风醒神、开窍解毒等作用,广泛应用于医药、食品、化妆品和香料工业上,我国主要依赖于进口。近年由于原产地马来西亚龙脑香的乱砍乱伐,资源植物几近耗竭,因此天然右旋龙脑价格很高,开发使用其他资源植物提取天然右旋龙脑,缓解国家该原料药的紧俏局势迫在眉睫。广东省梅州地区发现的梅片树是樟科植物阴香(Cinnammoniaburmannii)的一个富含天然右旋龙脑化学型,是天然右旋龙脑良好的资源植物。采用水蒸气蒸馏法或索氏提取的方法,可以从梅片树叶中提取天然右旋龙脑,如何改善提取方法,提高提取效率,充分利用有限资源,生产更多产品,成为制约天然右旋龙脑相关产业可持续发展的关键技术。现有技术提取的效率不够高,水蒸气蒸馏法的最高提取效率大约1.3mg/g,索氏提取(乙醇浸提)的提取效率约2mg/g。提取得不彻底,造成资源浪费。
技术实现思路
为了解决上述现有技术存在的不足和缺点,本专利技术提供了一种从梅片树叶片中提取天然右旋龙脑的预处理方法。经该法采用深度共熔溶剂预处理梅片树叶片,能显著提高梅片树叶片提取天然右旋龙脑的提取效率。本专利技术的目的通过下述技术方案来实现:一种从梅片树叶片中提取天然右旋龙脑的预处理方法,其特征在于,包括如下具体步骤:S1.将梅片树叶片经过深度共熔溶剂预处理,所述深度共熔溶剂包括氢键受体和氢键供体;S2.将混合物经离心处理分离固体颗粒并用清水冲洗,采用索氏提取法用无水乙醇循环提取至提取液体的颜色不再变化,提取液过滤后采用气相色谱法测定右旋龙脑的含量。优选地,步骤S1中所述氢键受体为氯化胆碱,所述氢键供体为三甘醇、甘油、乙二醇、草酸、柠檬酸、乳酸、尿素或乙酰胺;当所述氢键供体为葡萄糖、果糖、麦芽糖或蔗糖时,所述深度共熔溶剂还包括水。更为优选地,所述氢键受体为氯化胆碱,所述氢键供体为蔗糖。优选地,步骤S1中所述梅片树叶片的质量和深度共熔溶剂的体积比为(0.5~1.5)g:(30~80)mL,所述氢键受体和氢键供体的摩尔比为1:(1~4);所述氢键受体、氢键供体和水的摩尔比为5:2:(2~18)。更为优选地,所述梅片树叶片的质量和深度共熔溶剂的体积比为1g:50mL;所述氢键受体、氢键供体和水的摩尔比为5:2:5.9。优选地,步骤S1中所述预处理的温度为30~50℃,预处理的搅拌速率为200~400rpm,预处理的搅拌时间为2~10h。更为优选地,所述预处理的温度为44.5℃,预处理的搅拌速率为300rpm,预处理的搅拌时间为4.07h。优选地,步骤S2中所述离心的速率范围为20000~35000rpm,所述离心的时间范围为5~15min。更为优选地,所述离心的速率为25000rpm,所述离心的时间为10min。优选地,步骤S2中所述冲洗的时间为2~10min。本专利技术中的深度共熔溶剂是由一定物质量比的氢键供体和氢键受体结合而成的低共熔混合物,其凝固点比各个组分纯物质的熔点都要低,理化性质与离子液体非常相似,因而也被当做一种新型的离子液体。深度共熔溶剂不仅具有与离子液体类似的沸点高、熔点低、易回收等优点,且成本较低,合成简单。深度共熔溶剂中氢键供体和受体与细胞壁中的木质素或纤维素相互作用,促进了细胞结构中木质素和纤维素结构的松动。因此,深度共熔溶剂预处理后细胞壁结构疏松,细胞内物质易于提取。天然右旋龙脑主要来源于富含天然右旋龙脑的植物中提取生产。梅片树属于樟科樟属植物阴香的一个化学型,其茎、叶等器官中均含有丰富的右旋龙脑资源,是天然右旋龙脑良好的资源植物。本专利技术采用基于氯化胆碱的多种深度共熔溶剂预处理梅片树叶,之后再用索氏提取法提取天然右旋龙脑,发现大部分经过预处理的叶片右旋龙脑的提取效率都要显著高于未经过预处理的叶片,其中氢键受体为氯化胆碱,氢键供体为乙二醇、乳酸、麦芽糖或蔗糖时,提取效率较高,且与其他(甘油除外)提取效率有显著差异。接着对氯化胆碱和蔗糖合成的深度共熔溶剂预处理的条件进行了优化。用BBD响应面法对深度共熔溶剂含水量、预处理温度和时间进行分析出最佳的预处理条件为:采用氯化胆碱、蔗糖、水按照5:2:5.9的摩尔比合成的深度共熔溶剂,在44.5℃的温度下,预处理4.07h梅片树叶之后进行提取的效率最高(4.936mg/g)。研究说明该预处理工艺能有效提高右旋龙脑的提取率。与现有技术相比,本专利技术具有以下有益效果:本专利技术采用深度共熔溶剂预处理梅片树叶片,能显著提高梅片树叶片提取天然右旋龙脑的提取效率。提取右旋龙脑的提取效率能够达到4.936mg/g,显著高于未经过预处理的提取效率2.011mg/g。附图说明图1为实施例2中深度共熔溶剂的含水量对提取效率的影响。图2为实施例2中深度共熔溶剂的预处理温度对提取效率的影响。图3为实施例2中深度共熔溶剂的预处理时间对提取效率的影响。图4为实施例2中的深度共熔溶剂的含水量、处理时间和处理温度三因素对天然右旋龙脑提取效率影响的相应面图。具体实施方式下面结合具体实施例进一步说明本专利技术的内容,但不应理解为对本专利技术的限制。若未特别指明,实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段。除非特别说明,本专利技术采用的试剂、方法和设备为本
常规试剂、方法和设备。实施例11.深度共熔溶剂的合成将用于合成的药品(氢键受体是氯化胆碱,氢键供体如表1所示)放置于45℃干燥箱内干燥24h后,按照表1相应的摩尔比精确称量对应质量的药品放置于平底烧瓶中,封口膜密封后转入恒温磁力搅拌器上80℃的水浴中,在300rpm的转速下加热搅拌约2~3h,直至形成均一稳定的透明溶液,冷却至室温后于干燥器内密封保存。2.不同深度共熔溶剂预处理梅片树叶片将梅片树叶粉碎后精确称量1g样品,分别加入50ml已合成的深度共熔溶剂,混合均匀后放置在60℃的恒温磁力搅拌器上,在300rpm的转速下加热搅拌处理5h。处理结束后将混合物置于高速离心机在25000rpm下离心10min,分离固体颗粒并用清水冲洗2~10min,用滤纸包包裹后放入索氏提取器,用无水乙醇循环提取至提取室内液体颜色不再变化,提取液GC检测其中右旋龙脑含量,并计算提取率。3.气相色谱法(GC)的条件DB-5型石英毛细管柱(30m×0.32mm×0.25μm),进样口温度220℃,进样量1μL,不分流进样;检测器温度250℃;升温程序为:起始温度70℃,然后以3℃/min的速度逐渐升温至100℃,再以15℃/min的速度升温至250℃,载气为氦气,流速2mL/min。4.计算提取率以乙醇为溶剂,将右旋龙脑标准品分别配制成不同浓度的待测液测量,以右旋龙脑峰面积和相对应浓度建立坐标系绘制标准曲线,并得到回归方程。根据测得峰面积,查标准曲线,计算提取液中右旋龙脑的含量,计算提取效率。提取率(mg/g)=右旋龙脑提取量(mg)/梅片树叶片质量湿重(g)。表1梅片树叶片的提取效率注:表1中上标中不同的字母表示有显著性差异(p<0.05),统计分析使用SPSS中的Ducan方法。由于糖类与氯化胆碱混本文档来自技高网
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【技术保护点】
1.一种从梅片树叶片中提取天然右旋龙脑的预处理方法,其特征在于,包括如下具体步骤:S1.将梅片树叶片经过深度共熔溶剂预处理,所述深度共熔溶剂包括氢键受体和氢键供体;S2.将预处理之后的混合物经离心处理分离固体颗粒并用清水冲洗,采用索氏提取法用无水乙醇循环提取至提取液体的颜色不再变化,提取液过滤后采用气相色谱法测定右旋龙脑的含量。

