The invention discloses a semi-quantitative test paper for acetylated PINK1 protein in vascular endothelial cells, which mainly consists of five parts: sample pad, binding pad, water absorbent pad, bottom plate and nitric acid fiber membrane. Two parallel antibody capture lines are drawn on the nitric acid fiber membrane, and one near the binding pad contains acetylated PINK1 protein in the first anti-vascular endothelial cells at a determined concentration. I monoclonal antibody, as a detection line, and the other one containing sheep anti-rabbit IgG antibody at a determined concentration, as a standard concentration color contrast line, the two lines are 4-7 mm apart; the two substances of acetylated PINK1 protein I monoclonal antibody and gold-labeled rabbit IgG in the second anti-vascular endothelial cell coated with colloidal gold or color latex are described.
【技术实现步骤摘要】
一种检测血管内皮细胞中乙酰化PINK1的方法
本专利技术涉及一种检测血管内皮细胞中乙酰化PINK1的方法,具体涉及一种快速便捷的荧光免疫层析快速检测方法及乙酰化PINKI蛋白半定量检测试纸。
技术介绍
我国今年来代谢性疾病发病率快速上升,该疾病往往是造成血管病变的主要元凶,如高脂血症、糖尿病及高尿酸血症等。研究表明2型糖尿病(T2DM)患者心血管疾病的风险,比非糖尿病患者要高2-4倍,而中年糖尿病人群中心血管疾病的发生率可高达44%,且糖尿病人群心血管疾病的死亡率达到了2.7%。脂肪组织作为一个新的内分泌器官已被重新认识,肥胖,尤其是中心性肥胖,堆积的内脏脂肪会分泌多种生物活性物质;另外,高胆固醇血症时,氧自由基过多形成氧化低密度脂蛋白(ox-LDL),这些有害物质对血管内皮细胞都具有毒性作用,是导致血管内皮功能障碍的重要因素。血管内皮损伤既是众多慢性疾病的结果,又是其它疾病的起始。糖尿病的一些慢性并发症均与内皮血管损伤有关,如糖尿病视网膜病变,神经病变,糖尿病肾病,糖尿病足等。已有研究表明血管内皮细胞受损并内皮功能障碍是动脉粥样硬化的始动因子,即动脉粥样硬化是动脉壁对内皮细胞损伤的一种慢性炎症反应,反映血管内皮功能的相关因子,同样也能预测动脉粥样硬化的严重程度。血管内皮的修复也已成为治疗动脉粥样硬化的新靶点。然而,目前还没有有效的方法早期检测血管内皮损伤。临床上目前用来检测血管内皮损伤的方法主要是颈动脉多普勒彩色超声波检查,此法虽能检测动脉内膜增厚及斑块形成,但此时内皮细胞的损伤已经是不可逆了。之前有以循环内皮细胞(CEC)数量来衡量血管内皮的损伤程度, ...
【技术保护点】
1.一种血管内皮细胞中乙酰化PINK1蛋白半定量检测试纸,主要由样品垫,结合垫,吸水垫,底板,硝酸纤维膜五部分组成,其特征在于:所述硝酸纤维膜上分别划有两条平行的抗体捕获线,靠近结合垫的一条含有经过确定了浓度的第一抗血管内皮细胞中乙酰化PINK1蛋白I单克隆抗体,作为检测线,另一条含有经确定了浓度的羊抗兔IgG抗体,作为标准浓度显色对照线,两条线相距4~7mm;所述结合垫喷有胶体金或彩色乳胶标记的第二抗血管内皮细胞中乙酰化PINK1蛋白I单克隆抗体和金标兔IgG两种物质。
【技术特征摘要】
1.一种血管内皮细胞中乙酰化PINK1蛋白半定量检测试纸,主要由样品垫,结合垫,吸水垫,底板,硝酸纤维膜五部分组成,其特征在于:所述硝酸纤维膜上分别划有两条平行的抗体捕获线,靠近结合垫的一条含有经过确定了浓度的第一抗血管内皮细胞中乙酰化PINK1蛋白I单克隆抗体,作为检测线,另一条含有经确定了浓度的羊抗兔IgG抗体,作为标准浓度显色对照线,两条线相距4~7mm;所述结合垫喷有胶体金或彩色乳胶标记的第二抗血管内皮细胞中乙酰化PINK1蛋白I单克隆抗体和金标兔IgG两种物质。2.如权利要求1所述的血管内皮细胞中乙酰化PINK1蛋白半定量检测试纸,其特征在于,所述硝酸纤维膜与上部的吸水垫,硝酸纤维膜与下端的结合垫,结合垫与下部的样品垫之间分别部分重叠交接。3.如权利要求1或2所述的血管内皮细胞中乙酰化PINK1蛋白半定量检测试纸,其特征在于,所用的胶体金或彩色乳胶标记的第二抗血管内皮细胞中乙酰化PINK1蛋白I单克隆抗体的金颗粒或乳胶大小在20nm~120nm间。4.使用如权利要求1至3任一项所述的血管内皮细胞中乙酰化PINK1蛋白半定量检测试纸的制备方法,其特征在于包括以下步骤:选择两株抗血管内皮细胞中乙酰化PINK1蛋白I鼠源性特异单克隆抗体,即抗血管内皮细胞中乙酰化PINK1蛋白I单抗1和抗血管内皮细胞...
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。