一种微滤膜及修饰方法技术

本发明专利技术涉及一种微滤膜及修饰方法，属于膜修饰技术领域，解决了现有技术中的微滤膜对富集后细胞释放困难的问题。本发明专利技术的微滤膜使用温敏水溶性聚合物溶液进行修饰。微滤膜修饰方法，包括：(1)制备体积百分比浓度为0.1％～6％的温敏水溶性聚合物溶液；(2)将温敏水溶性聚合物溶液涂覆于微滤膜上进行修饰，干燥，得到修饰后的微滤膜。本发明专利技术使得膜过滤技术在医疗领域应用更加广泛，检测结果更加精确。

A Microfiltration Membrane and Modification Method

The invention relates to a microfiltration membrane and a modification method, which belongs to the technical field of membrane modification, and solves the problem that the microfiltration membrane in the prior art is difficult to release cells after enrichment. The microfiltration membrane of the invention is modified by a temperature sensitive water soluble polymer solution. The modification methods of microfiltration membranes include: (1) preparing temperature-sensitive water-soluble polymer solutions with volume percentage concentration of 0.1%-6%; (2) coating temperature-sensitive water-soluble polymer solutions on microfiltration membranes for modification, drying, and obtaining modified microfiltration membranes. The invention makes the membrane filtration technology more widely used in the medical field and the detection result more accurate.

