食物芽孢杆菌脱氧核糖核酸酶变体及其用途制造技术

包含多肽变体的洗涤剂组合物以及使用此类组合物和包含多肽变体的织物处理组合物来清洁和/或处理表面的方法。所述组合物可包含阴离子、非离子和/或阳离子表面活性剂。

Deoxyribonuclease variants of Bacillus foodstuffs and their applications

Detergent compositions containing polypeptide variants and methods for cleaning and/or treating surfaces using such compositions and fabric-treatment compositions containing polypeptide variants. The composition may comprise anionic, nonionic and/or cationic surfactants.

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】食物芽孢杆菌脱氧核糖核酸酶变体及其用途参考序列表本专利申请包含计算机可读格式的序列表，其以引用方式并入。专利
本专利技术涉及包含新型脱氧核糖核酸酶(DNase)变体的洗涤剂组合物，其表现出相对于亲本脱氧核糖核酸酶在一种或多种特性上的改变，包括：洗涤性能，洗涤剂稳定性和/或贮存稳定性。本专利技术的变体适合用于清洁过程和洗涤剂组合物，诸如洗衣组合物和洗碗组合物，包括手洗和自动洗碗组合物。本专利技术还涉及编码该变体的分离的DNA序列、表达载体、宿主细胞以及用于制备和使用本专利技术的脱氧核糖核酸酶变体的方法。
技术介绍
为了节约能源和保护环境，许多清洁过程的温度被降低了。此外，许多苛刻的洗涤剂组分(诸如强漂白剂)被替代了，并且短的清洁过程变得越来越受欢迎。当温度降低、漂白剂被替代时，以及当清洁和洗涤过程被缩短时，诸如细菌之类的微生物具有更好的生长条件。微生物通常生存为粘附至许多天然的、工业上的和医学环境中的表面，由包括生物聚合物和大分子在内的细胞外物质包封。所得的包封的微生物的粘液层称为生物膜，其通常围绕于胞外聚合物质(EPS)基质中。EPS是通常由细胞外DNA、蛋白质和多糖构成的聚合物聚集体。诸如生物膜和EPS之类的有机物质的存在可能意味着衣物品变得粘稠，并且污垢可粘附到粘性区域。当脏的衣物品与较少污垢的衣物品一起清洗时，存在于洗涤液体中的污垢倾向于粘附到衣物上(例如通过再沉积的方式)，尤其是如上所述如果衣物很粘稠的情况。因此该衣物品在洗涤后较洗涤前更“脏”了。国际专利申请WO2011/098579(纽卡斯尔大学)和WO2014/087011(诺维信A/S)涉及使用脱氧核糖核酸酶化合物。为了可用于诸如衣物洗涤的清洁过程中，诸如脱氧核糖核酸酶的酶需要在洗涤剂组合物中保持稳定并且与标准洗涤剂组分如表面活性剂、助洗剂、漂白剂等相容。本专利技术提供洗涤剂组合物，诸如清洁和/或处理组合物。
技术实现思路
本专利技术涉及一种包含脱氧核糖核酸酶亲本变体的洗涤剂组合物，其中脱氧核糖核酸酶亲本属于GYS进化枝，并且其中亲本脱氧核糖核酸酶包含基序[D/M/L][S/T]GYSR[D/N](SEQIDNO：25)或ASXNRSKG(SEQIDNO：26)中的一者或两者；和洗涤剂组合物助剂。本专利技术还涉及一种洗涤剂组合物，其包含(a)脱氧核糖核酸酶变体，其与SEQIDNO：1中所示多肽相比、在对应SEQIDNO：1的位点1、4、5、6、7、8、9、10、12、13、14、16、17、19、21、22、24、25、27、28、29、30、32、38、39、40、42、49、51、52、55、56、57、58、59、61、63、65、68、76、77、78、79、80、82、83、92、93、94、99、101、102、104、105、107、109、112、116、125、126、127、130、132、135、138、139、143、144、145、147、149、152、156、157、159、160、161、162、164、166、167、168、170、171、172、173、174、175、176、177、178、179、181和182的一个或多个位点处包含改变，其中变体具有与SEQIDNO：1中所示多肽全长(序列)至少60％、至少65％、至少70％、至少75％、至少80％、至少85％、至少90％、至少96％、至少97％、至少98％、或至少99％的序列同一性，但与SEQIDNO：1中所示多肽的序列同一性少于100％，其中变体具有脱氧核糖核酸酶活性；和(b)助剂。