一株暹罗芽孢杆菌及其应用制造技术

本发明专利技术提供一种暹罗芽孢杆菌（Bacillus siamensis）GL‑02,其保藏号为CGMCC No.16068。所述菌株在牛肉膏蛋白胨（NB）培养基上繁殖生长形成的单菌落圆形、乳白色、中心稍隆起、表面湿润、透明；镜检呈杆状,具鞭毛,大小为0.7~0.8*1.6~2.2μM，G+，有芽孢;在含有2%‑5%NaCl的牛肉膏蛋白陈培养基上均能生长；所述的牛肉膏蛋白陈(NB)培养基的配方为牛肉膏3g,蛋白陈10g,琼脂12g,水1L,pH6.8‑7.0。暹罗芽孢杆菌(Bacillus siamensis)GL‑02对引起玉米茎腐病、小斑病、弯孢叶斑病的病原菌均具有显著拮抗作用。本发明专利技术还提供暹罗芽孢杆菌(Bacillus siamensis)GL‑02在防治植物真菌病害中的应用,或在制备防治植物真菌病害的微生物制剂中的应用。

A Bacillus Siamensis strain and its application

The present invention provides a Bacillus siamensis GL_02 with a storage number of CGMCC No. 16068. The strain reproduced and grew on the beef paste peptone (NB) medium to form a single colony with round, Milky white, slightly raised center, wet and transparent surface; microscopically, it was rod-shaped and flagellated, and its size was 0.7-0.8*1.6-2.2um, G+, spores; it could grow on the beef paste protein aging medium containing 2%-5% NaCl; the formula of the beef paste protein aging (NB) medium was beef paste 3g, with flagella size of 0.7-0.8*1.6-2.2um M, G+, and spores. Protein aging 10g, agar 12g, water 1L, pH 6.8 7.0. GL_ 02 of Bacillus siamensis had significant antagonistic effects on the pathogens causing maize stem rot, leaf spot and Curvularia leaf spot. The invention also provides the application of Bacillus siamensis GL_02 in the prevention and control of plant fungal diseases, or in the preparation of microbial agents for the prevention and control of plant fungal diseases.

