一种基于鲜烟叶切片观察统计的烤烟成熟度判定方法技术

本发明专利技术公开了一种基于鲜烟叶切片观察统计的烤烟成熟度判定方法，属于烟叶成熟度检测技术领域。本发明专利技术所述的烤烟成熟度判定方法步骤包括鲜烟叶采集及一次判定、鲜烟叶切片制作、切片观察、二次判定。本发明专利技术的方法能够有效的针对烤烟品种提出可量化的成熟指标，有利于保障烟叶适熟采收，不采青或采过熟，从而保障烟叶烤后品质，提高烟叶工业可用性，增加烟农收入。

A Method for Determining the Maturity of Flue-cured Tobacco Based on Observation and Statistics of Fresh Tobacco Slices

The invention discloses a method for determining the maturity of Flue-cured Tobacco Based on observation and statistics of fresh tobacco slices, which belongs to the technical field of Tobacco Maturity detection. The method for determining the maturity of flue-cured tobacco comprises the steps of collecting and determining fresh tobacco leaves at one time, making fresh tobacco slices, observing slices and judging twice. The method of the invention can effectively put forward quantifiable maturity indexes for flue-cured tobacco varieties, and is beneficial to ensuring proper maturity of tobacco leaves, not picking green or over-ripening, thereby ensuring the quality of flue-cured tobacco leaves, improving the industrial availability of tobacco leaves and increasing the income of tobacco farmers.

