一种固定化联合培养发酵单细胞油脂技术制造技术

本发明专利技术公开了一种固定化联合培养发酵单细胞油脂技术，包括PVA聚乙烯醇、海藻酸钠、氯化钙、戊二醛以及甲壳素；本发明专利技术还公开了该固定化联合培养发酵单细胞油脂技术的具体培养步骤，具体包括：(1)固定化包埋产酶菌A；(2)将固定化的产酶微生物A与产油微生物B进行混合培养，联合生产单细胞油脂。该固定化联合培养发酵单细胞油脂技术利用产油脂酵母游离培养，通过简单的过滤就可以实现固定化菌株和产油酵母的分离，减少外界因素对油脂提取的影响。

A technique of immobilized co-culture for single cell lipid fermentation

The invention discloses an immobilized co-culture and fermentation technology for single-cell lipid, including PVA polyvinyl alcohol, sodium alginate, calcium chloride, glutaraldehyde and chitin; the invention also discloses the specific culture steps of the immobilized co-culture and fermentation technology for single-cell lipid, including: (1) immobilization and embedding of enzyme-producing bacteria A; (2) immobilization of enzyme-producing microorganism A and oil-producing microorganism B. Mixed culture was carried out to produce single-cell lipids. The technology of immobilized co-culture and fermentation of single-celled lipid utilizes free culture of lipid-producing yeast. Through simple filtration, the separation of immobilized and oil-producing yeast can be realized, and the influence of external factors on oil extraction can be reduced.

