A method for screening microorganisms resistant to heavy metals is characterized by the following steps in turn: preparing buffer solution, adding heavy metal salt solution to the buffer solution, then preparing buffer solution containing heavy metal ions with different concentration gradients, filtering and sterilization reserve, in which the buffer solution is a neutral inorganic salt buffer solution, and adding buffer solution containing heavy metal ions to the buffer solution. Environmental samples were mixed and prepared into suspension of environmental samples. After mixing, microorganisms in environmental samples were cultured for 0.5-5 hours at 20-40 C for immersion and screening of heavy metal ions. Gradient dilution of the suspension of environmental samples was carried out after immersion, and the diluent was transferred to the medium without heavy metal ions, and then stable heavy metal-tolerant microorganisms were obtained. Biology. The method of the invention has the characteristics of fast, simple, no interference to the culture medium, no selectivity, high recognition rate to heavy metal-resistant microorganisms, and sensitivity to non-heavy metal-resistant microorganisms.
【技术实现步骤摘要】
一种耐重金属微生物的筛选方法
本专利技术属于环境微生物领域,具体涉及一种耐重金属微生物的筛选方法。
技术介绍
铬(Chromium)是现代工业极其重要的重金属原料,广泛应用在电镀,制革,染色工业,防腐和杀菌剂等领域,据估计全球每年有超过17万吨含铬产物进入环境[1]。环境中常见的铬为Cr(III)和Cr(VI),其中Cr(III)低毒且在pH中性环境中迁移力弱,也是生物体重要的痕量元素;而Cr(VI)毒性强,易溶于水,在环境中迁移能力强,可快速渗透进生物的细胞膜,破坏细胞内的蛋白质,核酸并影响代谢过程,短期和长期接触均有致癌风险。含Cr(VI)废弃物进入环境后,极易通过食物链进入人体,因此美国环境保护署将Cr(VI)列为17种对人类威胁最大的物质之一。首次报道微生物对Cr(VI)具有耐性是在20世纪70年代后期,Romanenko和Koren’Kov从活性污泥中分离出一株Pseudomonas,其在厌氧条件下能将Cr(VI)还原为Cr(III){VI,1977#50}。目前为止许多微生物都已经被证实具有去除Cr(VI)的能力,比如细菌中的Aerococcus,Micrococcus和Aeromonas;酵母有S.cerevisiae,Rhodotorulapilimanae,Yarrowialipolytica和Hanseulapolymorpha,真菌有Trichoderma,Hypocreatawa和Paecilomyceslilacinus,代表性藻类有Chlorellaminiata和Cladophoraalbida。微生物对Cr(VI)的去除机理 ...
【技术保护点】
1.一种耐重金属微生物的筛选方法,其特征在于:依次包括以下步骤:第一步,缓冲体系的建立:配制缓冲溶液,向所述缓冲溶液中加入重金属盐溶液,再配制成不同浓度梯度的含有重金属离子的缓冲液,过滤灭菌后备用,其中,所述缓冲溶液为pH在7.0‑8.0的中性无机盐缓冲溶液;第二步,利用缓冲体系原位筛选耐重金属微生物活体细胞:将所述含有重金属离子的缓冲液与环境样品混合,制备成环境样品悬浊液,混匀后在20~40℃恒温条件下培养0.5~5小时,让所述环境样品中的微生物接受重金属离子浸泡筛选;第三步,耐重金属微生物活体细胞的分离及再培养:完成浸泡后对所述环境样品悬浊液进行梯度稀释得到稀释液,将所述稀释液转接于不含重金属离子的培养基中,通过在培养基进行再培养得到稳定的耐重金属微生物。
【技术特征摘要】
1.一种耐重金属微生物的筛选方法,其特征在于:依次包括以下步骤:第一步,缓冲体系的建立:配制缓冲溶液,向所述缓冲溶液中加入重金属盐溶液,再配制成不同浓度梯度的含有重金属离子的缓冲液,过滤灭菌后备用,其中,所述缓冲溶液为pH在7.0-8.0的中性无机盐缓冲溶液;第二步,利用缓冲体系原位筛选耐重金属微生物活体细胞:将所述含有重金属离子的缓冲液与环境样品混合,制备成环境样品悬浊液,混匀后在20~40℃恒温条件下培养0.5~5小时,让所述环境样品中的微生物接受重金属离子浸泡筛选;第三步,耐重金属微生物活体细胞的分离及再培养:完成浸泡后对所述环境样品悬浊液进行梯度稀释得到稀释液,将所述稀释液转接于不含重金属离子的培养基中,通过在培养基进行再培养得到稳定的耐重金属微生物。2.根据权利要求1所述的一种耐重金属微生物的筛选方法,其特征在于:在所述第一步中,所述缓冲溶液为磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液、磷酸氢二钠-磷酸二氢钾缓冲液以...
【专利技术属性】
技术研发人员:梅丽娟,施林林,殷士学,
申请(专利权)人:苏州市农业科学院,
类型:发明
国别省市:江苏,32
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