【技术实现步骤摘要】
一种基于鲜烟叶切片观察统计的烤烟成熟度判定方法
本专利技术属于烟叶成熟度检测
，具体涉及一种基于鲜烟叶切片观察统计的烤烟成熟度判定方法。
技术介绍
烟叶的成熟度是影响烤烟内在质量，外观商品等级、加工时的物理性状和烟叶香吃味等实用价值的重要因素。烤后烟叶的光泽、香吃味、组织结构等都与烟叶的成熟度有着密不可分的联系，成熟度对烟叶的外观质量与品质至关重要。在烘烤中，欠熟叶热反应灵敏，遇热收缩快，不易烘烤；过熟叶细胞解体过早，两者都不能保证烘烤过程中进行的充分而完善的生化变化；成熟叶热反应迟钝，原生质凝固慢，烤后有纹理，因而烘烤质量高。因此在烤烟适度成熟的时候进行采收是保证烤烟品质的关键。但是现有的烟叶成熟度判断通常是以经验为主，烟农主要根据烟叶颜色变黄程度、茎叶角度、叶尖叶缘变化等外观特征来判断烟叶的成熟度然后进行采收，但当前生产中普遍存在下部叶采收过迟，中上部叶采收过早的现象。下部采过熟而多出杂色烟，中部采生、上部采青，中上部烟叶采收后虽然色泽较鲜亮，但颜色偏柠檬，青筋、浮青较多，结构较紧密，香吃味不好。除此之外，还存在由于凭借外观特征进行判定的方法不够准确，会因人而异，存在主观性，且尚无针对某种特色烤烟品种相应的成熟度量化指标的问题，这些问题均会导致烤烟成熟度判定有误差。针对以上问题，有必要专利技术一种基于鲜烟叶切片观察统计的烤烟成熟度判定方法。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种基于鲜烟叶切片观察统计的烤烟成熟度判定方法。本专利技术的目的是这样实现的，包括以下步骤：（1）鲜烟叶采集及一次判定：先对待判定烤烟的鲜烟叶进行外观判定，并采集外观判定成熟的鲜烟叶，备用；（2）鲜烟叶切片：将步骤（1）采集的鲜烟叶采用石蜡切片法进行切片处理，备用；（3）观察：将步骤（2）得到的切片进行观察测量与数据统计分析；（4）二次判定：当鲜烟叶栅栏组织比海绵组织的比值在0.7-0.9μm之间、栅栏组织细胞间隙度在20%-30%之间，即可判断为适度成熟的烟叶。与现有技术相比，本专利技术的有益效果：1、本专利技术针对采收的外观成熟的烟叶进行进一步的鲜烟叶切片，观察测量与数据统计分析，栅栏组织比海绵组织的比值、栅栏组织细胞间隙度等参数对比，从而直观、准确的判断烤烟成熟度，为田间烟叶的采收提供指导。2、本专利技术的鲜烟叶切片方法，通过石蜡包埋切片，使得处理后的切片厚薄均匀、连续完整，在显微镜下图片清晰，便于分析处理。3、本专利技术得到的烤烟成熟度指标有助于量化成熟度，保障采收适熟烟叶，确保烟叶烤后品质，有利于提高烟叶工业可用性，增加烟农收入。具体实施方式下面结合实施例对本专利技术作进一步的说明，但不以任何方式对本专利技术加以限制，基于本专利技术教导所作的任何变换或替换，均属于本专利技术的保护范围。本专利技术所述的基于鲜烟叶切片观察统计的烤烟成熟度判定方法，包括以下步骤：（1）鲜烟叶采集及一次判定：先对待判定烤烟的鲜烟叶进行外观判定，并采集外观判定成熟的鲜烟叶，备用；（2）鲜烟叶切片：将步骤（1）采集的鲜烟叶采用石蜡切片法进行切片处理，备用；（3）观察：将步骤（2）得到的切片进行观察测量与数据统计分析；（4）二次判定：当鲜烟叶栅栏组织比海绵组织的比值在0.7-0.9μm之间、栅栏组织细胞间隙度在20%-30%之间，即可判断为适度成熟的烟叶。进一步的，步骤（1）中所述的鲜烟叶为烤烟中部叶。进一步的，所述的烤烟品种为K326和/或红花大金元。进一步的，步骤（1）中所述的外观成熟的鲜烟叶判定特点有：a.烟叶绿色减退变为绿黄色、浅黄色；b.主脉变白发亮，支脉退青变白；c.茸毛部分脱落或基本脱落，树脂类物质增多，手摸烟叶有黏手感觉；d.叶基部产生分离层，容易采摘，采摘时断面整齐，不带茎皮；e.叶尖下垂，茎叶角度增大；f.叶面起皱，叶尖黄色程度增大或枯焦卷边。进一步的，步骤（2）中的鲜烟叶切片具体包括以下步骤：A、取材与固定：将烟叶剪切成3-5mm的小方块放入事先配好的FAA固定液中保存，固定24h以上即可开始进行脱水处理；B、脱水：取出固定的材料，依次使用50%、60%、70%、80%、90%、95%的酒精进行梯度脱水，每次30min，之后再用纯酒精进行2h脱水，然后更换纯酒精浸泡过夜，最后再换纯酒精脱水1h；C、透明：将脱水后的材料取出，依次使用二甲苯：酒精=1:2、二甲苯：酒精=1:1、二甲苯：酒精=2:1的溶液进行透明处理，每次6h，接着使用纯二甲苯继续处理，每处理6h后更换纯二甲苯，更换2次；D、浸蜡：二甲苯：石蜡（2:1）常温下1天，35℃恒温箱6-12小时，45℃恒温箱6-12小时，60℃恒温箱浸泡6-12小时；二甲苯：石蜡（1:1）60℃恒温箱浸泡6-12小时；二甲苯：石蜡（1:2）60℃恒温箱浸泡6-12小时；石蜡60℃恒温箱6-12小时；E、包埋：浸蜡后，将材料封埋在蜡块中，冷却；F、切片与粘片：将包埋好的材料经过修块后切片，采用转动切片机切成厚度为10μm的连续切片，再将切片粘到载玻片上；G、展片：将粘好的片放到40℃的烘箱中2d；H、脱蜡和染色：将有材料的玻片依次放入纯二甲苯中处理30min、二甲苯：酒精=1:1的溶液中处理15min，接着依次使用纯酒精、95%酒精、90%酒精、85%酒精、70%酒精、60%酒精、50%酒精、30%酒精、蒸馏水分别清洗5min，接着继续使用4%铁矾媒染2h，再使用蒸馏水清洗5min，继续使用苏木精染色8-12h，再使用蒸馏水清洗5min，继续放入2%铁矾中分色5min，再依次使用蒸馏水、30%酒精、50%酒精、60%酒精、70%酒精、85%酒精、90%酒精、95%酒精、纯酒精、二甲苯：酒精=1:1的溶液、纯二甲苯分别处理5min，即可；I、封片：从二甲苯中取出玻片，立即用中性树胶封固，之后放入40℃烘箱中烘2-3d，得到鲜烟叶切片。进一步的，步骤（3）中所述的观察测量具体为：分别在Olympus显微镜下观察和拍照，对烤烟叶片解剖结构进行观察比较；在MoticDMBI-223显微系统下对栅栏组织厚度、海绵组织厚度、栅栏组织细胞间隙度指标进行测量；测量结果为不少于50组重复数据的平均值。进一步的，步骤（3）中所述的数据统计分析具体为：将观察测量数据经MicrosoftExcel整理，并取平均值。实施例1一种基于鲜烟叶切片观察统计的烤烟成熟度判定方法，包括以下步骤：（1）鲜烟叶采集及一次判定：先对待判定烤烟的鲜烟叶进行外观判定，并采集外观判定成熟的鲜烟叶，备用；所述的鲜烟叶为烤烟中部叶。所述的烤烟品种为K326。所述的外观成熟的鲜烟叶判定特点包括：a.烟叶绿色减退变为绿黄色、浅黄色；b.主脉变白发亮，支脉退青变白；c.茸毛部分脱落或基本脱落，树脂类物质增多，手摸烟叶有黏手感觉；d.叶基部产生分离层，容易采摘，采摘时断面整齐，不带茎皮；e.叶尖下垂，茎叶角度增大；f.叶面起皱，叶尖黄色程度增大或枯焦卷边。（2）鲜烟叶切片：将步骤（1）采集的鲜烟叶采用石蜡切片法进行切片处理，备用；具体包括以下步骤：A、取材与固定：将烟叶剪切成3mm的小方块放入事先配好的FAA固定液中保存，固定24h即可开始进行脱水处理；B、脱水：取出固定的材料，依次使用50%、60%、70%、80%、90%、95%的酒精进行梯度脱水，每次30min，之后再用本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于鲜烟叶切片观察统计的烤烟成熟度判定方法，其特征在于包括以下步骤：（1）鲜烟叶采集及一次判定：先对待判定烤烟的鲜烟叶进行外观判定，并采集外观判定成熟的鲜烟叶，备用；（2）鲜烟叶切片：将步骤（1）采集的鲜烟叶采用石蜡切片法进行切片处理，备用；（3）观察：将步骤（2）得到的切片进行观察测量与数据统计分析；（4）二次判定：当鲜烟叶栅栏组织比海绵组织的比值在0.7‑0.9 μm之间、栅栏组织细胞间隙度在20% ‑ 30% 之间，即可判断为适度成熟的烟叶。

