一种中心切割二维色谱质谱联用分析烟草中农残的方法技术

本发明专利技术提供一种中心切割二维色谱质谱联用分析烟草中农残的方法，对烟草进行样品前处理，采用中心切割二维色谱质谱联用系统对前处理所得待测样品进行定性定量分析，所述中心切割二维色谱质谱联用系统包括沿样品进样方向依次连接的第一维色谱、分流器、定量环、第二维色谱、质谱。本发明专利技术还提供了一种中心切割二维色谱质谱联用系统及其使用方法。本发明专利技术提供的一种中心切割二维色谱质谱联用分析烟草中农残的方法，能够有效净化去除大分子干扰物质，保持大批量样品农残特别是大样本量农残测试的重复性、稳定性和准确性，可用于烟草农残长时间、大样品量、多组分分析检测。

A Central Cutting Two-Dimensional Chromatography-Mass Spectrometry Method for the Analysis of Pesticide Residues in Tobacco

The invention provides a method for analyzing agricultural residues in tobacco by central cutting two-dimensional chromatography-mass spectrometry. The sample is pretreated by central cutting two-dimensional chromatography-mass spectrometry system. The qualitative and quantitative analysis of the sample is carried out by the central cutting two-dimensional chromatography-mass spectrometry system. The central cutting two-dimensional chromatography-mass spectrometry system includes the first-dimensional chromatography, splitter, and the first-dimensional chromatography connected sequentially along the direction of sample injection. Quantitative ring, second-dimensional chromatography and mass spectrometry. The invention also provides a two-dimensional chromatographic mass spectrometry system with central cutting and a method for its use. The invention provides a central cutting two-dimensional chromatography-mass spectrometry method for the analysis of agricultural residues in tobacco, which can effectively purify and remove macromolecule interfering substances, maintain the repeatability, stability and accuracy of large-scale samples of agricultural residues, especially large-scale samples of agricultural residues, and can be used for the analysis and detection of long-term, large-scale samples and multi-component of tobacco agricultural residues.

