一种抑制卵巢癌细胞的药物组合物制造技术

一种抑制卵巢癌细胞的药物组合物，属于生物医药技术领域。该组合物由200ng/mL的布雷菲德菌素A(BFA)和4.0～4.5μg/mL的顺铂(CDDP)组合而成。该组合药物能显著抑制卵巢癌细胞的生长增殖和促进卵巢癌细胞的凋亡，具有调节与卵巢癌细胞凋亡相关基因及蛋白质的功能，显著优于单独用药，具有协同抗卵巢癌的作用。其可作为一种调控卵巢细胞凋亡通路的靶向药物组合，为临床上卵巢癌提供一种新的综合治疗策略。

A Drug Composition for Inhibiting Ovarian Cancer Cells

A pharmaceutical composition for inhibiting ovarian cancer cells belongs to the field of biomedical technology. The composition is composed of 200 ng/mL BFA and 4.0-4.5 ug/mL CDDP. The combination of drugs can significantly inhibit the growth and proliferation of ovarian cancer cells and promote the apoptosis of ovarian cancer cells. It has the function of regulating the apoptosis-related genes and proteins of ovarian cancer cells. It is significantly superior to the single drug and has the synergistic anti-ovarian cancer effect. It can be used as a combination of targeted drugs to regulate the apoptotic pathway of ovarian cells and provide a new comprehensive treatment strategy for ovarian cancer.

