The invention relates to the field of biotechnology, in particular to an apolipoprotein C_II concentration kit and a preparation method. The technical scheme of the invention is: a kit for determining apolipoprotein C_II concentration is characterized by: reagent R1 and reagent R2, in which biotin and streptavidin are added to reagent R2, and the ratio of biotin-bound apolipoprotein C_II antibody is 2:1, and the ratio of streptavidin-bound biotin and apolipoprotein C_II antibody is 1:1. The advantages of the present invention are as follows: the kit for the determination of apolipoprotein C_II concentration can obviously improve repeatability and sensitivity by cascade amplification reaction, i.e., the apolipoprotein C_II antibody is linked to biotin 1:2, and then mixed with streptavidin 1:1. The linear range can reach 2_100 mg/L.
【技术实现步骤摘要】
一种测定载脂蛋白C-Ⅱ浓度的试剂盒及制备方法
本专利技术涉及生物
,尤其涉及一种测定载脂蛋白C-Ⅱ浓度的试剂盒及制备方法。
技术介绍
载脂蛋白一般分为载脂蛋白A、载脂蛋白B、载脂蛋白C、载脂蛋白D、载脂蛋白E和载脂蛋白(a),每种又分为若干亚型。载脂蛋白的主要功能有:①维持脂蛋白的结构与脂类运输;②调控脂代谢有关酶的活性;③作为细胞表面脂蛋白受体的配体而参与脂蛋白的代谢。载脂蛋白C(apoC)是血浆中一组水溶性的低分子量蛋白质,包括四个亚类:载脂蛋白CⅠ、CⅡ、CⅢ和CⅣ,它们主要分布在极低密度脂蛋白(VLDL)、乳糜微粒(CM)和高密度脂蛋白(HDL)。载脂蛋白C-Ⅱ(apoCⅡ)可促进LPL催化乳糜微粒(CM)及极低密度脂蛋白(VLDL)中的甘油三酯(TG)水解为甘油和脂肪酸。它是冠心病的保护因子。载脂蛋白C-Ⅱ参与脂蛋白代谢的调节,尤其在调节血浆富含TG脂蛋白的分解代谢中起重要作用。高浓度的载脂蛋白C-Ⅱ将抑制富含TG脂蛋白的水解,或影响肝脏受体对富含TG脂蛋白的摄取,引起血浆TG水平升高,导致高TG血症的形成。载脂蛋白C-Ⅱ还可抑制卵磷脂胆固醇酰基转移酶的活性。目前采用的免疫透射比浊法测定载脂蛋白C-Ⅱ浓度的试剂盒存在大量的非特异反应,且试剂应用的灵敏度和重复性差,已越来越不能满足使用要求。因此,应该提供一种新的技术方案解决上述问题。
技术实现思路
本专利技术的目的是:提供一种灵敏度高,重复性好的一种测定载脂蛋白C-Ⅱ浓度的试剂盒及制备方法。为实现上述目的,本专利技术采用的技术方案是:一种测定载脂蛋白C-Ⅱ浓度的试剂盒,包括试剂R1和试剂R2,所 ...
【技术保护点】
1.一种测定载脂蛋白C‑Ⅱ浓度的试剂盒,其特征在于:包括试剂R1和试剂R2,所述试剂R1的各组分及浓度包括:
【技术特征摘要】
1.一种测定载脂蛋白C-Ⅱ浓度的试剂盒,其特征在于:包括试剂R1和试剂R2,所述试剂R1的各组分及浓度包括:所述试剂R2的各组分及浓度包括:2.根据权利要求1所述的一种测定载脂蛋白C-Ⅱ浓度的试剂盒,其特征在于:所述试剂R1和R2中的第一缓冲液A、第一缓冲液B、第二缓冲液A以及第二缓冲液B均为PBS缓冲液、HEPES缓冲液、MES缓冲液、Tris缓冲液、甘氨酸缓液中的一种或几种的组合。3.根据权利要求1所述的一种测定载脂蛋白C-Ⅱ浓度的试剂盒,其特征在于:所述试剂R1中的防腐剂为叠氮钠、Proclin-950、Proclin-300、硫柳汞中的一种或几种的组合。4.根据权利要求2所述的一种测定载脂蛋白C-Ⅱ浓度的试剂盒,其特征在于:所述第一缓冲液A和第二缓冲液A为二水合磷酸二氢钠,第一缓冲液B和第二缓冲液B为十二水合磷酸氢二钠。5.根据权利要求1所述的一种测定载脂蛋白C-Ⅱ浓度的试剂盒,其特征在于:所述试剂R2中稳定剂为牛血清白蛋白、酪蛋白、明胶、甘露醇中的一种或几种的组合。6.根据权利要求1所述的一种测定载脂蛋白C-Ⅱ浓度的试剂盒,其特征在于:所述试剂R2中的助悬剂为葡萄糖、D-海藻糖、甘露醇、蔗糖、麦芽糖、乳糖、丙三醇中的一种或几种的组合。7.根据权利要求1所述的一种测定载脂蛋白C-Ⅱ浓度的试剂盒,其特征在于:所述试剂R2中的防腐剂为叠氮钠、Proclin-950、Proclin-300、硫柳汞等中的一种。8.根据权利要求1所述的一种测定载脂蛋白C-Ⅱ浓度的试剂盒,其特征在于:所述R1试剂pH在6.00-8.50之间,所述R2试剂pH在6.00-8.50之间。9.根据权利要求1所述的一种测定载脂蛋白C-Ⅱ浓度的试剂盒,其特征在于:所述生物素结合载脂蛋白C-Ⅱ抗体比例为1:1-4:1之间,链霉亲和素结合生物素-载脂蛋白C-Ⅱ抗体比例为0.5:1-4:1之间。10.如权利要求1-9任一测定载脂蛋白C-Ⅱ浓度的试剂盒的制备方法,其特征在于:包括如下步骤,A)、试剂R1制备;在配液罐中先加入适量纯化水于磁力搅拌器上,调节搅拌子至中档转速...
【专利技术属性】
技术研发人员:袁嘉扬,吴朝晖,杜微微,李磊,
申请(专利权)人:苏州普瑞斯生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:江苏,32
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