本专利技术还涉及洗涤剂组合物，其包含(a)脱氧核糖核酸酶亲本的变体，其中变体包含基序[[D/M/L][S/T]GYSR[D/N](SEQIDNO：25)或ASXNRSKG(SEQIDNO：26)中的一者或两者，其中所述变体与SEQIDNO：1相比包含一处或多处替换，其中该替换选自：T1I、T1V、T1Y、T1M、T1E、G4N、T5F、T5C、P6V、P6G、S7D、S7T、K8V、S9K、S9Q、S9V、S9L、S9F、S9P、S9R、A10D、A10M、A10I、A10Q、A10V、A10L、A10K、Q12S、Q12V、Q12E、S13D、S13Y、S13Q、S13F、S13R、S13V、S13N、S13H、S13M、S13W、S13K、S13L、S13E、Q14M、Q14R、N16S、A17C、A17V、A17E、A17T、T19K、T19L、T19S、T19I、T19V、K21E、K21M、T22P、T22A、T22V、T22D、T22R、T22K、T22M、T22E、T22H、T22L、T22W、T22F、T22C、T22I、G24Y、S25P、S27N、S27I、S27M、S27D、S27V、S27F、S27A、S27C、S27L、S27E、G28L、Y29W、S30K、S30D、S30H、S30T、D32Q、I38V、I38M、S39A、S39P、S39Y、S39H、S39E、S39N、S39M、S39D、Q40V、S42C、S42L、S42M、S42F、S42W、V49R、L51I、K52I、K52H、A55S、D56I、D56L、D56T、S57W、S57F、S57H、S57C、S57P、S57V、S57R、S57T、Y58A、Y58T、S59C、S59T、S59L、S59Q、S59V、S59K、S59R、S59M、S59I、S59H、N61D、P63A、T65L、T65I、T65V、T65R、T65K、S68V、S68I、S68W、S68Y、S68H、S68C、S68T、S68L、V76G、V76L、V76C、V76K、V76H、V76E、V76A、V76Y、V76N、V76M、V76R、V76F、T77N、T77Y、T77W、T77R、F78I、F78H、F78Y、F78C、T79G、T79R、N80K、S82L、S82E、S82K、S82R、S82H、D83C、D83F、D83L、L92T、A93G、E94N、G99S、S101D、S101A、S102M、S102L、S102V、S102A、S102K、S102T、S102R、T104P、T104A、T105V、T105I、K107L、K107C、K107R、K107H、K107S、K107M、K107E、K107A、K107D、Q109R、Q109S、A112S、S116D、S116R、S116Q、S116H、S116V、S116A、S116E、S116K、A125K、S126I、S126E、S126A、S126C、T127C、T127V、S130E、G132R、D135R、T138Q、W139R、R143E、R143K、S144Q、S144H、S144L、S144P、S144E、S144K、G145V、G145E、G145D、G145A、A147Q、A147W、A147S、G149S、K152H、K152R、S156C、S156G、S156K、S156R、S156T、S156A、T157S、Y159F、K160V、W161L、W161Y、G162Q、G162D、G162M、G162R、G162A、G162S、G本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种洗涤剂组合物，其包含a)脱氧核糖核酸酶亲本的变体，其中所述变体包含基序[D/M/L][S/T]GYSR[D/N](SEQ ID NO：25)或ASXNRSKG(SEQ ID NO：26)的一者或两者，其中所述变体与SEQ ID NO 1相比包含一个或多个替换，其中所述替换选自：T1I、T1V、T1Y、T1M、T1E、G4N、T5F、T5C、P6V、P6G、S7D、S7T、K8V、S9K、S9Q、S9V、S9L、S9F、S9P、S9R、A10D、A10M、A10I、A10Q、A10V、A10L、A10K、Q12S、Q12V、Q12E、S13D、S13Y、S13Q、S13F、S13R、S13V、S13N、S13H、S13M、S13W、S13K、S13L、S13E、Q14M、Q14R、N16S、A17C、A17V、A17E、A17T、T19K、T19L、T19S、T19I、T19V、K21E、K21M、T22P、T22A、T22V、T22D、T22R、T22K、T22M、T22E、T22H、T22L、T22W、T22F、T22C、T22I、G24Y、S25P、S27N、S27I、S27M、S27D、S27V、S27F、S27A、S27C、S27L、S27