【技术实现步骤摘要】
一种微滤膜及修饰方法
本专利技术涉及膜修饰
，尤其涉及一种微滤膜及修饰方法。
技术介绍
存在于外周血中的循环肿瘤细胞(circulatingtumorcell，CTC)及循环肿瘤微栓(circulatingtumormicroemboli，CTM)被认为是肿瘤转移和复发的重要原因和标志物。目前，基于形态学富集的膜过滤技术(isolationbysizeofepithelialtumorcell，ISET)是检测CTC及CTM的主要方法之一。相对于依赖肿瘤相关标志物的特异性富集检测技术(如：EpCAM正向富集法)，ISET技术不受肿瘤细胞表面特异性标志物表达下调的影响，检测出假阴性结果的概率较低，且具有操作方法简单、成本较低、富集获得的CTC及CTM的生物活性高等优势。为达到理想精确的检测目标，微滤膜对所富集细胞的释放率是决定最终检测结果的重要指标。但现有的微滤膜与富集后肿瘤细胞的相互作用、吸附及物理卡塞等现象会导致释放率的极大下降(释放率小于10％)。缓冲溶液正向反向冲洗，浸泡等释放手段几乎无法达到释放效果。
技术实现思路
鉴于上述的分析，本专利技术旨在提供一种微滤膜及修饰方法，用以解决现有微滤膜对富集后细胞释放困难的问题。本专利技术的目的主要是通过以下技术方案实现的：一方面，本专利技术公开了一种微滤膜，该微滤膜上涂覆温敏水溶性聚合物溶液进行修饰，所述温敏水溶性聚合物能够减弱被富集细胞与微滤膜孔之间的相互作用，并且能够修饰微滤膜的孔径。在上述方案的基础上，本专利技术还做了如下改进：进一步，所述温敏水溶性聚合物溶液的体积百分比浓度为0.1％～6％。进一步，所述温敏水溶性聚合物包括聚异丙基丙烯酰胺、聚N-异丙基丙烯酰胺、羟丙基纤维素和聚乙烯醇中的一种或多种。进一步，所述微滤膜的材料包括聚对二甲苯、聚碳酸酯或聚对苯二甲酸乙二酯。另一方面，本专利技术还公开了一种微滤膜修饰方法，包括如下步骤：(1)制备体积百分比浓度为0.1％～6％的温敏水溶性聚合物溶液；(2)将所述温敏水溶性聚合物溶液涂覆于微滤膜上进行修饰，干燥，得到修饰后的微滤膜。在上述方案的基础上，本专利技术还做了如下改进：进一步，所述温敏水溶性聚合物溶液的体积百分比浓度为1％～6％或0.1％～1％。进一步，步骤(2)中，使用喷涂的方式将体积百分比浓度为1％～6％的温敏水溶性聚合物溶液涂覆于微滤膜上，使用直接浸入或喷涂的方式将体积百分比浓度为0.1％～1％的温敏水溶性聚合物溶液涂覆于微滤膜上。进一步，步骤(2)之后还包括：(3)使用修饰后的微滤膜过滤样本；(4)微滤膜释放细胞群。进一步，步骤(4)中，用缓冲溶液冲洗微滤膜，收集得到不同尺寸的细胞群。进一步，步骤(4)中，将步骤(3)中过滤样本后的微滤膜浸入缓冲溶液中，水浴加热，收集得到相应尺寸的细胞群。本专利技术有益效果如下：(1)本专利技术通过在微滤膜表面涂覆能够减弱被富集细胞与微滤膜孔之间相互作用的温敏水溶性聚合物，提高了微滤膜对细胞的释放率，细胞释放率高于90％；(2)本专利技术通过在微滤膜表面涂覆能够修饰微滤膜孔径的温敏水溶性聚合物，增强了微滤膜对不同尺寸细胞群的分级筛选能力；(3)通过调整温敏水溶性聚合物的浓度对微滤膜的孔径、形状进行精准控制；(4)通过调整涂覆方式对微滤膜孔径的均匀性实现精准控制；(5)在特定剂量及温度的缓冲溶液条件下对微滤膜的孔径进行精确调节；(6)经修饰后的微滤膜捕捉率不受影响。本专利技术中，上述各技术方案之间还可以相互组合，以实现更多的优选组合方案。本专利技术的其他特征和优点将在随后的说明书中阐述，并且，部分优点可从说明书中变得显而易见，或者通过实施本专利技术而了解。本专利技术的目的和其他优点可通过说明书、权利要求书中所特别指出的内容中来实现和获得。附图说明附图仅用于示出具体实施例的目的，而并不认为是对本专利技术的限制，在整个附图中，相同的参考符号表示相同的部件。图1为未经修饰的微滤膜示意图；图2为图1的局部放大图；图3为使用低浓度的温敏水溶性聚合物溶液修饰后的微滤膜的孔径形貌图；图4为使用高浓度的温敏水溶性聚合物溶液修饰后的微滤膜的孔径形貌图；图5为本专利技术实施例所使用的过滤装置示意图。附图标记：1-未经修饰的微滤膜；2-过滤装置的上部；3-过滤装置的下部；4-经过修饰的微滤膜。具体实施方式下面结合附图来具体描述本专利技术的优选实施例，其中，附图构成本申请一部分，并与本专利技术的实施例一起用于阐释本专利技术的原理，并非用于限定本专利技术的范围。本专利技术的一个具体实施例，公开了一种经过修饰的微滤膜4，该微滤膜使用温敏水溶性聚合物进行修饰，所涂覆的温敏水溶性聚合物能够减弱被富集细胞与微滤膜孔之间的相互作用，并且能够修饰微滤膜的孔径。实施时，将一定浓度的温敏水溶性聚合物涂覆于未经修饰的微滤膜1上，干燥，如图1所示。与现有技术相比，本实施例提供的微滤膜的有益效果是：(1)本专利技术通过在微滤膜表面涂覆能够减弱被富集细胞与微滤膜孔之间相互作用的温敏水溶性聚合物，提高了微滤膜对细胞的释放率，细胞释放率高于90％；(2)通过在微滤膜表面涂覆能够修饰微滤膜孔径的温敏水溶性聚合物，增强了微滤膜对不同尺寸细胞群的分级筛选能力；(3)经修饰后的微滤膜捕捉率不受影响。考虑到经修饰后的微滤膜用来过滤细胞，所以，选择的温敏水溶性聚合物应该对细胞不具有毒性，本实施例中的温敏水溶性聚合物为聚异丙基丙烯酰胺(PIPAAM)、聚N-异丙基丙烯酰胺(PNIPAM)、羟丙基纤维素(HPC)、聚乙烯醇(PVA)中的一种或多种，上述聚合物连续成膜性好、无毒，具有较低(32～38℃)的最低临界溶解温度(LCST)。示例性地，本实施例微滤膜的材料可以为聚对二甲苯、聚碳酸酯(PC)或聚对苯二甲酸乙二酯(TETP)。本专利技术的另一个具体实施例，公开了一种微滤膜修饰方法，包括如下步骤：(1)制备体积百分比浓度为0.1％～6％的温敏水溶性聚合物溶液；(2)将所述温敏水溶性聚合物溶液涂覆于微滤膜上进行修饰，干燥，得到修饰后的微滤膜。与现有技术相比，本实施例提供的微滤膜修饰方法的有益效果为：通过调整温敏水溶性聚合物的浓度对微滤膜的孔径、形状进行精准控制进而实现对不同尺寸细胞群的分离，从而提高微滤膜对不同尺寸细胞群的分级筛选能力。实验中发现，温敏水溶性聚合物溶液的体积百分比浓度小于0.1％时，无法改善微滤膜的细胞释放率，浓度大于6％时，溶液变为凝胶状，无法涂覆在微滤膜表面，并且浓度过高时会使得微滤膜的孔径收缩严重，使得微滤膜失去过滤功能。因此，本实施例配制的温敏水溶性聚合物溶液的体积百分比浓度为0.1％～6％，上述浓度的温敏水溶性聚合物溶液既能提高改善微滤膜的细胞释放率，又能实现对微滤膜孔径的控制。具体来说，体积百分比浓度为1％～6％的温敏水溶性聚合物溶液对微滤膜的孔径有明显的收缩作用，而体积百分比浓度为0.1％～1％的温敏水溶性聚合物溶液，对微滤膜的孔径形貌没有影响。值得注意的是，由于浓度较高，如果使用直接浸入的方式将体积百分比浓度为1％～6％的温敏水溶性聚合物溶液涂覆于微滤膜上，会使得微滤膜的孔径不均匀，因此，本实施例在涂覆体积百分比浓度为1％～6％的温敏水溶性聚合物溶液时选择的是喷涂的方式，上述涂覆方式能够使微滤膜的孔径均匀，便于细胞通过微滤膜，从而进一步提高微滤膜孔径的均匀性。示例性地，体积本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种微滤膜，其特征在于，在所述微滤膜上涂覆温敏水溶性聚合物溶液进行修饰，所述温敏水溶性聚合物能够减弱被富集细胞与微滤膜孔之间的相互作用，并且能够修饰微滤膜的孔径。

