一种液体型凝血酶时间检测试剂制造技术

本发明专利技术涉及一种液体型凝血酶时间检测试剂，属于医学体外诊断领域。本发明专利技术的液体型凝血酶时间检测试剂由下列组分组成：牛凝血酶2‑4U/mL；Tris 10～66mM；明胶0.1～3％；PEG 60000.1～2％；BSA 0.1～5％；氯化钠0.1～1.5％；苄脒盐酸盐2mM～12mM；防腐剂ProClin300 0.5～3‰；余量为水。本发明专利技术通过研究凝血反应机制，提供了一种液体型凝血酶时间检测试剂，该检测试剂采用独特的缓冲体系稳定凝血酶活性，使凝血酶时间检测试剂稳定性和重复性验证准确度更高，方便于临床应用，且降低医疗成本，互利于医疗与病患，避免资源浪费。本发明专利技术的液体型凝血酶时间检测试剂，应用于抗凝物质存在或者纤维蛋白原溶解系统异常和凝血异常监测治疗，最终将凝血酶液体试剂广泛应用于临床检测，使凝血酶时间检测更加方便、准确、标准化。

【技术实现步骤摘要】
一种液体型凝血酶时间检测试剂
本专利技术属于医学体外诊断领域，具体涉及一种液体型凝血酶时间检测试剂。
技术介绍
凝血酶是作用于凝血过程中的一种蛋白，与血浆中游离的纤维蛋白原相结合，将其转变为不可溶的纤维蛋白，从而使血液凝固。凝血酶时间(TT)是指在血浆中加入适量的凝血酶血液凝固的时间。正常的凝血时间位于12.0s-18.0s，与正常值差别3秒以上即为异常。凝血酶时间的检验方便易操作，是检查受试者血浆纤维蛋白原转变为纤维蛋白能力的过筛实验，也是临床检测凝血、抗凝及纤维蛋白原溶解系统功能的简便试验。在临床上，TT延长常见于肝素增多或类肝素物质存在，SLE，肝病，肾病，纤维蛋白原降解产物(FDP)增多及DIC、(低)纤维蛋白原血症、异常纤维蛋白原血症，异常球蛋白血症或免疫球蛋白增多等疾病；TT缩短见于血液中有钙离子存在或血液呈酸性等。所以TT的检测对疾病的防治有很重要的意义。TT时间检测测定过程受多种因素的影响，其中检测试剂的质量是关键因素，由于目前国内的凝血试剂普遍存在产品质量不稳定、敏感性差的问题，致使检测结果不稳定，不同的临床检验之间测得的结果难以比较，尽管采用WHO标准参照品，但仍然难以把误差降低到可接受的水平。
技术实现思路
本专利技术为解决现有技术中的技术问题，提供一种准确度高、稳定性能好、使用方便的液体型凝血酶时间检测试剂，应用于抗凝物质存在或者纤维蛋白原溶解系统异常和凝血异常监测治疗，本专利技术的液体型凝血酶时间检测试剂可广泛应用于临床检测，使凝血酶时间检测更加方便、准确、标准化。为了解决上述技术问题，本专利技术的技术方案具体如下：一种液体型凝血酶时间检测试剂，是由牛凝血酶、缓冲液和防腐剂组成；各组分含量如下：牛凝血酶2-4U/mL；缓冲液由下列含量的组分组成：Tris10～66mM；明胶0.1～3％；PEG60000.1～2％；BSA0.1～5％；氯化钠0.1～1.5％；苄脒盐酸盐2mM～12mM；防腐剂：ProClin3000.5～3‰；余量为水。在上述技术方案中，所述液体型凝血酶时间检测试剂各组分含量如下：牛凝血酶3.5U/mL；缓冲液由下列含量的组分组成：Tris33mM；明胶0.8％；PEG60000.5％；BSA0.2％；氯化钠0.1％；苄脒盐酸盐8mM；防腐剂：ProClin3001.5‰；余量为水。在上述技术方案中，所述液体型凝血酶时间检测试剂各组分含量如下：牛凝血酶3.5U/mL；缓冲液由下列含量的组分组成：Tris66mM；明胶2％；PEG60001.5％；BSA1.5％；氯化钠0.8％；苄脒盐酸盐12mM；防腐剂：ProClin3002‰；余量为水。在上述技术方案中，所述液体型凝血酶时间检测试剂各组分含量如下：牛凝血酶3.5U/mL；缓冲液由下列含量的组分组成：Tris50mM；明胶1.2％；PEG60001.0％；BSA0.5％；氯化钠0.4％；苄脒盐酸盐6mM；防腐剂：ProClin3001‰；余量为水。在上述技术方案中，所述液体型凝血酶时间检测试剂冻干后的pH为6.5～8.0。在上述技术方案中，所述液体型凝血酶时间检测试剂的pH为7.35。本专利技术的有益效果是：本专利技术通过研究凝血反应机制，提供了一种液体型凝血酶时间检测试剂，该检测试剂采用独特的缓冲体系(由Tris10～66mM；明胶0.1～3％；PEG60000.1～2％；BSA0.1～5％；氯化钠0.1～1.5％；和苄脒盐酸盐2mM～12mM组成)稳定凝血酶活性，使凝血酶时间检测试剂稳定性和重复性验证准确度更高，方便于临床应用，且降低医疗成本，互利于医疗与病患，避免资源浪费。本专利技术的液体型凝血酶时间检测试剂，应用于抗凝物质存在或者纤维蛋白原溶解系统异常和凝血异常监测治疗，最终将凝血酶液体试剂广泛应用于临床检测，使凝血酶时间检测更加方便、准确、标准化。