毛叶蔷薇果实提取物的用途制造技术

本发明专利技术公开了毛叶蔷薇果实提取物的用途，即毛叶蔷薇果实提取物在制备防治非酒精性脂肪肝及肝损伤药物和保健食品中的应用；本发明专利技术通过细胞实验对毛叶蔷薇果实提取物防治非酒精性脂肪肝和肝细胞损伤的功能分别进行了验证；实验结果证实各提取物组分均可以有效地抑制脂肪在肝细胞内沉积，具有良好的防治非酒精性脂肪肝的功能；同时，各组分均可以显著地抑制H2O2诱导的肝细胞内ROS生成，保护肝细胞免于H2O2的氧化损伤；且毛叶蔷薇果实的价格低廉、分布广泛、种植简单、原料易得；总之毛叶蔷薇果实提取物在制备防治非酒精性脂肪肝及肝损伤药物和保健食品方面拥有良好的开发利用前景。

Application of Rosa tomentosa Fruit Extract

The invention discloses the use of Rosa tomentosa fruit extract, that is, the application of Rosa tomentosa fruit extract in the preparation of medicines and health food for preventing and curing non-alcoholic fatty liver and liver injury; the function of Rosa tomentosa fruit extract in preventing and curing non-alcoholic fatty liver and liver cell injury is verified by cell experiments; the experimental results confirm that each extract component can be used. In order to effectively inhibit the deposition of fat in hepatocytes, it has a good function of preventing and treating non-alcoholic fatty liver. At the same time, each component can significantly inhibit the formation of ROS in hepatocytes induced by hydrogen peroxide, protect hepatocytes from oxidative damage caused by hydrogen peroxide; and Rosa tomentosa fruit is cheap, widely distributed, simple to grow and easy to obtain raw materials; in a word, Rosa tomentosa fruit extract is prepared. The preparation of drugs and health food for the prevention and treatment of non-alcoholic fatty liver and liver injury has good prospects for development and utilization.

