MEK抑制剂的制备和包含MEK抑制剂的制剂制造技术

本发明专利技术涉及用于制备6‑(4‑溴‑2‑氟苯基氨基)‑7‑氟‑3‑甲基‑3H‑苯并咪唑‑5‑甲酸(2‑羟基乙氧基)‑酰胺的方法、用于制备结晶6‑(4‑溴‑2‑氟苯基氨基)‑7‑氟‑3‑甲基‑3H‑苯并咪唑‑5‑甲酸(2‑羟基乙氧基)‑酰胺的方法以及适用于所述方法的中间体。本文还提供包含此结晶化合物的药物组合物。

【技术实现步骤摘要】
MEK抑制剂的制备和包含MEK抑制剂的制剂本申请是中国专利技术专利申请(申请日：2013年10月18日；申请号：201380063271.5(国际申请号：PCT/US2013/065633)；专利技术名称：MEK抑制剂的制备和包含MEK抑制剂的制剂)的分案申请。相关申请的交叉引用本申请主张2012年10月19日提交的美国临时申请61/716,169号的优先权，该案的内容通过引用整体并入本文中。专利
本文提供用于制备6-(4-溴-2-氟苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-甲酸(2-羟基乙氧基)-酰胺的方法、用于制备结晶6-(4-溴-2-氟苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-甲酸(2-羟基乙氧基)-酰胺的方法以及适用于所述方法的中间体。本文还提供包含此结晶化合物的药物组合物。背景生长因子介导的增殖信号自细胞外环境经由若干路径(包括RAS/RAF/MEK路径)传输至细胞核。RAS/RAF/MEK激酶信号转导路径经由酪氨酸受体激酶(RTK)与其相应的同源配体的初始细胞外结合和由所述配体刺激来活化。在RTK细胞溶质域中的特定酪氨酸残基自体磷酸化时，Grb2-Sos复合物易位至质膜，且使无活性RAS·GDP转化为活性RAS·GTP。Grb2停靠蛋白与活化的激酶或磷酸化的受体相关蛋白之间的相互作用由识别特定磷酸酪氨酸序列的信号传导蛋白的Src同源(SH2)结构域介导。RAS在鸟苷5'-三磷酸(GTP)结合后经历构形变化且引起RAF-1募集至细胞质膜，在此处RAF-1由若干激酶磷酸化且同时在关键残基处由蛋白磷酸酶-2B二磷酸化。活化的RAF磷酸化活化环中两个丝氨酸残基上的促分裂原活化蛋白激酶激酶(MEK)，此导致此蛋白激酶活化。MEK接着使细胞外信号调节激酶(ERK)磷酸化和活化，使得其易位至细胞核，在此处其磷酸化转录因子，从而使多种基因表现。RAS/RAF/MEK信号转导路径在大约1/3的人癌症中通常因导致异位蛋白活化的突变而失调。此失调又导致多种细胞变化，所述变化对于癌症表型的病因学和维持不可或缺，包括(但不限于)促进增殖和逃避细胞凋亡(Dhillon等人,Oncogene,2007,26:3279-3290)。因此，开发RAS/RAF/MEK信号转导路径的关键成员的小分子抑制剂已成为制药工业和肿瘤学界内集中致力的主题。MEK为RAS/RAF/MEK路径中的主要蛋白，其针对细胞增殖和存活传导信号，且经常在RAS或RAF致癌基因中或生长受体酪氨酸激酶中具有突变的肿瘤中活化。MEK为RAS/RAF/MEK路径中的关键参与者，因为其在RAS和RAF下游。尽管MEK1和MEK2蛋白在癌症中仅很少突变(Murugan等人,CellCycle,2009,8:2122-2124；Sasaki等人,J.Thorac.Oncol.,2010,5:597-600)，但还是因其中心位置在RAS/RAF/MEK信号转导路径信号传导级联内而针对小分子抑制作用来开发其抑制剂(Fremin和Meloche,J.Hematol.Oncol.,2010,3:8)。近来，强效MEK抑制剂无法在临床试验中在患有晚期非小细胞肺癌的患者中证实功效(Haura等人,Clin.CancerRes.,2010,16:2450-2457)。在此试验中失效的原因尚不清楚。6-(4-溴-2-氟苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-甲酸(2-羟基乙氧基)-酰胺(在下文中，“化合物A”)为苯并咪唑化合物，其为已知的MEK1和MEK2蛋白的强效选择性抑制剂，且适用于治疗哺乳动物的过度增殖性疾病，尤其癌症。