具体实施方式本专利技术提供一种液体型凝血酶时间检测试剂，是由牛凝血酶、缓冲液和防腐剂组成；各组分含量如下：牛凝血酶2-4U/mL；缓冲液由下列含量的组分组成：Tris10～66mM；明胶0.1～3％；PEG60000.1～2％；BSA0.1～5％；氯化钠0.1～1.5％；苄脒盐酸盐2mM～12mM；防腐剂：ProClin3000.5～3‰；余量为水。所述液体型凝血酶时间检测试剂冻干后的pH为6.5～8.0。优选所述液体型凝血酶时间检测试剂各组分含量如下：牛凝血酶3.5U/mL；缓冲液由下列含量的组分组成：Tris33mM；明胶0.8％；PEG60000.5％；BSA0.2％；氯化钠0.1％；苄脒盐酸盐8mM；防腐剂：ProClin3001.5‰；余量为水。优选所述液体型凝血酶时间检测试剂各组分含量如下：牛凝血酶3.5U/mL；缓冲液由下列含量的组分组成：Tris66mM；明胶2％；PEG60001.5％；BSA1.5％；氯化钠0.8％；苄脒盐酸盐12mM；防腐剂：ProClin3002‰；余量为水。优选所述液体型凝血酶时间检测试剂各组分含量如下：牛凝血酶3.5U/mL；缓冲液由下列含量的组分组成：Tris50mM；明胶1.2％；PEG60001.0％；BSA0.5％；氯化钠0.4％；苄脒盐酸盐6mM；防腐剂：ProClin3001‰；余量为水。优选所述液体型凝血酶时间检测试剂的pH为7.35。实施例11、液体型凝血酶时间检测试剂的原理：待测血浆中加入适量的凝血酶溶液，纤维蛋白原转变为不溶性纤维蛋白，测定凝固所需要的时间，即为凝血酶时间。2、不同配比的液体型凝血酶时间检测试剂的制备按照表1所示的配比配制缓冲液和防腐剂试剂：表1不同配比试剂配制3、液体型凝血酶时间检测试剂的制备：将牛凝血酶冻干粉(1000/mL，1mL/瓶)在室温下复温30min，分别用上述不同配比的试剂按预期稀释比例稀释至使用终浓度为3.5U/mL，4℃保存贮藏备用。实施例2：不同配比的液体型凝血酶时间检测试剂测试流程：测试流程：取待测血浆100μL，37℃预温3min，然后分别加入实施例1制备的不同配比的液体型凝血酶时间检测试剂100μL；测试仪器：SYSMEXCA7000凝血分析仪；测试样本：质控品血浆(靶值：10～16s)；具体比对验证结果详见具体实施例。实施例3：本专利技术的液体型凝血酶时间检测试剂与市售凝血酶时间测定试剂高温稳定性比较将实施例1制备的不同配比的液体型凝血酶时间检测试剂，置于37℃恒温箱中，按照测试流程，在SYSMEXCA7000凝血分析仪进行测试验证试剂高温稳定性，测试样本为质控品血浆(靶值：10～16s)，并选用市售试剂(市售试剂为上海太阳生物技术有限公司TT试剂)进行同步对比测试验证，结果见表2。表2与市售TT试剂高温稳定性测定结果比较注意事项：1.测试样本应无气泡、溶血、黄疸、脂血；使用一次性塑料管或者硅化玻璃容器；2.样本采集应选用枸橼酸钠抗凝剂；3.测定温度在37℃±0.5℃，需验证温度控件的准确稳定；4.确保实验环境清洁，无污染。实施例4：本专利技术的液体型凝血酶时间检测试剂与市售凝血酶时间测定试剂开封稳定性比较将实施例1制备的不同配比的液体型凝血酶时间检测试剂，按照测试流程，在SYSMEXCA7000凝血分析仪进行测试验证，每两天取出测定一次质控品血浆(靶值：10～16s)，连续测本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种液体型凝血酶时间检测试剂，其特征在于，是由牛凝血酶、缓冲液和防腐剂组成；各组分含量如下：牛凝血酶 2‑4U/mL；缓冲液由下列含量的组分组成：Tris 10～66mM；明胶 0.1～3％；PEG 6000 0.1～2％；BSA 0.1～5％；氯化钠 0.1～1.5％；苄脒盐酸盐 2mM～12mM；防腐剂：ProClin300 0.5～3‰；余量为水。

【技术特征摘要】
1.一种液体型凝血酶时间检测试剂，其特征在于，是由牛凝血酶、缓冲液和防腐剂组成；各组分含量如下：牛凝血酶2-4U/mL；缓冲液由下列含量的组分组成：Tris10～66mM；明胶0.1～3％；PEG60000.1～2％；BSA0.1～5％；氯化钠0.1～1.5％；苄脒盐酸盐2mM～12mM；防腐剂：ProClin3000.5～3‰；余量为水。2.根据权利要求1所述的液体型凝血酶时间检测试剂，其特征在于，各组分含量如下：牛凝血酶3.5U/mL；缓冲液由下列含量的组分组成：Tris33mM；明胶0.8％；PEG60000.5％；BSA0.2％；氯化钠0.1％；苄脒盐酸盐8mM；防腐剂：ProClin3001.5‰；余量为水。3.根据权利要求1所述的液体型凝血酶时间检测试剂，其特征在于，各...

【专利技术属性】
技术研发人员：张立媛，姜佳，曲欣楠，高威，孙成艳，何浩会，
申请(专利权)人：迪瑞医疗科技股份有限公司，
类型：发明
国别省市：吉林,22