【技术实现步骤摘要】
一株暹罗芽孢杆菌及其应用
本专利技术涉及一种暹罗芽孢杆菌及其防治玉米真菌病害的应用，属于微生物应用于农业植物保护领域。
技术介绍
植物病害是影响农业生产的主要因素之一，一直以来化学农药防治病虫害对农业生产起了十分重要的作用。但由于化学农药的大量使用，带来很多负面作用，如污染生态环境、危害人畜、产生抗药性，伤害非靶标生物，农药残留等问题，严重影响了人类健康和生态平衡等一系列问题，这促使人们探寻对人类和环境无害并具良好防治效果的新型植物病虫害防治策略。随着全球范围内研制开发高效低毒生防制剂的兴起，开发微生物制剂来控制有害生物，已经成为替代或减少化学农药使用的新型防治措施之一，受到世界各国学者、企业和消费者的重视。利用有益微生物防治植物病害始于1921年的Hartely利用真菌防治猝倒病（王晓宇，中国农业科学，2011）。到目前植物病害生防微生物已涉及真菌、放线菌、细菌乃至病毒(噬菌体)等种群，而利用拮抗微生物来防治植物病害成为生物防治的一个主策略，并已显示出良好的应用前景。目前，应用较多的生防细菌是促进植物生长的根际细菌(plantgrowthpromotingrhizobacteria,PGPR)，其对植物的有益作用主要表现在防病和刺激生长两个方面。对病害的防治机制包括拮抗、寄生、竞争、捕食等多种方式,产生的抗生素是拮抗作用的重要作用方式之一。植物促生细菌通过植于根系和优先占领根系或抑制根上有害细菌或真菌的生长从而达到防控作用。生物防治是植物病虫害综合治理的重要手段,对实现农业的可持续发展具有重大意义,而分离与筛选高效生防微生物则是实现生物防治的前提。芽孢杆菌是人类发现最早的细菌之一,分布广泛,其抑制病原菌的范围很广、抗性强、无毒副作用,在动植物的生物防治中,应用比较广泛。芽孢杆菌可产生肤类、脂肽类、磷脂类、多烯类、氨基酸类、核酸类等抗菌物质,不同种类的抗菌物质有不同的生物学活性，因此，芽孢杆菌所分泌的胞外抗菌物质能抑制真菌、细菌、病毒等多种致病因子。目前芽孢杆菌用于植物土传病害的例子很多,例如在美国获得环保局商品化或有限商品化生产应用许可的枯草芽孢杆菌的生防菌株中,、都可以用于植物病害的防治。本专利技术为一种暹罗芽孢杆菌菌株（编号GL-02），及其微生物制剂的制备方法。此菌株对等玉米病害病原菌均有很强的拮抗效果，尤其是对引起玉米茎腐病的禾谷镰孢、玉米小斑病菌和玉米弯孢病菌。而且具有安全环保，对农作物无害等特点。
技术实现思路
本专利技术的暹罗芽孢杆菌编号GL-02，（保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号：CGMCCNo.16068）。此菌株由农田中玉米茎腐病发病严重的根际土壤中分离得到，经生理生化实验和16SrDNA序列比对鉴定为暹罗芽孢杆菌（Bacillussiamensis），其16SrDNA序列长度为1415bp，具体如SEQIDNo.1所示；SEQIDNo.1如下：GCAAGTCGAGCGGACAGATGGGAGCTTGCTCCCTGATGTTAGCGGCGGACGGGTGAGTAACACGTGGGTAACCTGCCTGTAAGACTGGGATAACTCCGGGAAACCGGGGCTAATACCGGATGGTTGTCTGAACCGCATGGTTCAGACATAAAAGGTGGCTTCGGCTACCACTTACAGATGGACCCGCGGCGCATTAGCTAGTTGGTGAGGTAACGGCTCACCAAGGCGACGATGCGTAGCCGACCTGAGAGGGTGATCGGCCACACTGGGACTGAGACACGGCCCAGACTCCTACGGGAGGCAGCAGTAGGGAATCTTCCGCAATGGACGAAAGTCTGACGGAGCAACGCCGCGTGAGTGATGAAGGTTTTCGGATCGTAAAGCTCTGTTGTTAGGGAAGAACAAGTGCCGTTCAAATAGGGCGGCACCTTGACGGTACCTAACCAGAAAGCCACGGCTAACTACGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGTAGGTGGCAAGCGTTGTCCGGAATTATTGGGCGTAAAGGGCTCGCAGGCGGTTTCTTAAGTCTGATGTGAAAGCCCCCGGCTCAACCGGGGAGGGTCATTGGAAACTGGGGAACTTGAGTGCAGAAGAGGAGAGTGGAATTCCACGTGTAGCGGTGAAATGCGTAGAGATGTGGAGGAACACCAGTGGCGAAGGCGACTCTCTGGTCTGTAACTGACGCTGAGGAGCGAAAGCGTGGGGAGCGAACAGGATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAACGATGAGTGCTAAGTGTTAGGGGGTTTCCGCCCCTTAGTGCTGCAGCTAACGCATTAAGCACTCCGCCTGGGGAGTACGGTCGCAAGACTGAAACTCAAAGGAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGTGGAGCATGTGGTTTAATTCGAAGCAACGCGAAGAACCTTACCAGGTCTTGACATCCTCTGACAATCCTAGAGATAGGACGTCCCCTTCGGGGGCAGAGTGACAGGTGGTGCATGGTTGTCGTCAGCTCGTGTCGTGAGATGTTGGGTTAAGTCCCGCAACGAGCGCAACCCTTGATCTTAGTTGCCAGCATTCAGTTGGGCACTCTAAGGTGACTGCCGGTGACAAACCGGAGGAAGGTGGGGATGACGTCAAATCATCATGCCCCTTATGACCTGGGCTACACACGTGCTACAATGGACAGAACAAAGGGCAGCGAAACCGCGAGGTTAAGCCAATCCCACAAATCTGTTCTCAGTTCGGATCGCAGTCTGCAACTCGACTGCGTGAAGCTGGAATCGCTAGTAATCGCGGATCAGCATGCCGCGGTGAATACGTTCCCGGGCCTTGTACACACCGCCCGTCACACCACGAGAGTTTGTAACACCCGAAGTCGGTGAGGTAACCTTTAGGAGCCAGCCG此菌株在牛肉膏蛋白胨（NB）培养基上繁殖生长形成的单菌落圆形、乳白色、中心稍隆起、表面湿润、透明；镜检呈杆状,具鞭毛,大小为0.7~0.8*1.6~2.2μM，G+，有芽孢;能在25℃-45℃的温度下生长，最适温度为40℃；其生长pH范围为6.5-8.5，最适生长pH为8；需氧生长；革兰氏染色阴性，芽孢椭圆形；V.P.试验、淀粉水解试验、吲哚试验、硝酸盐还原试验、柠檬酸盐试验、动力试验、过氧化氢酶试验呈阳性；M.R.、亚硝酸盐还原还原试验、丙二酸盐试验、苯丙氨酸脱氨酶试验、产氨试验、H2S产生试验呈阴性。本专利技术还涉及暹罗芽孢杆菌GL-02在防治植物真菌病害中的应用，或在制备防治植物真菌病害的微生物制剂的应用，所述植物优选为玉米，所述真菌优选为引起玉米茎腐病的禾谷镰孢(Fusariumgraminearum)，引起玉米弯孢菌叶斑病的新月弯孢本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种暹罗芽孢杆菌(Bacillus siamensis)GL‑02,其特征在于,其保藏号CGMCC No.16068。

【技术特征摘要】
1.一种暹罗芽孢杆菌(Bacillussiamensis)GL-02,其特征在于,其保藏号CGMCCNo.16068。2.如权力要求1所述的暹罗芽孢杆菌GL-02，其特征在于，该菌株在牛肉膏蛋白胨(NB)培养基上繁殖生长形成的单菌落圆形、乳白色、中心稍隆起、表面湿润、透明；镜检呈杆状，具鞭毛，大小为0.7~0.8*1.6~2.2μM，G+，有芽孢，其能在25℃~40℃温度下生长，其最适生长温度为32℃；其生长pH范围为6.5~7.5，最适生长pH为6.8;需氧生长；所述的牛肉膏蛋白胨(NB)培养基的配方为：牛肉膏3g,蛋白陈10g,,琼脂12g,水1L,pH6.8-7.0。3.如权力要求1或者2所述的暹罗芽孢杆菌GL-02在防治植物真菌病害中的应用，或在制备防治植物真菌病害的微生物制剂中的应用。4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述植物为玉米；优选地，所述真菌为引起玉米茎腐病的禾谷镰孢(Fusariumgraminearum)，引起玉米小斑病的小斑病菌(Bipolarismaydis)，引起玉米弯孢叶斑病的弯孢病菌（Curvularialunata）中的一种或...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭浩，邢继红，董金皋，柳健虎，张康，曹宏哲，
申请(专利权)人：河北农业大学，
类型：发明
国别省市：河北,13