美洲大蠊断肢再生相关Hedgehog信号通路基因及其dsRNA的应用制造技术

本发明专利技术公开了美洲大蠊断肢再生相关基因及其dsRNA的应用。揭示了Hh基因、Ptc基因、Smo基因或/和Ci基因具有影响美洲大蠊断肢再生的能力。而且，沉默Hh、Ptc、Smo和Ci基因的表达，能抑制美洲大蠊断肢再生的能力，即可以高效除去美洲大蠊害虫，又避免了环境污染，安全可靠。本发明专利技术Hh、Ptc、Smo和Ci基因可以作为美洲大蠊害虫防治的防治靶点。

Hedgehog signaling pathway genes related to limb regeneration in Periplaneta americana and their application in dsRNA

The invention discloses the gene related to limb regeneration of Periplaneta americana and the application of its dsRNA. It was revealed that Hh gene, Ptc gene, Smo gene or/and CI gene have the ability to influence limb regeneration of Periplaneta americana. Moreover, silencing the expression of Hh, Ptc, Smo and CI genes can inhibit the regeneration of the amputated limbs of Periplaneta americana, which can effectively remove the pests of Periplaneta americana, and avoid environmental pollution. It is safe and reliable. The Hh, Ptc, Smo and CI genes of the invention can be used as control targets for the pest control of Periplaneta americana.

