The invention relates to the technical field of virus antibody preparation, in particular to a method for preparing canine distemper virus immunoglobulin G from donkeys. The preparation method includes the following operations: immunizing young healthy donkeys with canine distemper inactivated vaccine, detecting antibody titer and neutralizing antibody titer after each immunization. When the antibody titer reaches 1:10000 and neutralizing antibody titer reaches 1:256, venous blood is collected, serum is separated, immunoglobulin G is extracted and purified. The immunoglobulin G prepared by this method can be used in clinical treatment of canine distemper virus disease, with an effective rate of 100% and a cure rate of more than 85%. The problem of insufficient antiserum or antibody sources of canine distemper virus is solved.
【技术实现步骤摘要】
一种驴源犬瘟热病毒免疫球蛋白G的制备方法
本专利技术涉及病毒抗体制备
,尤其涉及一种驴源犬瘟热病毒免疫球蛋白G的制备方法。
技术介绍
犬瘟热(caninedistemper)是由犬瘟热病毒(caninedistempervirus,CDV)引起的犬科、鼬科和浣熊科等动物的一种急性、高度接触性传染病。临床上以双相体温升高、随后支气管炎、卡他性肺炎、严重胃肠炎和神经症状为特征。犬瘟热病毒的宿主动物较广,在自然条件下不仅感染不同年龄、性别及品种的犬,同时还感染鼬科、浣熊科及大熊猫科等多种动物(如大熊猫,虎,狮,小熊猫,猞猁,熊,狼等);同时,犬瘟热的发病率和死亡率较高,未经免疫的10月龄以下的幼犬发病率达80%以上,特别是2-5月龄的幼犬发病率和死亡率最高,死亡率高达90%以上。犬瘟热流行不仅对宠物饲养业、毛皮动物养殖业和野生动物保护业造成巨大的经济损伤,同时也给宠物主人造成一定的精神压力。所以有效防治犬瘟热不仅具有重要的经济价值,也具有重要的社会效益。目前,犬瘟热的防治主要通过注射疫苗对其进行预防,然而由于疫苗质量、个体对疫苗免疫应答能力及母源抗体干扰等原因,使得免疫后的幼犬不能得到100%的保护,所以在宠物临床上,犬瘟热病已成为宠物临床上常见的传染病。目前治疗犬瘟热的主要方法有:抗血清(抗体)疗法、中药辅助疗法及防止继发细菌感染的抗生素辅助疗法等。中药治疗主要是针对临床症状进行的一种辅助治疗;抗生素治疗则是一种预防细菌继发感染的辅助治疗。抗血清或抗体治疗是针对犬瘟热病毒进行的一种特异性治疗,在犬瘟热的治疗上占有主要地位。目前治疗用的抗血清或抗体主要来源 ...
【技术保护点】
1.一种驴源犬瘟热病毒免疫球蛋白G的制备方法,其特征在于,具体包括如下步骤:步骤a、对青年健康驴用犬瘟热灭活疫苗接种免疫,当血液中抗体滴度达到1:10000以上、中和抗体效价达到1:256以上时,静脉采血,分离血清;步骤b、将所述血清与等体积的PBS混合,用饱和硫酸铵溶液盐析,用凝胶层析柱脱盐,用DEAE纤维素柱层析纯化,再次用饱和硫酸铵溶液盐析,用凝胶层析柱脱盐,过滤除菌,即得;其中,所述PBS与所述饱和硫酸铵溶液中均含有0.05~0.1M尿素。
【技术特征摘要】
1.一种驴源犬瘟热病毒免疫球蛋白G的制备方法,其特征在于,具体包括如下步骤:步骤a、对青年健康驴用犬瘟热灭活疫苗接种免疫,当血液中抗体滴度达到1:10000以上、中和抗体效价达到1:256以上时,静脉采血,分离血清;步骤b、将所述血清与等体积的PBS混合,用饱和硫酸铵溶液盐析,用凝胶层析柱脱盐,用DEAE纤维素柱层析纯化,再次用饱和硫酸铵溶液盐析,用凝胶层析柱脱盐,过滤除菌,即得;其中,所述PBS与所述饱和硫酸铵溶液中均含有0.05~0.1M尿素。2.根据权利要求1所述的驴源犬瘟热病毒免疫球蛋白G的制备方法,其特征在于,步骤a中所述犬瘟热灭活疫苗的毒株为CDV-L强毒株。3.根据权利要求2所述的驴源犬瘟热病毒免疫球蛋白G的制备方法,其特征在于,所述犬瘟热灭活疫苗为40%(v/v)甲醛灭活苗。4.根据权利要求3所述的驴源犬瘟热病毒免疫球蛋白G的制备方法,其特征在于,步骤a中对青年健康驴接种犬瘟热灭活疫苗的操作为,通过颈部肌肉注射接种...
【专利技术属性】
技术研发人员:仲飞,崔丹,霍珊珊,张建楼,左玉柱,吴峰洋,郑志强,李妍,马玉忠,
申请(专利权)人:河北农业大学,
类型:发明
国别省市:河北,13
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