【技术实现步骤摘要】
一种抑制卵巢癌细胞的药物组合物
本专利技术涉及生物医药
，具体为一种抑制卵巢癌细胞的药物组合物。
技术介绍
癌症是严重威胁人类生存和社会发展的重大疾病。其中，卵巢癌(ovariancarcinoma)是女性中最常见的三大恶性肿瘤之一，发病率位居第三，仅此于乳腺癌、宫颈癌之后。但由于卵巢位于盆腔深部，早期病变不易被发现，一旦出现症状多属晚期，因此其死亡率位居妇科肿瘤的首位。目前临床上卵巢癌的治疗模式是以手术加化疗为主的综合疗法。化疗既可以单独应用于晚期癌症的姑息治疗，又可作为综合治疗的一部分，与手术、放疗等进行联合治疗，且化疗可以防止卵巢癌的转移、复发，提高患者的长期生存率。顺铂(cis-dichlorodiamineplatinum，CDDP)是首先应用于临床抗肿瘤的铂络合物，具有疗效确切、抗癌谱广、抗癌活性高的特点，主要用于卵巢癌、肺癌等多种实体瘤的治疗。但是其毒副作用也较大，如肾脏毒性、骨髓抑制、神经毒性等。由于顺铂与多种抗癌药物具有良好的协同作用，且无交叉耐药性，目前临床上主要通过联合化疗来解决这一问题，因此寻找一种毒副作用更低、抗癌效果更好、更合理的综合治疗方案具有重要的临床意义。天然产物具有结构和功能的多样性，是开发和研究疾病治疗新药物的重要材料，而真菌产生的次生代谢产物被认为是新药主要结构的重要来源。其中，布雷菲德菌素A(brefeldinA，BFA)就是真菌中一种重要的次生代谢产物，它是一种大环内酯类抗生素，具有多种生物活性，包括抗肿瘤、抗菌、抗病毒活性等。研究表明，BFA可以促进多种肿瘤细胞凋亡，如肺癌、前列腺癌、肝癌、乳腺癌细胞等。因此，BFA是潜在的抗癌候选药物之一。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服上述
技术介绍
困难，提供一种抑制卵巢癌细胞的药物组合物。为达到上述目的，采用的技术方案为：一种抑制卵巢癌细胞的药物组合物，所述该组合物由200ng/mL的布雷菲德菌素A(BFA)和4.0-4.5μg/mL的顺铂(CDDP)组合而成。优选地，所述布雷菲德菌素A(BFA)和顺铂(CDDP)联合用药能抑制卵巢癌细胞的生长增殖。优选地，所述布雷菲德菌素A(BFA)和顺铂(CDDP)联合用药促进卵巢癌细胞凋亡。优选地，所述布雷菲德菌素A(BFA)和顺铂(CDDP)联合用药影响卵巢癌细胞凋亡相关蛋白的表达。优选地，所述布雷菲德菌素A(BFA)和顺铂(CDDP)联合用药影响卵巢癌细胞凋亡相关的基因表达。采用上述方案的有益效果为：1.这种抑制卵巢癌细胞的药物组合物，在单独使用BFA(有效抑制浓度IC50为400ng/mL)和CDDP(有效抑制浓度IC50为9μg/mL)时，细胞的存活率呈降低趋势，但当采用IC50各一半的浓度(即200ng/mLBFA+4.5μg/mLCDDP)联合处理细胞，细胞存活率进一步降低，所以在使用BFA和CDDP联合用药时，显著抑制了卵巢癌细胞的生长增殖。2.这种抑制卵巢癌细胞的药物组合物，与对照组相比，有BFA组、CDDP组和BFA+CDDP组细胞的总凋亡率分别为4.4％、6.3％、17.8％，均显著高于对照组2.9％；且BFA+CDDP组细胞的总凋亡率亦显著高于单独用药组BFA组和CDDP组，表明了BFA和CDDP联合用药显著增加了卵巢癌细胞的凋亡率。3.这种抑制卵巢癌细胞的药物组合物，在BFA+CDDP联合用药组细胞BaxmRNA和Caspase3mRNA的表达水平显著高于单独用药组，显著的表明了BFA和CDDP联合用药促进了细胞凋亡相关基因表达水平的上调。4.这种抑制卵巢癌细胞的药物组合物，当BFA+CDDP联合用药组细胞Bax蛋白表达水平亦显著高于各单独用药组，Pro-caspase3蛋白表达水平亦显著低于各单独用药组，Cleaved-caspase3蛋白表达水平亦显著高于各单独用药组，突出表明了BFA和CDDP联合用药促进了细胞凋亡相关蛋白表达水平的上调，促进了细胞凋亡的发生。附图说明图1为本专利技术BFA和CDDP单独或联合用药对卵巢癌SKOV-3细胞生长的抑制作用的示意图；图2为BFA和CDDP单独或联合用药对卵巢癌SKOV-3细胞凋亡的促进作用；图3BFA和CDDP单独或联合用药对卵巢癌SKOV-3细胞凋亡相关基因表达的影响；图4BFA和CDDP单独或联合用药对卵巢癌SKOV-3细胞凋亡相关蛋白表达的影响。具体实施方式下面结合实施例进一步介绍本专利技术，但本专利技术不仅限于下述实施例，可以预见本领域技术人员在结合现有技术的情况下，实施情况可能产生种种变化。一种抑制卵巢癌细胞的药物组合物，所述该组合物由200ng/mL的布雷菲德菌素A(BFA)和4.0～4.5μg/mL的顺铂(CDDP)组合而成。所述布雷菲德菌素A(BFA)和顺铂(CDDP)联合用药能抑制卵巢癌细胞的生长增殖。所述布雷菲德菌素A(BFA)和顺铂(CDDP)联合用药促进卵巢癌细胞凋亡。所述布雷菲德菌素A(BFA)和顺铂(CDDP)联合用药影响卵巢癌细胞凋亡相关蛋白的表达。所述布雷菲德菌素A(BFA)和顺铂(CDDP)联合用药影响卵巢癌细胞凋亡相关的基因表达。布雷菲德菌素A和顺铂联合用药，可显著抑制卵巢癌细胞的生长增殖，且可显著促进卵巢癌细胞的凋亡，具有调节与卵巢癌细胞凋亡相关基因及蛋白质的功能，显著优于单独用药，具有协同抗卵巢癌的作用。其可作为一种调控卵巢细胞凋亡通路的靶向药物组合，为临床上卵巢癌提供一种新的综合治疗策略。一、实验方法(1)药物布雷菲德菌素A(购自CellSignalingTechnology公司)，顺铂注射液(购自山东齐鲁制药公司)。(2)细胞系人卵巢癌细胞系SKOV-3。采用1640培养基进行培养，培养基中含10％胎牛血清、100μg/mL链霉素、100U/mL青霉素，置于37℃、95％空气、5％CO2、饱和湿度的二氧化碳培养箱中培养。细胞生长方式为贴壁生长，每2-3天传代一次。(3)试剂及仪器胎牛血清购自浙江天杭生物科技有限公司，RPMI-1640培养基购自Gibco公司，PCR引物由上海生工生物公司合成，M-MLV逆转录酶和RNase抑制剂购自Promega公司，dNTPMix(10mM)购自上海生工生物公司，RNAisoTMPlus购自TaKaRaBiotechnology公司，q-RT-PCR试剂盒购自Bio-Rad公司，兔抗人β-actin单抗、兔抗人Bax多抗、兔抗人Caspase3多抗及辣根过氧化物酶标记的二抗均购自Protein-TechGroup公司。生物洁净工作台(BCM-1300A)购自安泰空气技术公司，二氧化碳培养箱(Gold-Sim)购自西盟国际公司，倒置荧光显微镜(IX73)购自Olympus公司，程序降温盒(5100-0001)购自Nalgene公司，流式细胞仪(Gallios)购自BeckmanCoulter公司，PCR仪(CFXConnectTMOpticsModule)和电泳仪(PowerPacBasic)均购自Bio-Rad公司，凝胶成像系统(GelDocXR)Bio-Rad公司。(4)MTT法检测细胞存活率取对数期卵巢癌SKOV-3细胞培养24h，分别设置0、100、200、300、400、450、500ng/mLBFA及0、2、4、6本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种抑制卵巢癌细胞的药物组合物，其特征在于：所述组合物由200ng/mL的布雷菲德菌素A和4.0～4.5μg/mL的顺铂组合而成。

【技术特征摘要】
1.一种抑制卵巢癌细胞的药物组合物，其特征在于：所述组合物由200ng/mL的布雷菲德菌素A和4.0～4.5μg/mL的顺铂组合而成。2.根据权利要求1所述的抑制卵巢癌细胞的药物组合物，其特征在于：所述药物组合物在抑制卵巢癌细胞生长增殖方面的应用。3.根据权利要求1所述的抑制卵巢癌细胞的药物组...

【专利技术属性】
技术研发人员：耿娜娜，郑翔，吴明松，李学英，张志敏，杨蕾，
申请(专利权)人：遵义医学院，
类型：发明
国别省市：贵州,52