【技术实现步骤摘要】
一种中心切割二维色谱质谱联用分析烟草中农残的方法
本专利技术属于烟草中农药残留量分析的
，涉及一种中心切割二维色谱质谱联用分析烟草中农残的方法，具体涉及一种运用中心切割第一维体积排阻液相色谱与第二维反相液相色谱的多维色谱/串联质谱联用分析烟草中多种农药残留量的方法。
技术介绍
烟草作为世界上种植最广泛的非粮食作物，在全世界129个国家和地区种植。因此，农药残留作为烟草质量安全问题的一个重要组成部分，农药残留的测定一直是研究热点。烟草农残常用的方法主要有GC-MS/MS和LC-MS/MS方法。而基质的干扰一直是农药残留量准确测定的重要难题，现有技术有运用液液萃取、固相萃取柱(SPE)等技术净化样品，运用GC分离后进入质谱测定，从而达到减少基质效应的效果。还有采用低温和分散微萃取技术净化样品，后并进行LC-MS/MS测定。但是烟草农残检测过程中存在一些大分子的蛋白及一些非极性物质子基质难以去除，基质抑制效应较为明显的问题，影响分析的准确性和重复性。
技术实现思路
鉴于以上所述现有技术的缺点，本专利技术的目的在于提供一种中心切割二维色谱质谱联用分析烟草中农残的方法，用于同时测定烟草中多种农药残留且减少烟草农残检测中的基质效应问题。为实现上述目的及其他相关目的，本专利技术第一方面提供一种中心切割二维色谱质谱联用分析烟草中农残的方法，对烟草进行样品前处理，采用中心切割二维色谱质谱联用系统对前处理所得待测样品进行定性定量分析，所述中心切割二维色谱质谱联用系统包括沿样品进样方向依次连接的第一维色谱、分流器、定量环、第二维色谱、质谱。较佳地，所述烟草中农残选自啶虫脒、马拉硫磷、阿拉酸式苯-S-甲基、灭蚜磷、涕灭威砜、甲霜灵、嘧菌酯、甲硫威、苯霜灵、灭虫威砜、双苯三唑醇、灭虫威亚砜、除草定、速灭磷、仲丁灵、久效磷、甲萘威、腈菌唑、多菌灵、敌草胺、壳百威、氧乐果、氯虫苯甲酰胺、噁霜灵、毒虫畏、克草敌、毒死蜱、戊菌唑、甲基内吸磷、二甲戊灵、二嗪磷、磷胺、乙霉威、抗蚜威、甲氟磷、丙溴磷、乐果、霜霉威、烯酰吗啉、残杀威、双苯酰草胺、吡蚜酮、乙拌磷亚砜、吡菌磷、乙硫磷、喹硫磷、灭线磷、精喹禾灵、咪唑菌酮、特丁硫磷、苯线磷、特丁硫磷砜、苯线磷砜、特丁硫磷亚砜、苯线磷亚砜、杀虫畏、丰索磷、噻虫嗪、倍硫磷亚砜、硫双威、氟吗啉、甲基硫菌灵、庚烯磷、三唑酮、吡虫啉、三唑醇、茚虫威、三唑磷、异稻瘟净、杀铃脲、氯唑磷、烯效唑、稻瘟灵、蚜灭磷中的任意一种或多种组合。所述烟草中农残共74种。较佳地，所述样品前处理包括以下步骤：1)将烟草加水振荡浸润后静置，再加入内标溶液进行第一次涡旋振荡；2)再加入试剂盒粉包进行第二次涡旋振荡后第一次离心，取第一上清液；3)将第一上清液放入试剂盒含吸附剂小管中，进行第三次涡旋振荡后第二次离心，取第二上清液过滤后，即得待测样品。优选地，步骤1)中，所述烟草为烟草粉末。优选地，步骤1)中，所述水为纯水。优选地，步骤1)中，所述烟草加入的质量g与水加入的体积mL之比为2:5-15。更优选地，所述烟草加入的质量g与水加入的体积mL之比为2:10。优选地，步骤1)中，所述静置时间为8-12min。更优选地，所述静置时间为10min。优选地，步骤1)中，所述烟草加入的质量g与内标溶液加入的体积mL之比为2:5-15。更优选地，所述烟草加入的质量g与内标溶液加入的体积mL之比为2:10。优选地，步骤1)中，所述内标溶液为含内标样品的乙腈溶液。所述内标溶液即分别称取内标样品加入乙腈定容后获得。更优选地，所述内标样品为三磷酸苯酯(TPP)。进一步优选地，所述内标样品的浓度为100ng/mL。优选地，步骤1)中，所述第一次涡旋振荡的条件为：转速为1500-2500r/min；时间为0.8-1.2min。