A ratio fluorescent probe for detecting glucosyltransferase and its application belong to the field of biomedical technology. The probe has a 4 hydroxynaphthalimide structure mother nucleus and is a ratio fluorescent probe. The glycosylation products catalyzed by glucosyltransferase still have fluorescence properties. According to the fluorescence intensity ratio of the probe substrate and its glycosylation products, the probe can be used to determine the activity of glucosyltransferase in the system. The probe can be used to analyze the activity of recombinant expressed glucosyltransferase and to detect the activity of glucosyltransferase in biological samples from different species and individuals. In particular, the use of this probe to determine and analyze the expression of glucosyltransferase in plant medicinal materials with glycosides as the main pharmacodynamic substances plays an important guiding role in plant harvesting and quality control of medicinal materials.
【技术实现步骤摘要】
一种检测葡萄糖基转移酶的比率型荧光探针及其应用
本专利技术属于生物医药
,一种检测葡萄糖基转移酶的比率型荧光探针及其应用。
技术介绍
糖基转移酶(Glycosyltransferases,GT;EC2.4.x.y)是高度分歧的多源基因家族,广泛存在于所有有机体中,催化糖基从活化的供体分子转移到受体分子上。糖基的供体分子是多种多样的,除了常见的糖类、磷酸糖、核苷磷酸糖和尿苷二磷酸葡萄糖醛酸外,尿苷二磷酸-木糖、尿苷二磷酸-鼠李糖、尿苷二磷酸-半乳糖等也可作为糖基供体。在植物中,一般用尿苷二磷酸-葡萄糖来提供糖基分子。糖基的受体分子有葡萄糖、果糖、核糖等单糖,蔗糖、乳糖等2-10个糖苷键链接而成的寡糖,淀粉、糖原、纤维素等10个以上糖苷键相连的多糖。此外,还有一些非糖类的化合物(如脂类,甾醇,萜类化合物,酚类,蛋白质,抗生素,激素类)和农药等非生物体物质。通常糖基分子结合在受体分子的羟基(-OH)和羧基(-COOH)氧原子、氨基(-NH2)氮原子、巯基(-SH)硫原子和碳(C-C)等原子上。糖基化反应的产物有双糖、寡糖、苷类和次生代谢产物的小分子化合物等。由于糖基化修饰在调节植物激素平衡、内外源物质的解毒以及防御反应和次生代谢产物的修饰方面发挥着重要作用,糖基转移酶被认为是植物中最为重要的生物合成酶之一。葡萄糖基转移酶(glucosyltransferases,GT,EC2.4.1)能够催化活性葡萄糖供体,例如尿苷二磷酸-葡萄糖,与其他受体分子结合生成糖苷类成分或者多糖类成分。上述含糖基的成分往往是植物中的具有重要生物活性的物质,亦是天然产物来源的重要药 ...
【技术保护点】
1.一种检测葡萄糖基转移酶的比率型荧光探针,其特征在于:该探针具有结构式(1)所示的化学结构,可用于葡萄糖基转移酶的活力检测与分析;
【技术特征摘要】
1.一种检测葡萄糖基转移酶的比率型荧光探针,其特征在于:该探针具有结构式(1)所示的化学结构,可用于葡萄糖基转移酶的活力检测与分析;。2.根据权利要求1所述的一种检测葡萄糖基转移酶的比率型荧光探针的应用,其特征在于:该探针在葡萄糖基转移酶的催化作用下,可接受活性葡萄糖供体尿苷二磷酸-葡萄糖,生成葡萄糖基化产物,如结构式(2)所示;。3.根据权利要求2所述的一种检测葡萄糖基转移酶的比率型荧光探针的应用,其特征在于:结构式(1)探针的荧光属性为:激发波长450nm,发射波长550nm;结构式(2)葡萄糖苷化产物的荧光属性为:激发波长360nm,发射波长440nm;根据结构式(2)葡萄糖基化产物在440nm的荧光强度与剩余探针在550nm的荧光强度比值R=I440/I550,测定葡萄糖基转移酶的活力。4.根据权利要求2所述的一种检测葡萄糖基...
【专利技术属性】
技术研发人员:马骁驰,王超,冯磊,田象阁,霍晓奎,宁静,于振龙,孙成鹏,
申请(专利权)人:大连医科大学,
类型:发明
国别省市:辽宁,21
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