【技术实现步骤摘要】
美洲大蠊断肢再生相关Hedgehog信号通路基因及其dsRNA的应用
本专利技术属于基因领域，涉及美洲大蠊断肢再生相关基因及其dsRNA的应用。
技术介绍
蟑螂原产于非洲，好潮湿、温暖、黑暗的环境；喜欢躲藏在隐蔽的缝隙中；活动时间集中在夜晚，是世界性卫生害虫。美洲大蠊是蜚蠊科中体积最大的昆虫，它食性广泛，喜食糖和淀粉，污染食物、传播病菌和寄生虫，是世界性卫生害虫。在南方地区为室内优势品种，主要生存于下水道、暖气沟、厕所、浴室及酿造厂、酱品厂等阴暗潮湿的环境，容易传播疾病。美洲大蠊具有避光性与聚集性，在饲养美洲大蠊时，在饲养缸中放置一些折叠纸板、纸筒以便遮光并供其栖息。美洲大蠊低龄若虫常常群聚在一起，这可能与分泌的信息素有关系，栖息时往往栖息在生活空间的最下层。他们一年中7、8和9月份的食量最大，也是他们繁殖最为旺盛的季节。他们也有一个特别的行为习性，即是互相残杀。即使在食物、饮水供应充足的条件下，仍频有互噬的现象出现，包括食卵、噬皮蜕、噬幼龄若虫和蜕皮若虫等情况。食卵现象比较多见，饲养缸中常见被食卵荚的残余部分，尾部夹持卵荚的雌虫被其他成虫追咬的情形也时有发生。但未发现若虫之间或成虫之间互食现象，所以它们仍能群聚在一起。为了防止美洲大蠊，经常使用的化学农药和有机杀虫剂在害虫防治实践中表现出高效的杀虫效果，为害虫防治带来了革命性改变。但随着其长期大量使用，农药残留、水源和环境污染、生物链中断、生态失衡等一系列负面问题日益凸显。卫生环境的重视及蟑螂抗药性问题的出现，迫使我们要开发一种环境友好、高效、无毒的蟑螂防治方法，其中生物防治技术将为蟑螂防治提供一个新的防治方向。
技术实现思路
本专利技术目的在于提供美洲大蠊断肢再生相关基因及其dsRNA的应用。本专利技术所采取的技术方案是：定量检测Hh、Ptc、Smo或/和CiRNA的试剂在制备促进美洲大蠊断肢再生的试剂中的应用。定量检测Hh、Ptc、Smo或/和CiRNA的试剂在制备防治美洲大蠊的试剂盒中的应用。进一步的，所述定量检测Hh、Ptc、Smo或/和CiRNA的试剂选自定量检测Hh、Ptc、Smo或/和Ci的RNA转录水平的试剂。进一步的，所述定量检测Hh、Ptc、Smo或/和Ci的RNA转录水平的试剂选自定量检测Hh、Ptc、Smo或/和Ci的引物。进一步的，所述定量检测Hh、Ptc、Smo或/和Ci的引物为：Hh：HhqPCRF:5’-GAGTCCAGAGCGCACATCCA-3’(SEQIDNo.21)；HhqPCRR:5’-TCCTCCGAGAAGCAGCCACC-3’(SEQIDNo.22)；Ptc.：PtcqPCRF:5’-ATGCGTTTCTGAGTGCG-3’(SEQIDNo.23)；PtcqPCRR:5’-GTAATTTCTGATTGGTGGG-3’(SEQIDNo.24)；Smo：SmoqPCRF:5’-GTAAGATCCGCAAGGT-3’(SEQIDNo.25)；SmoqPCRR:5’-CGTCTGATGGTGGTAAT-3’(SEQIDNo.26)；Ci.：CiqPCRF:5’-AATGGAGGGCTCGAAGAT-3’(SEQIDNo.27)；CiqPCRR:5’-TACTGTCACGGCGTAGGTT-3’(SEQIDNo.28)。抑制Hh、Ptc、Smo或/和Ci表达的试剂在制备阻断美洲大蠊断肢再生的试剂中的应用。进一步的，所述抑制Hh、Ptc、Smo或/和Ci表达的试剂为抑制Hh、Ptc、Smo或/和CiRNA转录水平的试剂。进一步的，所述抑制Hh、Ptc、Smo或/和CiRNA转录水平的试剂选自沉默Hh、Ptc、Smo或/和Ci表达的siRNA、沉默Hh、Ptc、Smo或/和Ci表达的shRNA和沉默Hh、Ptc、Smo或/和Ci表达的dsRNA的至少一种。进一步的，所述沉默Hh、Ptc、Smo或/和Ci表达的dsRNA选自以下序列：靶向沉默Hh基因的dsRNA序列：AACACCCUUCCAGCAAGCGGUCUCACCGAGGGGCGCGUGACCCGCAAAGACCCUCGCUUCAGGGAUCUGGUGCCCAACUACAACGCAGACAUCGUGUUCAAGGACGAGGAAGGCACGGGCGCCGACCGCCUCAUGACGCAGAGGUGCAAGGAGAAGCUGAACACGCUGGCCAUCUCGGUGAUGAACCAGUGGCCCGGCGUGAAGCUGCGGGUGACGGAGGGCUGGGACGAGGAGGGGCACCACGCCGUGGACUCGCUGCACUACGAGGGCCGAGCCGUCGACGUCACCACCUCCGACAGGGAUCGAGCCAAGUACGGCAUGCUGGCGCGCCUCGCCGUGGAGGCGGGCUUCGACUGGG(SEQIDNO.17)；靶向沉默Ptc基因的dsRNA序列：UUCGACGAGCACUAUAUAGACCAAAUAUUCCUAAACAUUAUCCCUUGUGCCAUCAUUACUCCAUUAGACUGUUUUUGGGAAGCUUCGAAGCUUCUGGGACCAGAUUAUCCUGUUCAAAUACCAGGCGUGGGCUCCAAGGUGCGCUGGACGAACCUUAACCCACAACAACUAAUCCAACAAAUGAAGACUGUCGAAUUGGUAUUCCCUUUCGAGACUCUCGAAGACUACAUGAAAAGGGCGGGGAUAAGCACGGGCUACCAAGAGAAGCCGUGUCUCGACCCCUCCGACCCCGAAUGCCCGACCACCGCCCCCAACAAGUUAUCCGGACAGAUACCUGACAUCGGGGCAGAGCUGACAGGAGGCUGCUACGGAUAUGCAGCCAAAUAUAUGCACUGGCCUGAGGACCUGGUGGUGGGCGGAGCCACACGAAAUAAGACUGGACACAUACAAAGGGCGCGUGCAUUGCAGACUGUGGUGCAACUAAUGGGAGAGAGAGAGAUGUAUGAAUUCUGGUCUAAAACGUACAAAGUCCAUCACUUGGAUUGGACACAAGAAAAAGCUGCUUUAAUUCUCGAGACAUGGCAGAGGC(SEQIDNO.18)；靶向沉默Smo基因的dsRNA序列：ACUUGUAAUUUUCUAUAUCAAUUGCUGUUUUUUGGUGUCAUGUAUUGGAUGGUUGGCACAGUUUAUUCCUGGUGCACGUGAAGGCAUUAUAUGCCGGAAAGAUGGUACUUUAAGGAUGUCAGAACCUAAUACUGGAGAGAAUUUGUCAUGUGUGAUAAUAUUUGUAUUGGUGUAUUACUUCAUCAUGGCUGCCUUUGUGUGGUUUGUAAUUCUCACGUACACAUGGCACAUCAGUUUUCAAGCUCUAGGUAAAAUUCAAGAGCGAAUUGAUAAGAAAAGUGCUUAUUUUCACAUGGUGGCUUGGUCAUUGCCUCUAGUUCUUACUAUUACAACUAUGGCACUAG本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.定量检测Hh、Ptc、Smo或/和Ci RNA的试剂在制备促进美洲大蠊断肢再生的试剂中的应用。