更优选地，所述第一次涡旋振荡的条件为：转速为2000r/min；时间为1.0min。优选地，步骤2)或3)中，所述试剂盒为QuEChERS(Quick、Easy、Cheap、Effective、Rugged、Safe)试剂盒。优选地，步骤2)中，所述试剂盒粉包内包括有无水硫酸镁、氯化钠、柠檬酸氢钠。更优选地，所述无水硫酸镁、氯化钠、柠檬酸氢钠与烟草加入的质量之比为4:1:0.5:1.5-2.5。进一步优选地，所述无水硫酸镁、氯化钠、柠檬酸氢钠与烟草加入的质量之比为4:1:0.5:2。优选地，步骤2)中，所述第二次涡旋振荡的条件为：转速为1500-2500r/min；时间为1.8-2.2min。更优选地，所述第二次涡旋振荡的条件为：转速为2000r/min；时间为2.0min。优选地，步骤2)中，所述第一次离心的条件为：转速为4500-5500r/min；时间为9-11min。更优选地，所述第一次离心的条件为：转速为5000r/min；时间为10min。优选地，步骤3)中，所述吸附剂小管内包括有无水硫酸镁和N-丙基乙二胺。所述N-丙基乙二胺为键合固定相吸附剂。更优选地，所述无水硫酸镁、N-丙基乙二胺加入的质量mg与第一上清液加入体积mL之比为150:25:0.5-1.5。进一步优选地，所述无水硫酸镁、N-丙基乙二胺加入的质量mg与第一上清液加入体积mL之比为150:25:1.0。优选地，步骤3)中，所述第三次涡旋振荡的条件为：转速为1500-2500r/min；时间为1.8-2.2min。更优选地，所述第二次涡旋振荡的条件为：转速为2000r/min；时间为2.0min。优选地，步骤1)、2)、3)中，所述涡旋振荡采用涡旋振荡仪进行。优选地，步骤3)中，所述第二次离心的条件为：转速为4500-5500r/min；时间为4-6min。更优选地，所述第二次离心的条件为：转速为5000r/min；时间为5min。优选地，步骤3)中，所述过滤为有机相滤膜过滤的方式。更优选地，所述有机相滤膜的孔径为0.22μm。较佳地，所述采用中心切割二维色谱质谱联用系统对前处理所得待测样品进行定性定量分析，包括以下步骤：A)配制标准样品：分别取烟草中农残成分的标样，加入内标样品，再加入乙腈定容，配成混合标准溶液；B)样品定性检测：分别将步骤A)配制的标准样品和经样品前处理后待测样品进行中心切割二维色谱质谱联用系统检测，通过第一维色谱进行馏分后，馏分目标采用分流器分流、定量环收集，再由第二维色谱进行分离，通过质谱进行测定，比较保留时间、质谱扫描进行定性，确定待测样品中农残成分；C)样品定量检测：分别将步骤A)配制的标准样品和经样品前处理后待测样品进行中心切割二维色谱质谱联用系统检测，通过第一维色谱进行馏分后，馏分目标采用分流器分流、定量环收集，再由第二维色谱进行分离，通过质谱进行测定，采用内标标准曲线法进行MRM定量，获得待测样品中农残成分的含量。优选地，步骤A)中，所述混合标准溶液中农残成分的浓度均为10～500ng/mL。优选地，步骤A)中，所述内标样品为三磷酸苯酯(TPP)。更优选地，所述内标样品的浓度为100ng/mL。优选地，步骤B)或C)中，所述第一维色谱为体积排阻液相色谱(GPC)。即采用液相色谱仪进行体积排阻(也称凝胶过滤)。优选地，步骤B)或C)中，所述第一维色谱包括有依次连接的第一泵、第一分离柱、紫外检测器。更优选地，所述第一泵与第一分离本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种中心切割二维色谱质谱联用分析烟草中农残的方法，对烟草进行样品前处理，采用中心切割二维色谱质谱联用系统对前处理所得待测样品进行定性定量分析，所述中心切割二维色谱质谱联用系统包括沿样品进样方向依次连接的第一维色谱、分流器、定量环、第二维色谱、质谱。

【技术特征摘要】
