一种L-天冬氨酸酶基因工程菌发酵培养基及发酵培养L-天冬氨酸酶基因工程菌方法技术

本发明专利技术公开了一种L‑天冬氨酸酶基因工程菌发酵培养基及发酵培养L‑天冬氨酸酶基因工程菌方法，其中，培养基包括以下质量浓度的组分：酵母粉2‑10g/L、蛋白胨5‑20g/L、乳糖1‑10g/L、氯化钠1‑10g/L、黄豆饼粉1‑15g/L、玉米浆1‑5g/L、籼米粉0.5‑5g/L、钼酸铵0.5‑2g/L、钴盐0.5‑10mg/L、通过本发明专利技术公开的技术方案培养L‑天冬氨酸酶基因工程菌，不仅菌细胞密度大，且L‑天冬氨酸酶基因工程菌增殖快速，细胞浓度较高。

A Fermentation Medium for L-aspartase Genetically Engineered Bacteria and a Fermentation Method for L-aspartase Genetically Engineered Bacteria

The invention discloses a fermentation medium for L L aspartalase gene engineering bacteria and a method for fermentation culture L L aspartalase gene engineering bacteria fermentation medium and a method for fermentation culture L L aspartalase gene engineering bacteria, wherein the culture medium comprises components with the following mass concentration: yeast powder 2 10g/L, protein 5 5 20g/L, 20 g/L, lactose 1 82099999999999999999999g/L, lactose 1 10 g/L, sodium chlorinate 1 sodium chloride 1 1099999The results of this study are as follows:1. The L-aspartase gene engineering bacteria cultured by the technical scheme disclosed in the present invention have not only high cell density, but also fast proliferation and high cell concentration of L-aspartase gene engineering bacteria.

