党参提取物在制备清除DPPH自由基的抗氧化活性药物中的应用制造技术

本发明专利技术公开了党参提取物在制备清除DPPH自由基的抗氧化活性药物中的应用，所述党参提取物为95％乙醇提取物、醇提后水提取物、粗多糖、粗寡糖、精制寡糖成分中的一种或多种。本发明专利技术的有益效果为：本发明专利技术提供了党参提取物在制备清除DPPH自由基的抗氧化活性药物中的应用。表明党参的95％乙醇提取物、醇提后水提取物、粗多糖、粗寡糖、精制寡糖等均有抗氧化作用。通过系统组分含量分析和组分抗氧化活性比较，可为党参抗氧化活性的药效物质发现提供依据。

Application of Codonopsis pilosula extract in preparation of antioxidant drugs scavenging DPPH free radicals

The invention discloses the application of Codonopsis pilosula extract in the preparation of antioxidant active drugs for scavenging DPPH free radicals. The extract of Codonopsis pilosula is one or more components of 95% ethanol extract, ethanol-extracted water extract, crude polysaccharide, crude oligosaccharide and refined oligosaccharide. The beneficial effects of the invention are as follows: The invention provides the application of Codonopsis pilosula extract in the preparation of antioxidant active drugs scavenging DPPH free radicals. The results showed that 95% ethanol extract, water extract after ethanol extraction, crude polysaccharide, crude oligosaccharide and refined oligosaccharide of Codonopsis pilosula had antioxidant effects. The systematic component content analysis and component antioxidant activity comparison can provide a basis for the discovery of effective substances of Codonopsis pilosula antioxidant activity.