E、G28L、Y29W、S30K、S30D、S30H、S30T、D32Q、I38V、I38M、S39A、S39P、S39Y、S39H、S39E、S39N、S39M、S39D、Q40V、S42C、S42L、S42M、S42F、S42W、V49R、L51I、K52I、K52H、A55S、D56I、D56L、D56T、S57W、S57F、S57H、S57C、S57P、S57V、S57R、S57T、Y58A、Y58T、S59C、S59T、S59L、S59Q、S59V、S59K、S59R、S59M、S59I、S59H、N61D、P63A、T65L、T65I、T65V、T65R、T65K、S68V、S68I、S68W、S68Y、S68H、S68C、S68T、S68L、V76G、V76L、V76C、V76K、V76H、V76E、V76A、V76Y、V76N、V76M、V76R、V76F、T77N、T77Y、T77W、T77R、F78I、F78H、F78Y、F78C、T79G、T79R、N80K、S82L、S82E、S82K、S82R、S82H、D83C、D83F、D83L、L92T、A93G、E94N、G99S、S101D、S101A、S102M、S102L、S102V、S102A、S102K、S102T、S102R、T104P、T104A、T105V、T105I、K107L、K107C、K107R、K107H、K107S、K107M、K107E、K107A、K107D、Q109R、Q109S、A112S、S116D、S116R、S116Q、S116H、S116V、S116A、S116E、S116K、A125K、S126I、S126E、S126A、S126C、T127C、T127V、S130E、G132R、D135R、T138Q、W139R、R143E、R143K、S144Q、S144H、S144L、S144P、S144E、S144K、G145V、G145E、G145D、G145A、A147Q、A147W、A147S、G149S、K152H、K152R、S156C、S156G、S156K、S156R、S156T、S156A、T157S、Y159F、K160V、W161L、W161Y、G162Q、G162D、G162M、G162R、G162A、G162S、G162E、G162L、G162K、G162V、G162H、S164R、S164T、Q166D、S167M、S167L、S167F、S167W、S167E、S167A、S167Y、S167H、S167C、S167I、S167Q、S167V、S167T、S168V、S168E、S168D、S168L、K170S、K170L、K170F、K170R、T171D、T171E、T171A、T171C、A172G、A172S、L173T、L173A、L173V、Q174L、G175D、G175E、G175N、G175R、M176H、L177I、N178D、N178E、N178T、N178S、N178A、S179E、S181R、S181E、S181D、S181F、S181H、S181W、S181L、S181M、S181Y、S181Q、S181G、S181A、Y182M、Y182C、Y182K、Y182G、Y182A、Y182S、Y182V、Y182D、Y182Q、Y182F、Y182L、Y182N、Y182I、Y182E、Y182T和Y182W，其中所...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.07.13 DK PA2016004201.一种洗涤剂组合物，其包含a)脱氧核糖核酸酶亲本的变体，其中所述变体包含基序[D/M/L][S/T]GYSR[D/N](SEQIDNO：25)或ASXNRSKG(SEQIDNO：26)的一者或两者，其中所述变体与SEQIDNO1相比包含一个或多个替换，其中所述替换选自：T1I、T1V、T1Y、T1M、T1E、G4N、T5F、T5C、P6V、P6G、S7D、S7T、K8V、S9K、S9Q、S9V、S9L、S9F、S9P、S9R、A10D、A10M、A10I、A10Q、A10V、A10L、A10K、Q12S、Q12V、Q12E、S13D、S13Y、S13Q、S13F、S13R、S13V、S13N、S13H、S13M、S13W、S13K、S13L、S13E、Q14M、Q14R、N16S、A17C、A17V、A17E、A17T、T19K、T19L、T19S、T19I、T19V、K21E、K21M、T22P、T22A、T22V、T22D、T22R、T22K、T22M、T22E、T22H、T22L、T22W、T22F、T22C、T22I、G24Y、S25P、S27N、S27I、S27M、S27D、S27V、S27F、S27