1.一种中心切割二维色谱质谱联用分析烟草中农残的方法，对烟草进行样品前处理，采用中心切割二维色谱质谱联用系统对前处理所得待测样品进行定性定量分析，所述中心切割二维色谱质谱联用系统包括沿样品进样方向依次连接的第一维色谱、分流器、定量环、第二维色谱、质谱。2.根据权利要求1所述的一种中心切割二维色谱质谱联用分析烟草中农残的方法，其特征在于，所述烟草中农残选自啶虫脒、马拉硫磷、阿拉酸式苯-S-甲基、灭蚜磷、涕灭威砜、甲霜灵、嘧菌酯、甲硫威、苯霜灵、灭虫威砜、双苯三唑醇、灭虫威亚砜、除草定、速灭磷、仲丁灵、久效磷、甲萘威、腈菌唑、多菌灵、敌草胺、壳百威、氧乐果、氯虫苯甲酰胺、噁霜灵、毒虫畏、克草敌、毒死蜱、戊菌唑、甲基内吸磷、二甲戊灵、二嗪磷、磷胺、乙霉威、抗蚜威、甲氟磷、丙溴磷、乐果、霜霉威、烯酰吗啉、残杀威、双苯酰草胺、吡蚜酮、乙拌磷亚砜、吡菌磷、乙硫磷、喹硫磷、灭线磷、精喹禾灵、咪唑菌酮、特丁硫磷、苯线磷、特丁硫磷砜、苯线磷砜、特丁硫磷亚砜、苯线磷亚砜、杀虫畏、丰索磷、噻虫嗪、倍硫磷亚砜、硫双威、氟吗啉、甲基硫菌灵、庚烯磷、三唑酮、吡虫啉、三唑醇、茚虫威、三唑磷、异稻瘟净、杀铃脲、氯唑磷、烯效唑、稻瘟灵、蚜灭磷中的任意一种或多种组合。3.根据权利要求1所述的一种中心切割二维色谱质谱联用分析烟草中农残的方法，其特征在于，所述样品前处理包括以下步骤：1)将烟草加水振荡浸润后静置，再加入内标溶液进行第一次涡旋振荡；2)再加入试剂盒粉包进行第二次涡旋振荡后第一次离心，取第一上清液；3)将第一上清液放入试剂盒含吸附剂小管中，进行第三次涡旋振荡后第二次离心，取第二上清液过滤后，即得待测样品。4.根据权利要求1所述的一种中心切割二维色谱质谱联用分析烟草中农残的方法，其特征在于，所述采用中心切割二维色谱质谱联用系统对前处理所得待测样品进行定性定量分析，包括以下步骤：A)配制标准样品：分别取烟草中农残成分的标样，加入内标样品，再加入乙腈定容，配成混合标准溶液；B)样品定性检测：分别将步骤A)配制的标准样品和经样品前处理后待测样品进行中心切割二维色谱质谱联用系统检测，通过第一维色谱进行馏分后，馏分目标采用分流器分流、定量环收集，再由第二维色谱进行分离，通过质谱进行测定，比较保留时间、质谱扫描进行定性，确定待测样品中农残成分；C)样品定量检测：分别将步骤A)配制的标准样品和经样品前处理后待测样品进行中心切割二维色谱质谱联用系统检测，通过第一维色谱进行馏分后，馏分目标采用分流器分流、定量环收集，再由第二维色谱进行分离，通过质谱进行测定，采用内标标准曲线法进行MRM定量，获得待测样品中农残成分的含量。5.根据权利要求4所述的一种中心切割二维色谱质谱联用分析烟草中农残的方法，其特征在于，步骤B)或C)中，所述第一维色谱为体积排阻液相色谱；所述第一维色谱的条件为：第一分离柱为SuperSW型凝胶色谱柱；紫外检测器的波长为220-240nm；柱温：25-35℃；流速：0.3-0.5mL/min；进样量：2-4μL；第一维流动相：30-50％乙腈。6.根据权利要求4所述的一种中心切割二维色谱质谱联用分析烟草中农残的方法，其特征在于，步骤B)或C)中，所述分流器的分流比为3-10:1。7.根据权利要求4所述的一种中心切割二维色谱质谱联用分析烟草中农残的方法，其特征在于，步骤B)或C)中，所述第二维色谱为反相液相色谱；所述第二维色谱的条件为：第二分离柱为C18色谱柱；柱温：25-35℃；流速：0.3-0.5mL/min；进样量：2-4μL；第二维流动相A相：1-3mmol/L甲酸铵、0.05-0.15％甲酸、94-96％H2O+4-6％CH3CN，V:V；第二维流动相B相：1-3mmol/L甲酸铵、0.05-0.15％甲酸、4-6％H2O+94-96％CH3CN，V:V；梯度洗脱。8.根据...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈敏，吴达，戚大伟，刘百战，
申请(专利权)人：上海烟草集团有限责任公司，
类型：发明
国别省市：上海,31