一种桂郁金中姜黄素类化合物的检测方法技术

本发明专利技术公开了一种桂郁金中姜黄素类化合物的检测方法，包括以下步骤：(1)对照品溶液制备；(2)供试品溶液制备；(3)测定：高效液相的色谱条件为：AgilentSB‑C18色谱柱，流动相为乙腈‑0.25％冰醋酸，检测波长为415‑425nm，柱温为25‑35℃，流速为0.8‑1.2mL/min，进样量为10μL。姜黄素类成分的对照品选自姜黄素、去甲氧基姜黄素和双去甲氧基姜黄素。本发明专利技术的分离效果好，检测灵敏度高，重现性好；通过高效液相色谱法表征桂郁金中姜黄素含量，能够为工业提取检测提供依据，非常有利于桂郁金的质量评价和质量控制标准建立。

A Method for the Detection of Curcumin Compounds in Curcuma Cinnamomi

The invention discloses a detection method for curcumin compounds in Guiyujin, which includes the following steps: (1) preparation of reference solution; (2) preparation of sample solution; (3) determination: high performance liquid chromatography conditions are: AgilentSB C18 column, mobile phase is acetonitrile 0.25% glacial acetic acid, detection wavelength is 415 425 nm, column temperature is 25 35 (?) C, flow rate is 0.8 1.2 mL/min, injection volume. It is 10 micron L. The control substances of curcumin were curcumin, Demethoxycurcumin and didemethoxycurcumin. The method has good separation effect, high detection sensitivity and good reproducibility. The curcumin content in Guiyujin can be characterized by high performance liquid chromatography, which provides a basis for industrial extraction and detection, and is very helpful for the establishment of quality evaluation and quality control standards of Guiyujin.

