用于治疗ROR1癌症并抑制转移的抗体和疫苗制造技术

本发明专利技术涉及用于治疗ROR1癌症并抑制转移的抗体和疫苗。本发明专利技术涉及使用抗ROR1抗体或抗原结合片段、ROR1结合肽和ROR1疫苗抑制转移的药物组合物和方法。

Antibodies and vaccines used to treat ROR1 cancer and inhibit metastasis

The present invention relates to antibodies and vaccines for treating ROR1 cancer and inhibiting metastasis. The invention relates to a pharmaceutical composition and method for inhibiting metastasis using anti-ROR1 antibody or antigen binding fragment, ROR1 binding peptide and ROR1 vaccine.

【技术实现步骤摘要】
用于治疗ROR1癌症并抑制转移的抗体和疫苗本申请是分案申请，原申请的申请日为2013年3月15日、申请号为201380045363.0、专利技术名称为“用于治疗ROR1癌症并抑制转移的抗体和疫苗”。相关申请资料本申请依据35U.S.C.§119(e)要求2012年8月24日提交的美国专利申请号61/693,230、2012年10月2日提交的美国专利申请号61/709,055和2012年10月4日提交的美国专利申请号61/709,803的优先权益，这些专利申请的全部内容以引用的方式并入本文中。序列表随附序列表中的材料特此以全文引用的方式并入。命名为“ST-UCSD3820-1WO_ST25.txt”的随附文件在2013年3月14日创建并且为33Kb。这个文件可以在使用WindowsOS的计算机上使用MicrosoftWord访问。
本专利技术一般涉及受体酪氨酸激酶样孤儿受体1抗体和疫苗，以及抑制转移的方法。
技术介绍
癌症是仅次于冠状动脉疾病的第二大人类死亡病因。在世界范围内，每年有数百万人死于癌症。单在美国，癌症每年导致大大超过50万人死亡，每年诊断出约140万个新病例。虽然心脏病所致的死亡已有显著下降，但由癌症引起的死亡一般处于上升中。受体酪氨酸激酶(RTK)在细胞分化、增殖、迁移、血管生成和存活中起关键作用。受体酪氨酸激酶样孤儿受体1(ROR1)是进化上保守的I型膜蛋白，其属于ROR亚家族并且具有含有免疫球蛋白(Ig)样结构域、卷曲状(Frizzled)结构域和三环(Kringle)结构域的胞外域。ROR1缺陷小鼠展现出骨骼和泌尿生殖系统内的多种表型缺陷，以及出生后生长迟缓。ROR1在胚胎发生期间由多种不同癌症而不由正常的产后组织表达，并且可以被视为致癌胚胎表面抗原。功能资料表明，ROR1可以在非经典的WNT信号传导中发挥功能以促进恶性细胞的存活。较新的研究已经显示，非经典的WNT信号传导在乳癌转移的基底样和其它亚型中起主要作用。ROR1人类乳癌的表达还与AKT-CREB路径的活化和增强的肿瘤细胞生长相关联。受体酪氨酸激酶样孤儿受体1(ROR1)是保守的胚胎蛋白，其表达在哺乳动物的胚胎发育期间变得逐渐下降。包括胞外域的完整蛋白质似乎不会在正常的成年哺乳动物组织中显著表达。详细地说，研究尚未鉴别到ROR1在正常成年人类组织的细胞表面(包括正常的非癌性B细胞)上的显著表达(Baker等,Clin.CancerRes.,14:396(2008)；DaneshManesh等,Int.J.Cancer,123:1190(2008)；以及Fukuda等,Proc.Nat'l.Acad.Sci.USA,105:3047(2008))。然而，ROR1在恶性B细胞(B-CLL)和套细胞淋巴瘤(MCL)的细胞表面上表达。还有报导，ROR1在包括伯基特氏淋巴瘤(Burkett'slymphoma)、肾细胞癌、结肠癌和乳癌的某些其它癌细胞系中表达(美国专利申请2007/02075110)。因此，ROR1可以被视为这些癌症的选择性标志物。
技术实现思路