【技术实现步骤摘要】
党参提取物在制备清除DPPH自由基的抗氧化活性药物中的应用
本专利技术涉及医药生物
，具体涉及党参提取物在制备清除DPPH自由基的抗氧化活性药物中的应用。
技术介绍
党参为桔梗科植物党参Codonopsispilosula(Franch.)Nann.f，素花党参CodonopsispilosulaNann.fvar.modesta(Nann.f)L.T.Shen或川党参CodonopsistangshenOliv.的干燥根。党参性甘、平，是著名的补益药。目前对党参的研究主要集中在水提取物、醇提取物、多糖、皂苷类，也有较少涉及5-羟甲基糠醛、苍术内酯、黄酮、党参炔苷。党参具有广泛的药理作用，比如抗肿瘤、抗氧化、提高免疫力、提高学习记忆能力等。《百草镜》中曰“以净软壮实味甜者佳”。《药笼小品》中以“西产为上，体糯味甜、嚼之少渣者佳”。因此我们推测，党参中寡糖类成分一方面作为党参中甜味来源，另一方面也有可能是党参中重要的活性成分。然而未见对党参中寡糖成分活性关注的研究报道，本文提及的精制寡糖是经SephadexG-25纯化所得，分子量≦5000Da。《中国药典》2015版中党参质量标准尚无含量测定项。目前尚无对其各组分的抗氧化性进行比较的研究，党参中抗氧化活性最强的究竟是什么组分还未可知。通过系统组分含量分析和组分体外抗氧化活性比较，可为党参抗氧化活性的药效物质发现提供依据。
技术实现思路
本专利技术的目的就是针对上述现有技术中的缺陷，提供了党参提取物在制备清除DPPH自由基的抗氧化活性药物中的应用。为了实现上述目的，本专利技术提供的技术方案为：党参提取物在制备清除DPPH自由基的抗氧化活性药物中的应用，所述党参提取物为95％乙醇提取物、醇提后水提取物、粗多糖、粗寡糖、精制寡糖成分中的一种或多种。进一步的，上述的党参提取物在制备清除DPPH自由基的抗氧化活性药物中的应用，所述党参95％乙醇提取物的制备方法为：10g党参粗粉中加入10倍量体积的95％乙醇，回流提取2次，1h/次，合并滤液，50℃、60rpm减压浓缩至干即可得到党参95％乙醇提取物。进一步的，上述的党参提取物在制备清除DPPH自由基的抗氧化活性药物中的应用，所述党参醇提后水提取物的制备方法为：10g党参粗粉中加入10倍量体积的95％乙醇，回流提取2次，1h/次，滤液用于制备95％乙醇提取物，药渣晾干后加入10倍量水，煎煮提取三次，45min/次，合并滤液，50℃、60rpm减压浓缩至干即可得到党参醇提后水提取物。进一步的，上述的党参提取物在制备清除DPPH自由基的抗氧化活性药物中的应用，所述粗多糖和粗寡糖的制备方法为：10g党参粗粉中加入10倍量体积的95％乙醇，回流提取2次，1h/次，滤液用于制备95％乙醇提取物，药渣晾干后加入10倍量水，煎煮提取三次，45min/次，合并滤液，50℃、60rpm减压浓缩至原体积的1/4，缓慢加入95％乙醇至终浓度为80％，放置过夜后离心，离心转速为10600×g，离心时间为15min，收集上清液与沉淀，上清液于50℃、60rpm条件下，减压浓缩至干即得到粗寡糖；所述沉淀为粗多糖。进一步的，上述的党参提取物在制备清除DPPH自由基的抗氧化活性药物中的应用，所述精制寡糖成分的制备方法为：10g党参粗粉中加入10倍量体积的95％乙醇，回流提取2次，1h/次，滤液用于制备95％乙醇提取物，药渣晾干后加入10倍量水，煎煮提取三次，45min/次，合并滤液，50℃、60rpm减压浓缩至原体积的1/4，缓慢加入95％乙醇至终浓度为80％，放置过夜后离心，离心转速为10600×g，离心时间为15min，上清液于50℃、60rpm条件下，减压浓缩至干后得到粗寡糖；取适量粗寡糖溶于水中，依粗寡糖的上样量选择不同规格的SephadexG-25柱进行纯化，蒸馏水洗脱，洗脱流速为1mL/min，每管收集5mL；以苯酚硫酸法在490nm下测定吸光度，以试管号为横坐标，糖含量为纵坐标，作曲线，根据曲线合并洗脱液，50℃、60rpm减压浓缩至快干，用少量水从浓缩瓶中洗出，置于-80℃冰箱中4h，冷冻干燥24h后即得到精制寡糖成分。本专利技术的有益效果为：本专利技术提供了党参提取物在制备清除DPPH自由基的抗氧化活性药物中的应用。表明党参的95％乙醇提取物、醇提后水提取物、粗多糖、粗寡糖、精制寡糖均有抗氧化作用。通过系统组分含量分析和组分抗氧化活性比较，可为党参抗氧化活性的药效物质发现提供依据。通过实施例可以得知：95％乙醇提取物，醇提后水提取物，粗多糖和粗寡糖均为党参的主要组分，95％乙醇提取物及醇提后水提取物的含量高低与选取产地有关，95％乙醇提取物含量要高于粗多糖含量及粗寡糖含量。研究发现，党参中的95％乙醇提取物、醇提后水提取物、粗多糖、粗寡糖这些组分的DPPH自由基清除活性均不如精制寡糖，17号川党参精制寡糖剂量≥3mg/mL时DPPH自由基清除活性与0.5mg/mL的Vc相当，甚至更强，说明党参寡糖是党参抗氧化的主要有效成分。党参药材各组分中95％乙醇提取物最高可达42.81g/100g，最低为16.84g/100g；醇提后水提取物含量最高为49.87g/100g，最低为24.54g/100g；粗多糖含量最高为27.08g/100g，最低为9.38g/100g；粗寡糖含量最高为33.92g/100g，最低为8.10g/100g。各组分DPPH自由基清除能力为精制寡糖>粗寡糖>95％乙醇提取物>醇提后水提取物>粗多糖，17号党参精制寡糖剂量≥3mg/ml时DPPH自由基清除活性与0.5mg/ml的Vc相当，甚至更强。结论：不同产地不同来源的党参药材，各提取部分含量差异很大。但就某一产地的党参药材而言，95％乙醇提取物得率高于其他成分组。精制寡糖的抗氧化活性最强。附图说明图1显示为党参各组分(95％乙醇提取物、醇提后水提取物、粗多糖、粗寡糖、精制寡糖)制备流程图。图2显示为17批不同产地党参中95％乙醇提取物及醇提后水提取物含量比较。图3显示为17批不同产地党参中的95％乙醇提取物、粗多糖、粗寡糖的含量。图4显示为粗寡糖经SephadexG-25纯化洗脱曲线。图5党参中各组分浓度为5.00mg/mL时的DPPH自由基清除活性比较图6显示浓度为0.00-5.00mg/mL时，不同产地党参精制寡糖及Vc的DPPH自由基清除活性。具体实施方式实施例1：1.材料与方法：1.1试剂与仪器：DPPH(上海源叶生物科技有限公司)，葡聚糖凝胶SephadexG-25(北京索莱宝生物科技有限公司)，葡萄糖标准品(中国药品生物制品检定所)，95％乙醇、苯酚、浓硫酸所有试剂均为分析纯。旋转蒸发仪(Eyela，日本)；恒温电加热板(上海科恒实业发展有限公司)；恒温水浴箱(上海一恒仪器有限公司)；循环水式多用真空泵(郑州长城科工贸有限公司)；电热鼓风干燥箱(上海一恒科学仪器有限公司)；离心机(Hitachi，日本)；冷冻干燥机(Labconco，USA)；电子自动分析天平(Sartorius，Germany)；BS-100N自动部分收集器(上海青浦沪西仪器厂)、BT100N数显恒流泵(上海青浦沪西仪器厂)；UV-1700紫外可见分光光度计本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.党参提取物在制备清除DPPH自由基的抗氧化活性药物中的应用，其特征在于，所述党参提取物为95％乙醇提取物、醇提后水提取物、粗多糖、粗寡糖、精制寡糖中的一种或多种。