【技术实现步骤摘要】
一种L-天冬氨酸酶基因工程菌发酵培养基及发酵培养L-天冬氨酸酶基因工程菌方法
本专利技术涉及微生物发酵领域，具体涉及的是一种L-天冬氨酸酶基因工程菌发酵培养基及发酵培养L-天冬氨酸酶基因工程菌方法。
技术介绍
发酵工程是指采用工程技术手段，利用生物(主要是微生物)和有活性的离体酶的某些功能，为人类生产有用的生物产品，或直接用微生物参与控制某些工业生产过程的一种技术。人们熟知的利用酵母菌发酵制造啤酒、果酒、工业酒精，乳酸菌发酵制造奶酪和酸牛奶，利用真菌大规模生产青霉素等都是这方面的例子。随着科学技术的进步，发酵技术也有了很大的发展，并且已经进入能够人为控制和改造微生物，使这些微生物为人类生产产品的现代发酵工程阶段。现代发酵工程作为现代生物技术的一个重要组成部分，具有广阔的应用前景。例如，用基因工程的方法有目的地改造原有的菌种并且提高其产量；利用微生物发酵生产药品，如人的胰岛素、干扰素和生长激素等。基于发酵工程的显著工业化生产优势，一系列通过发酵工程技术，发酵生产特定的有益菌、药物、细菌代谢物，得到广泛应用，如L-天冬氨酸基因工程菌的培养。L-天冬氨酸酶基因工程菌的菌体内含有大量的L-天冬氨酸酶(EC4.3.1.1)，而L-天冬氨酸酶是一种重要的工业用酶，该酶广泛存在于细菌、酵母和植物体中，该酶由4个相同亚基组成，催化氨和富马酸发生加成反应得到天冬氨酸。因此，改进L-天冬氨酸酶基因工程菌的发酵培养技术，对于提高生产L-天冬氨酸酶活性，提高L-天冬氨酸工业化生产意义重大。然而，目前L-天冬氨酸酶基因工程菌规模化培养存在的主要问题是生长较为缓慢，酶的活性不高，而合适的培养基能极大地促进L-天冬氨酸酶基因工程菌的生长，增加细胞密度，同时提高酶的活性。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题在于如何解决目前L-天冬氨酸酶基因工程菌规模化培养生长较为缓慢，酶的活性不高的问题。本专利技术是通过以下技术方案解决上述技术问题的：一种L-天冬氨酸酶基因工程菌发酵培养基，所述L-天冬氨酸酶基因工程菌培养基包括以下质量浓度的组分：酵母粉2-10g/L、蛋白胨5-20g/L、乳糖1-10g/L、氯化钠1-10g/L、黄豆饼粉1-15g/L、玉米浆1-5g/L、籼米粉0.5-5g/L、钼酸铵0.5-2g/L、钴盐0.5-10mg/L。优选地，所述L-天冬氨酸酶基因工程菌发酵培养基，所述钴盐为硝酸钴。优选地，所述L-天冬氨酸酶基因工程菌培养基包括以下质量浓度的组分：酵母粉2-5g/L、蛋白胨5-10g/L、乳糖1-5g/L、氯化钠1-5g/L、黄豆饼粉1-10g/L、玉米浆1-5g/L、籼米粉1-5g/L、钼酸铵0.5-1g/L、硝酸钴0.5-5mg/L。优选地，所述L-天冬氨酸酶基因工程菌培养基包括以下质量浓度的组分：酵母粉4g/L、蛋白胨7g/L、乳糖3g/L、氯化钠4g/L、黄豆饼粉5g/L、玉米浆4g/L、籼米粉2g/L、钼酸铵0.7g/L、硝酸钴1.5mg/L。优选地，所述L-天冬氨酸酶基因工程菌培养基包括以下质量浓度的组分：酵母粉2.5g/L、蛋白胨6.5g/L、乳糖3.5g/L、氯化钠2.5g/L、黄豆饼粉7.5g/L、玉米浆2.5g/L、籼米粉3.5g/L、钼酸铵0.8g/L、硝酸钴1.5mg/L。上述L-天冬氨酸酶基因工程菌发酵培养基的制备方法如下：按照重量组份配比，将酵母粉、蛋白胨、黄豆饼粉和籼米粉混匀后，加入乳糖、氯化钠、钼酸铵和硝酸钴，加水搅拌均匀，灭菌后，即得。同时，本专利技术公开一种以上述L-天冬氨酸酶基因工程菌培养基为培养基，发酵培养L-天冬氨酸酶基因工程菌的方法，具体包括以下步骤：S1、按照L-天冬氨酸酶基因工程菌的常规培养方法将L-天冬氨酸酶基因工程菌培养至对数期；S2、将对数期的L-天冬氨酸酶基因工程菌接种到L-天冬氨酸酶基因工程菌发酵培养基中，控制发酵温度为25-37℃，调节培养基内培养液的pH为7.2-7.6，发酵培养8-14h后，即得。优选地，所述步骤S2中控制发酵温度为30℃，调节培养基内培养液的pH为7.5，发酵培养10h后，即得。优选地，所述步骤S2中控制发酵温度为32℃，调节培养基内培养液的pH为7.5，发酵培养8h后，即得。优选地，所述步骤S2中控制发酵温度为35℃，调节培养基内培养液的pH为7.3，发酵培养12h后，即得。本专利技术相比现有技术具有以下优点：1、培养基组分配方配伍合理，采用上述培养基培养L-天冬氨酸酶基因工程菌，不仅菌细胞密度大，且L-天冬氨酸酶基因工程菌增殖快速，细胞浓度较高。2、培养基组分中的硝酸钴能够明显促进L-天冬氨酸酶基因工程菌的增殖，能够促进L-天冬氨酸酶基因工程菌催化合成L-天冬氨酸，相对于现有技术公开的其他盐如镁盐、钙盐，硝酸钴对L-天冬氨酸酶基因工程菌的代谢影响更加显著。具体实施方式下面对本专利技术的实施例作详细说明，本实施例在以本专利技术技术方案为前提下进行实施，给出了详细的实施方式和具体的操作过程，但本专利技术的保护范围不限于下述的实施例。实施例1一种L-天冬氨酸酶基因工程菌发酵培养基，所述L-天冬氨酸酶基因工程菌培养基包括以下质量浓度的组分：酵母粉2g/L、蛋白胨5g/L、乳糖1g/L、氯化钠1g/L、黄豆饼粉1g/L、玉米浆5g/L、籼米粉0.5g/L、钼酸铵0.5g/L、硝酸钴0.5mg/L。上述L-天冬氨酸酶基因工程菌发酵培养基的制备方法如下：按照重量组份配比，将酵母粉、蛋白胨、黄豆饼粉和籼米粉混匀后，加入乳糖、氯化钠、钼酸铵和硝酸钴，加水搅拌均匀，灭菌后，即得。采用上述L-天冬氨酸酶基因工程菌发酵培养基，发酵培养L-天冬氨酸酶基因工程菌的方法包括以下步骤：S1、按照L-天冬氨酸酶基因工程菌的常规培养方法将L-天冬氨酸酶基因工程菌培养至对数期；S2、将对数期的L-天冬氨酸酶基因工程菌接种到L-天冬氨酸酶基因工程菌发酵培养基中，控制发酵温度为30℃，调节培养基内培养液的pH为7.5，发酵培养10h后，即得。实施例2一种L-天冬氨酸酶基因工程菌发酵培养基，所述L-天冬氨酸酶基因工程菌培养基包括以下质量浓度的组分：酵母粉10g/L、蛋白胨20g/L、乳糖10g/L、氯化钠10g/L、黄豆饼粉15g/L、玉米浆5g/L、籼米粉5g/L、钼酸铵2g/L、硝酸钴10mg/L。上述L-天冬氨酸酶基因工程菌发酵培养基的制备方法如下：按照重量组份配比，将酵母粉、蛋白胨、黄豆饼粉和籼米粉混匀后，加入乳糖、氯化钠、钼酸铵和硝酸钴，加水搅拌均匀，灭菌后，即得。采用上述L-天冬氨酸酶基因工程菌发酵培养基，发酵培养L-天冬氨酸酶基因工程菌的方法包括以下步骤：S1、按照L-天冬氨酸酶基因工程菌的常规培养方法将L-天冬氨酸酶基因工程菌培养至对数期；S2、将对数期的L-天冬氨酸酶基因工程菌接种到L-天冬氨酸酶基因工程菌发酵培养基中，控制发酵温度为30℃，调节培养基内培养液的pH为7.5，发酵培养12h后，即得。实施例3一种L-天冬氨酸酶基因工程菌发酵培养基，所述L-天冬氨酸酶基因工程菌培养基包括以下质量浓度的组分：酵母粉5g/L、蛋白胨10g/L、乳糖5g/L、氯化钠5g/L、黄豆饼粉10g/L、玉米浆5g/L、籼米粉5g/L、钼酸铵1g/L、硝酸钴5mg/L。上述L-天冬氨酸酶基因工本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种L‑天冬氨酸酶基因工程菌发酵培养基，其特征在于，所述L‑天冬氨酸酶基因工程菌培养基包括以下质量浓度的组分：酵母粉2‑10g/L、蛋白胨5‑20g/L、乳糖1‑10g/L、氯化钠1‑10g/L、黄豆饼粉1‑15g/L、玉米浆1‑5g/L、籼米粉0.5‑5g/L、钼酸铵0.5‑2g/L、钴盐0.5‑10mg/L。