【技术实现步骤摘要】
一种固定化联合培养发酵单细胞油脂技术
本专利技术涉及一种单细胞油脂技术，尤其涉及一种固定化联合培养发酵单细胞油脂技术。
技术介绍
固定化技术的研究始于1910年，近代工业化利用开始于1969年固定化氨基酰化酶的应用。固定化技术的实施，细胞能反复使用，产物分离提取更容易，并在生产可以实现连续化和自动化，固定化技术新的功能和新的应用正在迅速地扩展，是一项研究领域广、应用前景极为瞩目的新研究领域和新技术。利用固定化技术进行单细胞油脂发酵产油实验的意义在于：一方面这样经过固定化技术减少的活力损失，降低了成本；产生的酶保持了酶的原始状态，酶的活力和稳定性更高；固定化的细胞密度大，产酶量大；另一方面利用产油脂酵母游离培养，通过简单的过滤就可以实现固定化菌株和产油酵母的分离，减少外界因素对油脂提取的影响。但是目前实际操作中，还没有比较成熟的培养技术。
技术实现思路
本专利技术旨在解决现有技术存在的上述缺陷，本专利技术的目的在于提供一种固定化联合培养发酵单细胞油脂技术，该固定化联合培养发酵单细胞油脂技术利用产油脂酵母游离培养，通过简单的过滤就可以实现固定化菌株和产油酵母的分离，减少外界因素对油脂提取的影响。为达到上述技术目的，本专利技术采用了一种固定化联合培养发酵单细胞油脂技术，包括PVA聚乙烯醇、海藻酸钠、氯化钙、戊二醛以及甲壳素。在上述基础上，本专利技术公开了该固定化联合培养发酵单细胞油脂技术的具体培养步骤，具体包括：(1)固定化包埋产酶菌A；A、把聚乙烯醇、海藻酸钠、甲壳素按照28份、6份、7份比例进行固定化操作；B、将灭菌后的聚乙烯醇和海藻酸钠、甲壳素冷却到30℃，把准备好的产酶微生物A种子液离心、洗涤制成菌悬液，将制好的菌悬液在超净工作台内与冷却30℃灭菌后的聚乙烯醇和海藻酸钠、甲壳素混合，通过固定化细胞制备器滴滴入灭菌冷却后的5％氯化钙溶液中，放入4℃冰箱中；C、静置2h，浸泡在0.2％左右戊二醛溶液中，30℃下恒温度2h，用大量水反复洗涤，以去除残留的戊二醛溶液，用无菌水洗涤，加入到发酵培养基中28℃进行培养；(2)将固定化的产酶微生物A与产油微生物B进行混合培养，联合生产单细胞油脂。采用上述技术步骤后，本专利技术具有如下优点：1、经过固定化技术减少的活力损失，降低了成本；产生的酶保持了酶的原始状态，酶的活力和稳定性更高；固定化的细胞密度大，产酶量大；2、利用产油脂酵母游离培养，通过简单的过滤就可以实现固定化菌株和产油酵母的分离，减少外界因素对油脂提取的影响。具体实施方式下面采用具体实施方式对本专利技术作进一步的说明。一种固定化联合培养发酵单细胞油脂技术，包括PVA聚乙烯醇、海藻酸钠、氯化钙、戊二醛以及甲壳素。在上述基础上，本专利技术公开了该固定化联合培养发酵单细胞油脂技术的具体培养步骤，具体包括：(1)固定化包埋产酶菌A；A、把聚乙烯醇、海藻酸钠、甲壳素按照28份、6份、7份比例进行固定化操作；B、将灭菌后的聚乙烯醇和海藻酸钠、甲壳素冷却到30℃，把准备好的产酶微生物A种子液离心、洗涤制成菌悬液，将制好的菌悬液在超净工作台内与冷却30℃灭菌后的聚乙烯醇和海藻酸钠、甲壳素混合，通过固定化细胞制备器滴滴入灭菌冷却后的5％氯化钙溶液中，放入4℃冰箱中；C、静置2h，浸泡在0.2％左右戊二醛溶液中，30℃下恒温度2h，用大量水反复洗涤，以去除残留的戊二醛溶液，用无菌水洗涤，加入到发酵培养基中28℃进行培养；(2)将固定化的产酶微生物A与产油微生物B进行混合培养，联合生产单细胞油脂。实施例1把聚乙烯醇、海藻酸钠、甲壳素按照28份、6份、7份比例灭菌冷却30℃后混合，加入产酶微生物A菌液，制备固定化产酶细胞，浸泡在0.2％左右戊二醛溶液中，30℃下恒温度2h，用大量水反复洗涤，以去除残留的戊二醛溶液，用无菌水洗涤，接种产油脂产油微生物B28℃混合培养96小时，分离产油微生物细胞，测定油脂积累量达细胞干重的65±4％。实施例2把聚乙烯醇、海藻酸钠、甲壳素按照28份、6份、7份比例灭菌冷却30℃后混合，加入产酶微生物A菌液，制备固定化产酶细胞，浸泡在0.2％左右戊二醛溶液中，30℃下恒温度2h，用大量水反复洗涤，以去除残留的戊二醛溶液，用无菌水洗涤，接种产油脂产油微生物B28℃混合培养96小时，分离产油微生物细胞，测定油脂积累量达细胞干重的66±3％。以上所述仅是本专利技术的优选实施方式，应当指出，对于本
的普通技术人员来说，在不脱离本专利技术的技术原理的前提下，还可以做出若干改进和变型，这些改进和变型也应视为本专利技术的保护范围。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种固定化联合培养发酵单细胞油脂技术，其特征在于，包括PVA聚乙烯醇、海藻酸钠、氯化钙、戊二醛以及甲壳素。

【技术特征摘要】
1.一种固定化联合培养发酵单细胞油脂技术，其特征在于，包括PVA聚乙烯醇、海藻酸钠、氯化钙、戊二醛以及甲壳素。2.如权利要求1所述的一种固定化联合培养发酵单细胞油脂技术，其特征在于，具体培养步骤如下：(1)固定化包埋产酶菌A；A、把聚乙烯醇、海藻酸钠、甲壳素按照28份、6份、7份比例进行固定化操作；B、将灭菌后的聚乙烯醇和海藻酸钠、甲壳素冷却到30℃，把准备好的产酶微生物A种子液离心、洗涤制...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵春海，李慧东，李振清，孙国荣，
申请(专利权)人：滨州职业学院，
类型：发明
国别省市：山东,37