【技术特征摘要】
1.定量检测Hh、Ptc、Smo或/和CiRNA的试剂在制备促进美洲大蠊断肢再生的试剂中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述定量检测Hh、Ptc、Smo或/和CiRNA的试剂选自定量检测Hh、Ptc、Smo或/和Ci的RNA转录水平的试剂。3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述定量检测Hh、Ptc、Smo或/和Ci的RNA转录水平的试剂选自定量检测Hh、Ptc、Smo或/和Ci的引物。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述定量检测Hh、Ptc、Smo或/和Ci的引物为：Hh：HhqPCRF:5’-GAGTCCAGAGCGCACATCCA-3’(SEQIDNo.21)；HhqPCRR:5’-TCCTCCGAGAAGCAGCCACC-3’(SEQIDNo.22)；Ptc.：PtcqPCRF:5’-ATGCGTTTCTGAGTGCG-3’(SEQIDNo.23)；PtcqPCRR:5’-GTAATTTCTGATTGGTGGG-3’(SEQIDNo.24)；Smo：SmoqPCRF:5’-GTAAGATCCGCAAGGT-3’(SEQIDNo.25)；SmoqPCRR:5’-CGTCTGATGGTGGTAAT-3’(SEQIDNo.26)；Ci.：CiqPCRF:5’-AATGGAGGGCTCGAAGAT-3’(SEQIDNo.27)；CiqPCRR:5’-TACTGTCACGGCGTAGGTT-3’(SEQIDNo.28)。5.抑制Hh、Ptc、Smo或/和Ci表达的试剂在制备阻断美洲大蠊断肢再生的试剂中的应用。6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述抑制Hh、Ptc、Smo或/和Ci表达的试剂为抑制Hh、Ptc、Smo或/和CiRNA转录水平的试剂。7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述抑制Hh、Ptc、Smo或/和CiRNA转录水平的试剂选自沉默Hh、Ptc、Smo或/和Ci表达的siRNA、沉默Hh、Ptc、Smo或/和Ci表达的shRNA和沉默Hh、Ptc、Smo或/和Ci表达的dsRNA的至少一种。8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述沉默Hh、Ptc、Smo或/和Ci表达的dsRNA选自以下序列：靶向沉默Hh基因的dsRNA序列：AACACCCUUCCAGCAAGCGGUCUCACCGAGGGGCGCGUGACCCGCAAAGACCCUCGCUUCAGGGAUCUGGUGCCCAACUACAACGCAGACAUCGUGUUCAAGGACGAGGAAGGCACGGGCGCCGACCGCCUCAUGACGCAGAGGUGCAAGGAGAAGCUGAACACGCUGGCCAUCUCGGUGAUGAACCAGUGGCCCGGCGUGAAGCUGCGGGUGACGGAGGGCUGGGACGAGGAGGGGCACCACGCCGUGGACUCGCUGCACUACGAGGGCCGAGCCGUCGACGUCACCACCUCCGACAGGGAUCGAGCCAAGUACGGCAUGCUGGCGCGCCUCGCCGUGGAGGCGGGCUUCGACUGGG(SEQIDNO.17)；靶向沉默Ptc基因的dsRNA序列：UUCGACGAGCACUAUAUAGACCAAAUAUUCCUAAACAUUAUCCCUUGUGCCAUCAUUACUCCAUUAGACUGUUUUUGGGAAGCUUCGAAGCUUCUGGGACCAGAUUAUCCUGUUCAAAUACCAGGCGUGGGCUCCAAGGUGCGCUGGACGAACCUUAACCCACAACAACUAAUCCAACAAAUGAAGACUGUCGAAUUGGUAUUCCCUUUCGAGACUCUCGAAGACUACAUGAAAAGGGCGGGGAUAAGCACGGGCUACCAAGAGAAGCCGUGUCUCGACCCCUCCGACCCCGAAUGCCCGACCACCGCCCCCA...

【专利技术属性】
技术研发人员：李胜，任充华，
申请(专利权)人：华南师范大学，
类型：发明
国别省市：广东,44