【技术特征摘要】
1.党参提取物在制备清除DPPH自由基的抗氧化活性药物中的应用，其特征在于，所述党参提取物为95％乙醇提取物、醇提后水提取物、粗多糖、粗寡糖、精制寡糖中的一种或多种。2.根据权利要求1所述的党参提取物在制备清除DPPH自由基的抗氧化活性药物中的应用，其特征在于，所述党参95％乙醇提取物的制备方法为：10g党参粗粉中加入10倍量体积的95％乙醇，回流提取2次，1h/次，合并滤液，50℃、60rpm减压浓缩至干即可得到党参95％乙醇提取物。3.根据权利要求1所述的党参提取物在制备清除DPPH自由基的抗氧化活性药物中的应用，其特征在于，所述党参醇提后水提取物的制备方法为：10g党参粗粉中加入10倍量体积的95％乙醇，回流提取2次，1h/次，滤液用于制备95％乙醇提取物，药渣晾干后加入10倍量水，煎煮提取三次，45min/次，合并滤液，50℃、60rpm减压浓缩至原体积的1/4，取1/2体积的浓缩水提液，50℃、60rpm减压浓缩至干即可得到党参醇提后水提取物。4.根据权利要求1所述的党参提取物在制备清除DPPH自由基的抗氧化活性药物中的应用，其特征在于，所述粗多糖和粗寡糖的制备方法为：10g党参粗粉中加入10倍量体积的95％乙醇，回流提取2次，1h/次，滤液用于制备95％乙醇提取物，药渣晾干后加入10倍量水，煎煮提取三次，45min/次，合并滤液，50℃、60rpm减压浓缩至原体积的1/4，取1/2体积的浓缩水提液用于制备党参醇提后水提取物，...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡芳弟，马铭，苟晓丹，白瑞斌，王燕萍，张静，
申请(专利权)人：兰州大学，
类型：发明
国别省市：甘肃,62