【技术特征摘要】
1.一种微滤膜，其特征在于，在所述微滤膜上涂覆温敏水溶性聚合物溶液进行修饰，所述温敏水溶性聚合物能够减弱被富集细胞与微滤膜孔之间的相互作用，并且能够修饰微滤膜的孔径。2.根据权利要求1所述的微滤膜，其特征在于，所述温敏水溶性聚合物溶液的体积百分比浓度为0.1％～6％。3.根据权利要求1所述的微滤膜，其特征在于，所述温敏水溶性聚合物包括聚异丙基丙烯酰胺、聚N-异丙基丙烯酰胺、羟丙基纤维素和聚乙烯醇中的一种或多种。4.根据权利要求1所述的微滤膜，其特征在于，所述微滤膜的材料包括聚对二甲苯、聚碳酸酯或聚对苯二甲酸乙二酯。5.一种微滤膜修饰方法，其特征在于，用于修饰权利要求1-4所述的微滤膜，包括如下步骤：(1)制备体积百分比浓度为0.1％～6％的温敏水溶性聚合物溶液；(2)将所述温敏水溶性聚合物溶液涂覆于微滤膜上进行修饰，干燥，得到修饰后的微滤膜。6....

【专利技术属性】
技术研发人员：王一凡，王忠晶，刘立滨，许诺，臧金良，
申请(专利权)人：北京机械设备研究所，
类型：发明
国别省市：北京,11