【技术实现步骤摘要】
毛叶蔷薇果实提取物的用途
本专利技术涉及毛叶蔷薇果实提取物在制备防治非酒精性脂肪肝及肝氧化损伤的保健食品或药品中的应用，属于食品或医药

技术介绍
随着社会经济的发展，人们的物质生活越来越丰富，而与此同时非酒精性脂肪肝的发病率也越来越高；现在普遍认为产生非酒精性脂肪肝的原因主要为“二次打击”。第一次打击是高脂饮食导致大量的脂肪在肝细胞内沉积；第二次打击是当肝细胞内脂肪沉积过多后使得肝细胞的氧化应激状态升高进而更容易造成线粒体功能障碍和肝细胞氧化损伤，最后导致非酒精性脂肪肝炎。非酒精性脂肪肝的临床症状表现有多种，多数也并无不良反应，但严重后，可能会出现黄疸、甚至是亚急性肝衰竭。目前对于非酒精性脂肪肝的治疗没有特效手段。所以对其预防的意义远远大于治疗。除了保持经常性的运动外，如何能够通过饮食，包括合理的饮食习惯，以及补充抗氧化剂来预防肝脏疾病，尤其是非酒精性脂肪肝的发生就显得尤为重要。研究表明植物性食材中多种天然化合物可以有效地抑制肝细胞内过多的脂肪沉积，而且在这些天然化合物里，植物多酚还具有很好的抗氧化活性，从而可以有效地降低肝细胞内因脂肪沉积造成的氧化应激水平，防止肝细胞氧化损伤，预防酒精性脂肪肝炎的发生。毛叶蔷薇（RosamaireiLévl.）是蔷薇科蔷薇属植物，又叫栽秧果，广泛分布于我国西南地区，资源丰富，自古以来一些地方药典中便有关于毛叶蔷薇果实能够用于治疗疾病的记载，彝药用其果实治疗骨折、枪伤、腹泻、胃痛、腹内肿块，中药通常用果实治疗积食腹胀和肠鸣腹泻。但是目前国内外对毛叶蔷薇果实提取物防治非酒精性脂肪肝及肝细胞氧化损伤的相关研究未见有文献报道。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供毛叶蔷薇果实提取物在医药和保健食品方面的新用途，具体而言就是毛叶蔷薇果实提取物在防治非酒精性脂肪肝及肝氧化损伤等相关疾病中应用。本专利技术致力于毛叶蔷薇果实提取物防治非酒精性脂肪肝及肝氧化损伤的实验研究，经过试验证实毛叶蔷薇果实提取物对非酒精性脂肪肝及H2O2诱导的肝氧化损伤有显著的保护作用。本专利技术对毛叶蔷薇果实防治非酒精性脂肪肝及肝氧化损伤进行了系列的研究，证实了毛叶蔷薇果实提取物具有确切的肝保护功能，因此可用于防治非酒精性脂肪肝及肝氧化损伤新药和新保健食品的制备与开发。毛叶蔷薇果实提取物用于制备防治非酒精性脂肪肝及肝氧化损伤药物和保健食品具有以下这些优势：毛叶蔷薇果实植物可以适应各种恶劣的自然环境，在我国的西南地区广泛分布，其果实价格非常的低廉；果实本身除了可作药用外，还可以食用，因此其安全性高；其提取物的提取和制备的工艺流程简单、市场前景可观、蕴藏着良好的社会和经济效应。本专利技术中毛叶蔷薇果实提取物的制备按常规的植物中药材提取方法提取原料的活性组分，原料的提取方法可以采用但不限于以下方法：将毛叶蔷薇果实冻干、粉碎，用质量浓度75-85%的甲醇溶液超声提取毛叶蔷薇果实粉末，料液比g:mL为1:4-10，在40-45℃下超声提取30-60min，过滤，滤渣重复提取2-3次，合并滤液；减压浓缩得提取物1；将浓缩液通过离子交换树脂（AmeberliteXAD-7）柱，用质量浓度1-2%的甲酸水溶液洗柱子，除去非多酚类物质（如糖、蛋白质等），再用甲醇洗脱得到多酚类物质，收集甲醇洗脱液旋蒸浓缩、冻干后即得到毛叶蔷薇果实多酚粗提物，于-20℃保存为提取物2；取提取物2，用纯水溶解后上葡聚糖凝胶（SephadexLH-20）柱，随纯水洗脱出的即为酚酸溶液，收集流出液旋蒸浓缩、冻干后即得毛叶蔷薇果实酚酸组分，为提取物3，称重，放于-20℃下保存；再用含有5-10%甲酸的质量浓度60-80%甲醇溶液淋洗葡聚糖凝胶柱，收集物洗脱液旋蒸浓缩冻干后，用质量浓度5-10%的甲酸水溶液溶解，经过固相萃取小柱（GenerikH2P聚合物SPE柱）近一步分离，用质量浓度5-10%的甲酸水淋洗除去杂质，再用乙酸乙酯洗脱，收集合并洗脱液，浓缩冻干得到黄酮组分，为提取物4；再用含有8-12%甲酸的质量浓度70-80%甲醇溶液继续淋洗固相萃取小柱，收集洗脱液，旋蒸浓缩、冻干得到花色苷组分，为提取物5。