A、S27C、S27L、S27E、G28L、Y29W、S30K、S30D、S30H、S30T、D32Q、I38V、I38M、S39A、S39P、S39Y、S39H、S39E、S39N、S39M、S39D、Q40V、S42C、S42L、S42M、S42F、S42W、V49R、L51I、K52I、K52H、A55S、D56I、D56L、D56T、S57W、S57F、S57H、S57C、S57P、S57V、S57R、S57T、Y58A、Y58T、S59C、S59T、S59L、S59Q、S59V、S59K、S59R、S59M、S59I、S59H、N61D、P63A、T65L、T65I、T65V、T65R、T65K、S68V、S68I、S68W、S68Y、S68H、S68C、S68T、S68L、V76G、V76L、V76C、V76K、V76H、V76E、V76A、V76Y、V76N、V76M、V76R、V76F、T77N、T77Y、T77W、T77R、F78I、F78H、F78Y、F78C、T79G、T79R、N80K、S82L、S82E、S82K、S82R、S82H、D83C、D83F、D83L、L92T、A93G、E94N、G99S、S101D、S101A、S102M、S102L、S102V、S102A、S102K、S102T、S102R、T104P、T104A、T105V、T105I、K107L、K107C、K107R、K107H、K107S、K107M、K107E、K107A、K107D、Q109R、Q109S、A112S、S116D、S116R、S116Q、S116H、S116V、S116A、S116E、S116K、A125K、S126I、S126E、S126A、S126C、T127C、T127V、S130E、G132R、D135R、T138Q、W139R、R143E、R143K、S144Q、S144H、S144L、S144P、S144E、S144K、G145V、G145E、G145D、G145A、A147Q、A147W、A147S、G149S、K152H、K152R、S156C、S156G、S156K、S156R、S156T、S156A、T157S、Y159F、K160V、W161L、W161Y、G162Q、G162D、G162M、G162R、G162A、G162S、G162E、G162L、G162K、G162V、G162H、S164R、S164T、Q166D、S167M、S167L、S167F、S167W、S167E、S167A、S167Y、S167H、S167C、S167I、S167Q、S167V、S167T、S168V、S168E、S168D、S168L、K170S、K170L、K170F、K170R、T171D、T171E、T171A、T171C、A172G、A172S、L173T、L173A、L173V、Q174L、G175D、G175E、G175N、G175R、M176H、L177I、N178D、N178E、N178T、N178S、N178A、S179E、S181R、S181E、S181D、S181F、S181H、S181W、S181L、S181M、S181Y、S181Q、S181G、S181A、Y182M、Y182C、Y182K、Y182G、Y182A、Y182S、Y182V、Y182D、Y182Q、Y182F、Y182L、Y182N、Y182I、Y182E、Y182T和Y182W，其中所述变体具有与SEQIDNO：1中所示的多肽至少80％的序列同一性并且所述变体具有脱氧核糖核酸酶活性；以及b)一种助剂，优选的量为0.01wt％至99.9wt％。2.根据权利要求1所述的洗涤剂组合物，其中所述脱氧核糖核酸酶亲本的所述变体与所述亲本相比、或与具有SEQIDNO：1中所示的多肽的脱氧核糖核酸酶相比具有改善的稳定性，测量值为半衰期改善系数，HIF。3.根据权利要求1或权利要求2所述的洗涤剂组合物，其中所述变体具有与SEQIDNO：1中所示的多肽至少85％、至少90％、至少91％、至少92％、至少93％、至少94％、至少95％、至少96％、至少97％、至少98％、至少99％，但少于100％的序列同一性。4.根据前述权利要求中任一项所述的洗涤剂组合物，其中与SEQIDNO：1相比改变的总数量是1-20个，例如1-10个和1-5个，诸如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个改变。5.根据前述权利要求中任一项所述的洗涤剂组合物，其中所述助剂选自另外的酶，所述另外的酶选自蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、角质酶、纤维素酶、内切葡聚糖酶、木葡聚糖酶、果胶酶、果胶裂解酶、黄原胶酶、过氧化物酶、卤代过氧合酶、过氧化氢酶和甘露聚糖酶，以及它们的混合物。