本专利技术提供了针对ROR1的抗体，其可以抑制癌细胞生长和转移。本专利技术提供了针对ROR1的抗体、ROR1结合肽和ROR1肽疫苗。进一步提供了使用抗ROR1抗体或其抗原结合片段、ROR1抗体免疫缀合物、ROR1肽疫苗或ROR1结合肽抑制转移的组合物和方法。在一个实施方案中，本专利技术提供了一种分离的抗人ROR1抗体，其具有与抗体99961相同的结合特异性。在一个方面，抗体结合到与人类ROR-1(hROR1)的CRD结构域相连的Ig样结构域。在另一个方面，抗体结合到定位于hROR-1的氨基酸42-160的表位。在另一个方面，抗体结合到定位于hROR-1的氨基酸130-160的表位。在另一个方面，抗体需要在hROR-1的位置138处存在谷氨酸以供结合。在另一个实施方案中，本专利技术提供了一种分离的抗人ROR1抗体，其包含选自由SEQID.NO:1、SEQID.NO:5、SEQID.NO:9、SEQID.NO:13和SEQID.NO:17组成的组的重链可变区，以及选自由SEQID.NO:3、SEQID.NO:7、SEQID.NO:11、SEQID.NO:15和SEQID.NO:19组成的组的轻链可变区。在一个方面，抗体的重链可变区是SEQIDNO:5并且轻链可变区是SEQIDNO:7。在一个实施方案中，本专利技术提供了一种分离的抗人ROR1抗体，其包含选自由SEQID.NO:27、SEQID.NO:28、SEQID.NO:29、SEQID.NO:33、SEQIDNO:34和SEQID.NO:35组成的组的包含CDR1、CDR2和CDR3的重链可变区，以及选自由SEQID.NO:30、SEQID.NO:31、SEQID.NO:32、SEQID.NO:36、SEQIDNO:37和SEQID.NO:38组成的组的包含CDR1、CDR2和CDR3的轻链可变区。在一个方面，包含CDR1、CDR2和CDR3的重链可变区由SEQID.NO:27、SEQID.NO:28和SEQID.NO:29组成，并且包含CDR1、CDR2和CDR3的轻链可变区选自由SEQID.NO:30、SEQID.NO:31和SEQID.NO:32组成的组。在另一个实施方案中，本专利技术提供了一种抗人ROR-1抗体，其具有高于41nM的结合亲和力。在一个方面，抗体的结合亲和力介于约500pM与约6nM之间。在一个方面，抗体的结合亲和力为约800pM。在一个方面，抗体是99961或其人源化形式，包括抗体99961.1、99961.2、99961.3或99961.4。在另一个方面，抗体抑制转移。在另一个方面，抗体内化并抑制细胞迁移。在另一个方面，抗体内化并下调波形蛋白(vimentin)、snail1/2或ZEB。在一个优选方面，抗体是人类、人源化或嵌合的。在另一个实施方案中，本专利技术提供了一种药物制剂，其包含针对ROR1的抗体和药学上可接受的载体。另一个实施方案提供了一种分离的核酸，其编码针对ROR1的抗体。在另一个实施方案中，本专利技术提供了一种表达载体，其包含编码针对hROR1的抗体的核酸。在另一个实施方案中，本专利技术提供了一种宿主细胞，其包含编码针对hROR1的抗体的核酸。在另一个实施方案中，本专利技术提供了一种产生抗人ROR1抗体的方法，其包括在用以产生抗体的条件下培养宿主细胞，然后任选地回收这种抗体。在一个实施方案中，本专利技术提供了一种针对ROR-1表达细胞的疫苗，这种疫苗包含分离的或合成产生的肽的药学上可接受的组合物，这种肽具有与抗体D10的ROR-1结合区具有至少95％序列同一性的氨基酸序列。在一个方面，抗体D10的ROR-1结合区的氨基酸序列是VATNGKEVVSSTGVLFVKFGPC。在另一个方面，抗体D10的ROR-1结合区的氨基酸序列是EVVSSTGVLFVKFGPC。在另一个方面，ROR-1表达细胞是癌细胞。在另一个方面，癌细胞是B细胞白血病、淋巴瘤、CLL、AML、B-ALL、T-ALL、卵巢癌、结肠癌、肺癌、皮肤癌、胰脏癌、睾丸癌、膀胱癌、子宫癌、前列腺癌或肾上腺癌。在另一个实施方案中，本专利技术提供了一种疫苗，其包含具有与VATN本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种分离的抗ROR1抗体，其具有与抗体99961相同的结合特异性。

【技术特征摘要】
2012.08.24 US 61/693,230;2012.10.02 US 61/709,055;1.一种分离的抗ROR1抗体，其具有与抗体99961相同的结合特异性。2.根据权利要求1所述的抗体，其中所述抗体结合到hROR-1的氨基酸130-160。3.根据权利要求2所述的抗体，其中所述抗体要求ROR1氨基酸138是用于结合到hROR-1的谷氨酸。4.根据权利要求1所述的抗体，其中所述抗体包含选自由SEQID.NO:1、SEQID.NO:5、SEQID.NO:9、SEQID.NO:13和SEQID.NO:17组成的组的重链可变...

【专利技术属性】
技术研发人员：T·J·吉普斯，J·于，B·崔，L·陈，G·韦德夫，C·普鲁萨克，
申请(专利权)人：加利福尼亚大学董事会，
类型：发明
国别省市：美国,US