与现有技术相比，本专利技术具有如下优点：1、本专利技术为毛叶蔷薇果实发掘了新的保健食品或医疗用途，开拓了一个新的研究领域；2、本专利技术通过实验发现毛叶蔷薇果实不同提取物（毛叶蔷薇的总多酚提取物、酚酸组分提取物、黄酮组分提取物和花色苷组分）在较低浓度下均可以有效的抑制非酒精性脂肪肝模型肝细胞中脂肪滴的沉积；且提取物来自于可食用的野生天然植物原材料，安全性高。附图说明图1毛叶蔷薇果实不同提取物对HepG2细胞内TG含量的影响；图2毛叶蔷薇果实不同提取物抑制HepG2细胞内TG沉积的机理；图3毛叶蔷薇果实不同提取物对细胞内ROS含量的抑制结果示意图；图4毛叶蔷薇果实不同提取物对细胞内ROS含量抑制的流式图。具体实施方式下面结合具体实例来进一步地阐述本专利技术。这些实验的事例仅用于说明本专利技术，不用于限制本专利技术的应用范围，在阅读了本专利技术的记载以后，本领域的科技人员对其等效的各种改动、修改和修饰，都属于本专利技术权利要求所限定的范围。实施例1毛叶蔷薇果实各酚类物质组分的制备：将毛叶蔷薇果实冻干、粉碎，用质量浓度80%的甲醇溶液超声提取毛叶蔷薇果实粉末，料液比g:mL为1:5，在40℃下超声提取30min，过滤，滤渣重复提取2次，合并滤液；低压、40℃旋蒸浓缩得样品1；将浓缩液通过离子交换树脂（AmeberliteXAD-7），用质量浓度1%的甲酸水溶液洗柱子除去非多酚类物质（如糖、蛋白质等），再用甲醇洗脱得到多酚类物质，收集甲醇洗脱液旋蒸浓缩、冻干后即得到毛叶蔷薇果实多酚粗提物，称重，于-20℃保存，为样品2；取样品2，用纯水溶解后上葡聚糖凝胶（SephadexLH-20），随纯水洗脱出的即为酚酸溶液，收集流出液旋蒸浓缩、冻干后既得到毛叶蔷薇果实酚酸组分，为样品3，称重，放于-20℃下保存；再用含有5%甲酸的质量浓度70%甲醇溶液淋洗葡聚糖凝胶柱，收集洗脱液旋蒸浓缩冻干后，用质量浓度5%的甲酸水溶液溶解，经过固相萃取小柱（GenerikH2P聚合物SPE柱）近一步分离，用质量浓度5%的甲酸水溶液淋洗除去杂质，用乙酸乙酯洗脱，收集洗脱液，混合后浓缩冻干得到黄酮组分，为样品4；再用含有10%甲酸的质量浓度70%甲醇溶液继续淋洗固相萃取小柱，收集洗脱液，旋蒸浓缩、冻干得到花色苷组分，为样品5。实施例2：毛叶蔷薇果实各酚类物质组分中总酚含量的测定：用质量浓度80%的甲醇溶液溶解冻干的样品，制成1mg/mL样液，取1mL加入10mL离心管后，加入6mL蒸馏水以及0.5mL福林酚，混匀后加入1.5mL质量浓度20%Na2CO3溶液，最后用蒸馏水将整个反应体系定容至10mL；70℃水浴（10min）后恢复至室温，用酶标仪测量765nm处的吸光值。以没食子酸为当量作标准曲线，样品的总酚含量表示为：mg没食子酸/g提取物干重，结果如表1所示；毛叶蔷薇果实各物质组分中总黄酮含量：用70%的乙醇溶解冻干的提取物，取1mL样液于离心管，并加入2.5mL70%乙醇，再依次向离心管中加入0.15mL5%NaNO2、0.15mL质量浓度10%Al(NO3)3，摇匀；再加入1mol/LNaOH1mL，然后用质本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.毛叶蔷薇果实提取物在制备抗酒精性脂肪肝及肝氧化损伤药物中的应用。

【技术特征摘要】
1.毛叶蔷薇果实提取物在制备抗酒精性脂肪肝及肝氧化损伤药物中的应用。2.毛叶蔷薇果实提取物在制备抗酒精性脂肪肝及肝氧化损伤保健食品中的应用。3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于，毛叶蔷薇果实提取物的制备工艺如下：将毛叶蔷薇果实冻干、粉碎，用质量浓度75-85%的甲醇溶液超声提取毛叶蔷薇果实粉末，料液比g:mL为1:4-10，在40-45℃下超声提取30-60min，过滤，滤渣重复提取2-3次，合并滤液；减压浓缩得提取物1；将浓缩液通过离子交换树脂柱，用质量浓度1-2%的甲酸水溶液洗柱子，，再用甲醇洗脱得到多酚类物质，收集甲醇洗脱液旋蒸浓缩、冻干后即得到毛叶蔷薇果实多酚粗提物，于-20℃...

【专利技术属性】
技术研发人员：蔡圣宝，高凡丁，庞明杰，王春丽，张缘月，杨俊娴，
申请(专利权)人：昆明理工大学，
类型：发明
国别省市：云南,53