举例而言，在近来公开的罹患不可切除的局部晚期或转移性胆管癌且已接受<1种现有全身性疗法的28名患者的I期研究中，口服化合物A治疗(60mg，每日两次)在至少6周治疗后引起1例完全衰退、1例部分衰退和11例稳定疾病诊断(Finn等人,J.Clin.Oncol.30,2012(增刊4,2012年胃肠癌研讨会(2012GastrointestinalCancersSymposium),摘要号220)。化合物A也被证实在治疗患有BRAFV600或NRAS突变型黑素瘤的患者中有效(Ascierto等人,J.Clin.Oncol.30,2012(增刊,2012年ASCO年会(2012ASCOAnnualMeeting),摘要号8511)。所述化合物以及其制备方法公开于PCT公开案WO03/077914号中。用于制备化合物A的制造方法描述于该文献的实施例18中。其中所述的制造方法尽管适合，仍被视为不利于商业化生产。由于此苯并咪唑化合物尤其作为MEK抑制剂的高效力，需要改良的制造所述化合物的方法。具体地讲，需要提供满足以下标准中的一者或多者的方法：与已知方法相比可规模化、更安全、更简单、产量更高且更经济。还需要用于治疗癌症的新固体形式。本专利技术涉及适用于小规模或大规模制造的化合物A的改良制造方法以及其适用的中间体。本专利技术还涉及用于制造结晶化合物A的方法，以及适用于施用此结晶化合物的新药物组合物。已惊奇地发现，根据本专利技术方法制备的结晶化合物A具有改良的纯度分布和改良的物理形态，其有利于制药药物开发和制造。专利技术概要本文提供用于制备6-(4-溴-2-氟苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-甲酸(2-羟基乙氧基)-酰胺的方法、用于制备结晶6-(4-溴-2-氟苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-甲酸(2-羟基乙氧基)-酰胺的方法以及适用于所述方法的中间体。本文还提供包含此结晶化合物的药物组合物。在一个方面，本文提供一种用于制备化合物6-(4-溴-2-氟苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-甲酸(2-羟基乙氧基)-酰胺(本文中称为“化合物A”)的方法：其中所述方法包括以下步骤：a)使式(I)化合物与适合的碱反应以形成中间体：和b)使所述中间体与式(II)化合物反应：以提供式(III)化合物：或其水合物，其中P1为保护基；c)将所述式(III)化合物或其水合物溶解于适合的溶剂或溶剂体系中；和d)用适合的脱保护试剂使所述式(III)化合物或其水合物脱保护，其中P1在每次出现时可相同或不同且为适合的保护基，以提供化合物A。在另一个方面，本文提供一种用于制备式(III)化合物或其水合物的方法：其中所述方法包括以下步骤：a)使式(I)化合物与适合的碱反应以形成中间体：和b)使所述中间体与式(II)化合物反应：其中P1为保护基，使得形成式(III)化合物或其水合物。在两种方法的某些实施方案中，步骤a)和b)作为“一锅”合成来进行，其中步骤a)的中间体与式(II)化合物反应，而未首先从步骤a)的反应混合物中分离。在一个特定实施方案中，步骤a)包括使式(I)化合物与适合的碱反应以形成中间体1(下文所示的结构)，且步骤b)包括使中间体1与式(II)化合物反应以形成式(III)化合物或其水合物。在一个实施方案中，中间体1未在步骤b)之前从步骤a)的反应混合物中分离。在另一实施方案中，中间体1为包含选自由DMF和THF组成的群的溶剂的溶液的一部分。相比之下，在其它实施方案中，使步骤a)中形成的中间体在与式(II)化合物反应本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于制备6‑(4‑溴‑2‑氟苯基氨基)‑7‑氟‑3‑甲基‑3H‑苯并咪唑‑5‑甲酸(2‑羟基乙氧基)‑酰胺的方法：

【技术特征摘要】