【技术实现步骤摘要】
一种桂郁金中姜黄素类化合物的检测方法
本专利技术涉及分析测试
，尤其涉及一种桂郁金中姜黄素类化合物的检测方法。
技术介绍
桂郁金是姜科植物广西莪术(CurcumakwangsiensisS.G.LeeetC.F.Liang)的干燥块根，其主产地为广西，性状为长圆锥形或长圆形，气微苦，横切片层纹明显，该药入肝、心、肺经，我国传统医学认为该药具有行气化瘀、清心解郁等功效，现代临床研究指出，该药具有抗氧化、止血、抗凝血、抗炎镇痛、收缩血管等药理作用，在降血脂、抗肿瘤方面具有极大的应用潜力，而经提取分析发现，姜黄素为桂郁金发挥此类药效的主要成分。目前对于桂郁金的成分含量研究大多数为挥发油的检测，均系采用各种方法测定不同产地郁金的挥发油成分。国内外对于姜黄素的提取检测研究多在姜黄中进行，而测定郁金姜黄素类成分的研究较少见。桂郁金与温郁金、绿丝郁金、黄丝郁金都是郁金的要用来源，属于常用中药品种，桂郁金基原复杂，植物来源不同，加之市场流通混乱，所以有必要对其有效成分的分析，能进一步提高郁金质量的可控性。基于此，建立一个切实可行的桂郁金中姜黄素类的检测方法对于分析不同种质桂郁金质量尤为重要，能够为工业提取检测提供依据。姜黄素类成分属于非挥发油类，用高效液相色谱法检测最为常见，也最为方便快捷，但是不同的色谱条件其敏感度也不同，敏感度低的色谱条件很难检测出含量较低的成分，特别是含量低于0.5μg/g的成分。因此，对于色谱条件的探索，便成为了研究高效液相色谱法检测姜黄素类化学成分的关键因素。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种方便快捷、精密度高、重复性及稳定性良好的桂郁金中姜黄素类化合物的检测方法。为了实现上述目的，本专利技术采用的技术方案如下：一种桂郁金中姜黄素类化合物的检测方法，包括以下步骤：(1)对照品溶液制备：取桂郁金姜黄素类成分的对照品，制备对照品溶液，用高效液相色谱方法进行检测，得到标准曲线；所述姜黄素类成分的对照品选自姜黄素、去甲氧基姜黄素和双去甲氧基姜黄素；(2)供试品溶液制备：取待检的桂郁金样品，制备供试品溶液，用高效液相色谱方法进行检测；(3)测定：高效液相的色谱条件为：AgilentSB-C18色谱柱，流动相为乙腈-0.25％冰醋酸，检测波长为415-425nm，柱温为25-35℃，流速为0.8-1.2mL/min，进样量为10μL。较佳地，所述供试品溶液的制备方法为：将0.2-1.0g待检的桂郁金粉末，加入20-50mL的甲醇溶液中，超声提取50-70min，挥干溶剂，加甲醇溶解并定容至2mL量瓶，取上清液过0.45μm微孔滤膜，所得滤液即为供试品溶液。较佳地，所述超声的频率为40KHz，功率为300W。较佳地，高效液相的色谱条件为：AgilentSB-C18色谱柱，流动相为乙腈-0.25％冰醋酸，检测波长为420nm，柱温为30℃，流速为1.0mL/min，进样量为10μL。较佳地，所述AgilentSB-C18色谱柱的长度为250mm，内径为4.6mm，填充剂粒径为5μm。本专利技术由于采用了上述技术方案，具有以下有益效果：本专利技术的分离效果好，检测灵敏度高，重现性好；通过高效液相色谱法表征桂郁金中姜黄素含量，能够为工业提取检测提供依据，非常有利于桂郁金的质量评价和质量控制标准建立；各种质桂郁金中合成姜黄素类次生代谢产物的量大小顺序为姜黄素＞去甲氧基姜黄素＞双去甲氧基姜黄素。附图说明图1是本专利技术的三种姜黄素类混合对照品溶液HPLC色谱图；图2是本专利技术的桂郁金样品A28的HPLC色谱图。其中，A为姜黄素的色谱峰，B为去甲氧基姜黄素的色谱峰，C为双去甲氧基姜黄素。具体实施方式为使本专利技术的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下参照附图并举出优选实施例，对本专利技术进一步详细说明。然而，需要说明的是，说明书中列出的许多细节仅仅是为了使读者对本专利技术的一个或多个方面有一个透彻的理解，即便没有这些特定的细节也可以实现本专利技术的这些方面。本专利技术具体实施方式中使用的原料、设备均为已知产品，通过购买市售产品获得。高效液相色谱仪为沃特世2690型；使用的设备还包括超声波清洗仪、电子天平、电热恒温干燥箱、多功能粉碎机、AgilentSB-C18色谱柱长度为250mm，内径为4.6mm，填充剂粒径为5μm。三种姜黄素类对照均购自上海源叶生物科技有限公司，并且纯度均大于98％，其中姜黄素批号：R25M6S1；去甲氧基姜黄素批号：Y14JS9060，双去甲氧基姜黄素批号：YM0506YA14)；乙腈为色谱纯，冰醋酸等其余试剂均为分析纯。