6.根据前述权利要求中任一项所述的洗涤剂组合物，其包含5wt％至70wt％的表面活性剂，优选包含阴离子和/或非离子表面活性剂。7.根据前述权利要求中任一项所述的洗涤剂组合物，其为衣物洗涤剂组合物。8.根据权利要求1至6中任一项所述的洗涤剂组合物，其为硬质表面清洁剂。9.根据权利要求8所述的洗涤剂组合物，其为盘碟洗涤组合物。10.根据权利要求1至5中任一项所述的洗涤剂组合物，其包含(i)2wt％至50wt％的季铵酯织物软化剂化合物，其优选地选自以下化学式的化合物：{R2(4-m)-N+-[X-Y-R1]m}A-其中：m为1、2或3，条件是每个m的值是相同的；每个R1独立地是烃基、或支链烃基基团，优选地R1是直链的，更优选地R1为部分不饱和的直链烷基链；每个R2独立地是C1-C3烷基或羟烷基基团，优选地R2选自甲基、乙基、丙基、羟乙基、2-羟丙基、1-甲基-2-羟乙基、聚(C2-3烷氧基)、聚乙氧基、苄基；每个X为独立地(CH2)n、CH2-CH(CH3)-或CH-(CH3)-CH2-并且每个n独立地是1、2、3或4，优选地每个n是2；每个Y独立地为-O-(O)C-或-C(O)-O-；A-独立地选自氯化物、硫酸甲酯、和硫酸乙酯，优选地A-选自氯化物和硫酸甲酯；前提条件是当Y为-O-(O)C-时，每个R1中的碳的总和为13至21，优选为13至19。11.根据权利要求10所述的洗涤剂组合物，其为洗涤后处理组合物，优选漂洗添加的。12.根据前述权利要求中任一项所述的洗涤剂组合物在清洁过程诸如衣物洗涤或硬质表面清洁诸如盘碟洗涤中的用途。13.一种包括获得脱氧核糖核酸酶变体的制备洗涤剂组合物的方法，其包括；a)在对应于以下SEQIDNO1的位点的一个或多个位点处将改变导入亲本脱氧核糖核酸酶：1、4、5、6、7、8、9、10、12、13、14、16、17、19、21、22、24、25、27、28、29、30、32、38、39、40、42、49、51、52、55、56、57、58、59、61、63、65、68、76、77、78、79、80、82、83、92、93、94、99、101、102、104、105、107、109、112、116、125、126、127、130、132、135、138、139、143、144、145、147、149、152、156、157、159、160、161、162、164、166、167、168、170、171、172、173、174、175、176、177、178、179、181和182，其中所述变体具有脱氧核糖核酸酶活性，bI回收所述变体；以及将所述脱氧核糖核酸酶变体与洗涤剂组合物助剂混合。14.根据权利要求13所述的方法，其中所述变体与SEQIDNO：1中所示的多肽相比包含1-20个，例如1-10个和1-5个，诸如1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个改变。15.根据权利要求13或14中任一项所述的方法，其中所述改变是替换，并且其中所述替换与SEQIDNO：1中所示多肽相比选自：T1I、T1L、T1V、T1F、T1Y、T1M、T1E、G4N、T5F、T5C、P6V、P6G、S7D、S7T、K8V、S9K、S9Q、S9V、S9L、S9F、S9P、S9R、A10D、A10M、A10I、A10Q、A10T、A10V、A10L、A10K、Q12S、Q12V、Q12E、S13D、S13Y、S13T、S13Q、S13F、S13R、S13V、S13N、S13H、S13M、S13W、S13K、S13L、S13E、Q14M、Q14R、N16S、A17C、A17V、A17E、A17T、A17S、T19K、T19N、T19L、T19S、T19I、T19V、K21Q、K21E、K21M、T22P、T22A、T22V、T22D、T22R、T22K、T22M、T22E、T22H、T22L、T22W、T22F、T22C、T22S、T22I、G24Y、S25P、S25T、S27N、S27I、S27M、S27D、S27T、S27V、S27F、S27A、S27C、S27L、S27E、G28L、Y29W、S30K、S30D、S30H、S30T、D32Q、I38V、I38M、S39A、S39P、S39Y、S39H、S39E、S39N、S39M、S39D、Q40V、S42G、S42C、S42D、S42L、S42M、S42F、S42N、S42...

【专利技术属性】
技术研发人员：拉尔斯·贝耶尔，拉尔斯·亨里克·欧斯特格尔德，安妮特·赫勒·约翰森，克劳斯·格里，托马斯·霍尔博格·比利彻，杰诺特·阿贝尔，斯蒂恩·克劳格斯格尔德，詹斯·E·尼尔森，拉尔斯·吉格，内尔·约瑟夫·兰特，
申请(专利权)人：宝洁公司，
类型：发明
国别省市：美国,US