【技术特征摘要】
1.一种L-天冬氨酸酶基因工程菌发酵培养基，其特征在于，所述L-天冬氨酸酶基因工程菌培养基包括以下质量浓度的组分：酵母粉2-10g/L、蛋白胨5-20g/L、乳糖1-10g/L、氯化钠1-10g/L、黄豆饼粉1-15g/L、玉米浆1-5g/L、籼米粉0.5-5g/L、钼酸铵0.5-2g/L、钴盐0.5-10mg/L。2.根据权利要求1所述的L-天冬氨酸酶基因工程菌发酵培养基，其特征在于，所述钴盐为硝酸钴。3.根据权利要求2所述的L-天冬氨酸酶基因工程菌发酵培养基，其特征在于，所述L-天冬氨酸酶基因工程菌培养基包括以下质量浓度的组分：酵母粉2-5g/L、蛋白胨5-10g/L、乳糖1-5g/L、氯化钠1-5g/L、黄豆饼粉1-10g/L、玉米浆1-5g/L、籼米粉1-5g/L、钼酸铵0.5-1g/L、硝酸钴0.5-5mg/L。4.根据权利要求3所述的L-天冬氨酸酶基因工程菌发酵培养基，其特征在于，所述L-天冬氨酸酶基因工程菌培养基包括以下质量浓度的组分：酵母粉4g/L、蛋白胨7g/L、乳糖3g/L、氯化钠4g/L、黄豆饼粉5g/L、玉米浆4g/L、籼米粉2g/L、钼酸铵0.7g/L、硝酸钴1.5mg/L。5.根据权利要求3所述的L-天冬氨酸酶基因工程菌发酵培养基，其特征在于，所述L-天冬氨酸酶基因工程菌培养基包括以下质量浓度的组分：酵母粉2.5g/L、蛋白胨6.5g/L、乳糖3.5g/L、氯化钠2.5g/L、黄豆饼粉7.5g/L、玉米...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐礼生，张兴桃，陈红玲，高贵珍，赵亮，曹稳根，苏博，
申请(专利权)人：宿州学院，
类型：发明
国别省市：安徽,34