【技术特征摘要】
1.一种基于鲜烟叶切片观察统计的烤烟成熟度判定方法，其特征在于包括以下步骤：（1）鲜烟叶采集及一次判定：先对待判定烤烟的鲜烟叶进行外观判定，并采集外观判定成熟的鲜烟叶，备用；（2）鲜烟叶切片：将步骤（1）采集的鲜烟叶采用石蜡切片法进行切片处理，备用；（3）观察：将步骤（2）得到的切片进行观察测量与数据统计分析；（4）二次判定：当鲜烟叶栅栏组织比海绵组织的比值在0.7-0.9μm之间、栅栏组织细胞间隙度在20%-30%之间，即可判断为适度成熟的烟叶。2.根据权利要求1所述的基于鲜烟叶切片观察统计的烤烟成熟度判定方法，其特征在于步骤（1）中所述的鲜烟叶为烤烟中部叶。3.根据权利要求1所述的基于鲜烟叶切片观察统计的烤烟成熟度判定方法，其特征在于所述的烤烟品种为K326或红花大金元。4.根据权利要求1所述的基于鲜烟叶切片观察统计的烤烟成熟度判定方法，其特征在于步骤（1）中所述的外观判定成熟的鲜烟叶特点包括：a.烟叶绿色减退变为绿黄色、浅黄色；b.主脉变白发亮，支脉退青变白；c.茸毛部分脱落或基本脱落，树脂类物质增多，手摸烟叶有黏手感觉；d.叶基部产生分离层，容易采摘，采摘时断面整齐，不带茎皮；e.叶尖下垂，茎叶角度增大；f.叶面起皱，叶尖黄色程度增大或枯焦卷边。5.根据权利要求1所述的基于鲜烟叶切片观察统计的烤烟成熟度判定方法，其特征在于步骤（2）中的鲜烟叶切片具体包括以下步骤：A、取材与固定：将烟叶剪切成3-5mm的小方块放入事先配好的FAA固定液中保存，固定24h以上即可开始进行脱水处理；B、脱水：取出固定的材料，依次使用50%、60%、70%、80%、90%、95%的酒精进行梯度脱水，每次30min，之后再用纯酒精进行2h脱水，然后更换纯酒精浸泡过夜，最后再换纯酒精脱水1h；C、透明：将脱水后的材料取出，依次使用二甲苯：酒精=1:2、二甲苯：酒精=1:1、二甲苯：酒精=2:1的溶液进行透明处理，每次6h，接着使用纯二甲苯继续...

【专利技术属性】
技术研发人员：邹聪明，李军营，胡彬彬，黄维，任可，陈妍洁，赵高坤，徐天养，蔺忠龙，熊开胜，刘芮，李宝乐，陈颐，陈严平，
申请(专利权)人：云南省烟草农业科学研究院，
类型：发明
国别省市：云南,53