【技术特征摘要】
1.一种从梅片树叶片中提取天然右旋龙脑的预处理方法,其特征在于,包括如下具体步骤:S1.将梅片树叶片经过深度共熔溶剂预处理,所述深度共熔溶剂包括氢键受体和氢键供体;S2.将预处理之后的混合物经离心处理分离固体颗粒并用清水冲洗,采用索氏提取法用无水乙醇循环提取至提取液体的颜色不再变化,提取液过滤后采用气相色谱法测定右旋龙脑的含量。2.根据权利要求1所述的从梅片树叶片中提取天然右旋龙脑的预处理方法,其特征在于,步骤S1中所述氢键受体为氯化胆碱,所述氢键供体为三甘醇、甘油、乙二醇、草酸、柠檬酸、乳酸、尿素或乙酰胺;当所述氢键供体为葡萄糖、果糖、麦芽糖或蔗糖时,所述深度共熔溶剂还需添加水。3.根据权利要求2所述的从梅片树叶片中提取天然右旋龙脑的预处理方法,其特征在于,所述氢键受体为氯化胆碱,所述氢键供体为蔗糖。4.根据权利要求1所述的从梅片树叶片中提取天然右旋龙脑的预处理方法,其特征在于,步骤S1中所述梅片树叶片的质量和深度共熔溶剂的体积比为(0.5~1.5)g:(30~80)mL,所述氢键受体和氢键供体的摩尔比为1:(1~4);所述氢键受体、氢键供体和水的摩尔比为5:2:(2~18)。5...

【专利技术属性】
技术研发人员:傅明辉马笑宇
申请(专利权)人:广东工业大学
类型:发明
国别省市:广东,44

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