2012.10.19 US 61/716,1691.一种用于制备6-(4-溴-2-氟苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-甲酸(2-羟基乙氧基)-酰胺的方法：所述方法包括以下步骤：a)使式(I)化合物与适合的碱反应以形成中间体：和b)使所述中间体与式(II)化合物反应：以提供式(III)化合物：或其水合物，其中P1为保护基；c)将所述式(III)化合物或其水合物溶解于适合的溶剂或溶剂体系中；以及d)用适合的脱保护试剂使所述式(III)化合物或其水合物脱保护，以提供化合物A，其中P1在每次出现时可相同或不同且为适合的保护基。2.根据权利要求1所述的方法，其中所述适合的保护基选自烷基；烯基；叔芳基-烷基；产生缩醛的基团；和甲硅烷基。3.根据权利要求1所述的方法，其中所述适合的保护基为叔丁基。4.根据权利要求1所述的方法，其进一步包括分离所述中间体。5.根据权利要求4所述的方法，其中所述分离步骤包括使所述中间体结晶。6.根据权利要求4所述的方法，其中所述中间体为式(V)化合物：7.根据权利要求1所述的方法，其中所述中间体与式(II)化合物在偶合剂和质子源存在下反应。8.根据权利要求1所述的方法，其中所述适合的溶剂或溶剂体系为极性非质子溶剂。9.根据权利要求8所述的方法，其中所述适合的溶剂或溶剂体系为乙腈。10.根据权利要求1所述的方法，其中所述适合的脱保护试剂为磷酸。11.根据权利要求1所述的方法，其中使所述式(III)化合物或其水合物进一步与适合的碱反应，以提供化合物A。12.根据权利要求1所述的方法，其进一步包括以下步骤：a)将所述化合物A溶解于包含(i.)包含醚及任选地醇的溶剂体系和(ii.)水的溶液中以提供溶液；b)添加晶种悬浮液至所述溶液中以提供悬浮液混合物；c)冷却所述悬浮液混合物以提供经冷却的悬浮液混合物；d)添加水至所述经冷却的悬浮液混合物中以提供经处理混合物；和e)冷却所述经处理混合物，以提供结晶化合物A。13.根据权利要求12所述的方法，其中所述溶液包含(i.)包含醚和醇的溶剂体系，和(ii.)水。14.根据权利要求13所述的方法，其中所述溶液由甲醇、四氢呋喃和水组成。15.一种用于制备式(III)化合物或其水合物的方法，其中所述方法包括以下步骤：a)使式(I)化合物与适合的碱反应以形成中间体：和b)使所述中间体与式(II)化合物反应：其中P1为保护基，使得形成所述式III化合物或其水合物。16.根据权利要求15所述的方法，其中所述保护基选自烷基；烯基；叔芳基-烷基；产生缩醛的基团；和甲硅烷基。17.根据权利要求16所述的方法，其中所述适合的保护基为叔丁基。18.根据权利要求15所述的方法，其中所述适合的碱选自氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化铯、氢氧化锂、三甲基硅醇钾、三甲基硅醇锂和三甲基硅醇钠。19.根据权利要求18所述的方法，其中所述适合的碱为三甲基硅醇钾。20.根据权利要求18所述的方法，其中所述适合的碱为氢氧化钠。21.根据权利要求18所述的方法，其中所述中间体为式(V)化合物：22.根据权利要求18所述的方法，其进一步包括分离所述中间体。23.根据权利要求22所述的方法，其中所述分离所述中间体的步骤包括使所述中间体结晶。24.一种用于制备结晶6-(4-溴-2-氟苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-甲酸(2-羟基乙氧基)-酰胺(化合物A)的方法：所述方法包括以下步骤：a)将化合物A溶解于包含(i.)包含醚及任选地醇的溶剂体系和(ii.)水的溶液中以提供溶液；b)添加晶种悬浮液至所述溶液中以提供悬浮液混合物；c)冷却所述悬浮液混合物以提供经冷却的悬浮液混合物；d)添加水至所述经冷却的悬浮液混合物中以提供经处理混合物；和e)冷却所述经处理混合物，以提供所述结晶6-(4-溴-2-氟苯基氨基)-7-氟-3-甲基-3H-苯并咪唑-5-甲酸(2-羟基乙氧基)-酰胺。25.根据权利要求24所述的方法，其中所述溶液包含(i.)包含醚和醇的溶剂体系，和(ii.)水。26.根据权利要求25所述的方法，其中将化合物A溶解于由甲醇、四氢呋喃和水组成的溶液中。27.根据权利要求25所述的方法，其进一步包括以下步骤：在添加所述晶种悬浮液之前，加热化合物A与所述包含(i.)包含醚和醇的溶剂体系和(ii)水的溶液的混合物...

【专利技术属性】
技术研发人员：CM克雷尔，M米森，DA尼德尔，WH帕钦格，Mc沃尔夫，D齐默尔曼，W刘，PJ斯滕格尔，P尼科尔斯，
申请(专利权)人：诺华股份有限公司，阵列生物制药公司，
类型：发明
国别省市：瑞士,CH