本专利技术试验种源前期采自贵港、钦州、灵山、平南、桂平、金秀等全国各地，经过广西中医药大学药用植物教研室的鉴定后，得出这些实验种源均为姜科植物广西莪术(CurcumakwangsiensisS.G.LeeetC.F.Liang)，其干燥块根即为桂郁金。这些材料统一种植于广西南宁市仙葫基地，采收后洗净，干燥处理。实施例1桂郁金中姜黄素类成分含量的检测1、溶液制备1.1对照品溶液制备精密称定3种姜黄素类对照品适量，加入甲醇，将它们制成每1mL分别含有姜黄素0.0781mg、去甲氧基姜黄素0.0385mg、双去甲氧基姜黄素0.0366mg的溶液。将对照品储备液稀释，其中，姜黄素浓度为1.5792μg/mL、3.4763μg/mL、5.2067μg/mL、7.8182μg/mL、16.4464μg/mL，去甲氧基姜黄素浓度为0.5265μg/mL、1.2687μg/mL、2.5667μg/mL、4.7484μg/mL、11.3963μg/mL，双去甲氧基浓度为0.4353μg/mL、0.9141μg/mL、1.6636μg/mL、3.0283μg/mL、6.3593μg/mL。1.2供试品溶液制备分别精密称定50种种质桂郁金粉末0.5g，加入甲醇溶液30ml，超声提取器提取60mim(40KHz，300W)，挥干溶剂，加甲醇溶解并精确定容至2ml量瓶，上清液过0.45μm微孔滤膜，取10μl进样，作为供试品溶液。2、色谱条件AgilentSB-C18色谱柱(250mm×4.6mm，5μm)，流动相为乙腈-0.25％冰醋酸，检测波长为420nm，柱温为30℃，流速为1.0mL/min，进样量为10μL。用上述色谱条件的高效液相色谱方法分别检测对照品溶液、供试品溶液；按外标法以峰面积计算得到桂郁金中姜黄素、去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素的含量。三种姜黄素类混合对照品溶液HPLC色谱图检测结果，如图1所示。实施例2本实施与实施例1其他工艺参数一致，不同之处仅在于：供试品溶液制备：分别精密称定50种种质桂郁金粉末0.2g，加入甲醇溶液20ml，超声提取器提取50mim(40KHz，300W)，挥干溶剂，加甲醇溶解并精确定容至2ml量瓶，上清液过0.45μm微孔滤膜，取10μl进样，作为供试品溶液。实施例3本实施与实施例1其他工艺参数一致，不同之处仅在于：供试品溶液制备：分别精密称定50种种质桂郁金粉末1.0g，加入甲醇溶液50ml，超声提取器提取70mim(40KHz，300W)，挥干溶剂，加甲醇溶解并精确定容至2ml量瓶，上清液过0.45μm微孔滤膜，取10μl进样，作为供试品溶液。实施例4本实施与实施例1其本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种桂郁金中姜黄素类化合物的检测方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)对照品溶液制备：取桂郁金姜黄素类成分的对照品，制备对照品溶液，用高效液相色谱方法进行检测，得到标准曲线；所述姜黄素类成分的对照品选自姜黄素、去甲氧基姜黄素和双去甲氧基姜黄素；(2)供试品溶液制备：取待检的桂郁金样品，制备供试品溶液，用高效液相色谱方法进行检测；(3)测定：高效液相的色谱条件为：AgilentSB‑C18色谱柱，流动相为乙腈‑0.25％冰醋酸，检测波长为415‑425nm，柱温为25‑35℃，流速为0.8‑1.2mL/min，进样量为10μL。

【技术特征摘要】
1.一种桂郁金中姜黄素类化合物的检测方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)对照品溶液制备：取桂郁金姜黄素类成分的对照品，制备对照品溶液，用高效液相色谱方法进行检测，得到标准曲线；所述姜黄素类成分的对照品选自姜黄素、去甲氧基姜黄素和双去甲氧基姜黄素；(2)供试品溶液制备：取待检的桂郁金样品，制备供试品溶液，用高效液相色谱方法进行检测；(3)测定：高效液相的色谱条件为：AgilentSB-C18色谱柱，流动相为乙腈-0.25％冰醋酸，检测波长为415-425nm，柱温为25-35℃，流速为0.8-1.2mL/min，进样量为10μL。2.根据权利要求1所述的一种桂郁金中姜黄素类化合物的检测方法，其特征在于：所述供试品溶液的制备方法为：将0.2-1.0g待检的桂郁金粉末，加入...

【专利技术属性】
技术研发人员：王建，银胜高，王孝勋，李斌，靳雅惠，陆海琳，杨传强，赵应学，杨妮，苏伟敏，
申请(专利权)人：广西中医药大学，
类型：发明
国别省市：广西,45