一种液相色谱-质谱联用代谢组学检测通用质控方法技术

本发明专利技术公开了一种液相色谱‑质谱联用代谢组学检测通用质控方法，其包括，将所述2‑氯苯丙氨酸代替溶剂对样本进行提取，保证每个样本中内标的浓度一致，采集数据，在数据采集过程中，通过2‑氯苯丙氨酸峰面积和保留时间反映实际样本的采集情况。本发明专利技术通过用2‑氯苯丙氨酸作为通用内标代替溶剂来提取样本，能够准确监控样本采集情况，排除采集有问题的样本，避免发生错检，并将17个混标作为通用质控品监控仪器波动状态，大大简化了高通量代谢组学检测中繁琐的操作和复杂的信号分析、数据处理的问题，并使得检测结果更加准确可靠。

A General Quality Control Method for Metabonomics Detection by Liquid Chromatography-Mass Spectrometry

The invention discloses a general quality control method for liquid chromatography-mass spectrometry combined with metabolomics detection, which includes extracting the sample with the 2 chlorophenylalanine instead of solvent, ensuring the consistency of the internal standard concentration in each sample, collecting data, and reflecting the actual sample collection through the peak area and retention time of 2 chlorophenylalanine in the process of data collection. By using 2_chlorophenylalanine as a general internal standard instead of a solvent to extract samples, the method can accurately monitor the sample collection situation, eliminate the collection of problematic samples, avoid the occurrence of false detection, and use 17 mixed labels as a general quality control instrument to monitor the fluctuation state, greatly simplifying the tedious operation in high-throughput metabonomics detection, complex signal analysis and data processing questions. The test results are more accurate and reliable.

【技术实现步骤摘要】
一种液相色谱-质谱联用代谢组学检测通用质控方法
本专利技术属于代谢组学检测
，具体涉及一种液相色谱-质谱联用代谢组学检测通用质控方法。
技术介绍
液相色谱-质谱联用(LC-MS)具有高分辨能力，高灵敏度，适合高沸点、热不稳定及高分子量化合物的检测等优点，被广泛应用于代谢组学的检测。广泛靶向代谢组学检测技术利用ABSciex公司三重四极杆质谱，可在一针的采集时间里同时检测上千种物质，但由于人员、样本、环境、仪器等多方面的原因，在数据采集过程中会出现少数样本采集不好的情况，仪器响应降低，保留时间偏移等，导致采集数据不可用，需要剔除采集不好的样本甚至整批样本重采。在跑样过程中，一般需要打开每个样本的采集数据查看对应每个样本的采集情况，费时费力且容易遗漏有问题的样本。因此，如何提供一种能够快速判断样本的采集情况的通用质控方法，快速、准确判断样本采集情况，迅速发现采集有问题的样本、避免遗漏，是现有技术有待解决的技术问题。
技术实现思路
本部分的目的在于概述本专利技术的实施例的一些方面以及简要介绍一些较佳实施例。在本部分以及本申请的说明书摘要和专利技术名称中可能会做些简化或省略以避免使本部分、说明书摘要和专利技术名称的目的模糊，而这种简化或省略不能用于限制本专利技术的范围。鉴于上述的技术缺陷，提出了本专利技术。因此，作为本专利技术其中一个方面，本专利技术克服现有技术中存在的不足，提供一种液相色谱-质谱联用代谢组学检测通用质控方法。为解决上述技术问题，本专利技术提供了如下技术方案：一种液相色谱-质谱联用代谢组学检测通用质控方法，其包括，将2-氯苯丙氨酸代替溶剂对样本进行提取，保证每个样本中内标的浓度一致，采集数据，在数据采集过程中，通过2-氯苯丙氨酸峰面积和保留时间反映实际样本的采集情况。作为本专利技术所述的液相色谱-质谱联用代谢组学检测通用质控方法的一种优选方案：所述2-氯苯丙氨酸浓度为1μg/mL。作为本专利技术所述的液相色谱-质谱联用代谢组学检测通用质控方法的一种优选方案：所述液相色谱-质谱联用代谢组学检测包括超高效液相色谱－三重四级杆/线性离子阱串联质谱检测，使用分析软件包括MultiQuant。作为本专利技术所述的液相色谱-质谱联用代谢组学检测通用质控方法的一种优选方案：还包括，使用4,4’-亚甲基双(2-氯苯胺)、对茴香胺、L-酪氨酸甲酯、3-氯苯胺、2，4-二甲基喹啉、磺胺吡啶、阿特拉津、磺胺多辛、DL-亮氨酸、N-苯甲酰基-L-酪氨酸乙酯、6-苯基-2-硫脲嘧啶、N-(邻甲苯酰)甘氨酸、2-甲基-5-硝基咪唑-1-乙醇、甘草次酸、黄烷酮、ε-己内酯、2-氨基吡啶的混合标样，每次检测至少进两针所述代谢组学检测通用质控品，根据谱图重叠情况分析检测仪器的状态。作为本专利技术所述的液相色谱-质谱联用代谢组学检测通用质控方法的一种优选方案：以质量比计，所述4,4’-亚甲基双(2-氯苯胺)：对茴香胺：L-酪氨酸甲酯：3-氯苯胺：2，4-二甲基喹啉：磺胺吡啶：阿特拉津：磺胺多辛：DL-亮氨酸：N-苯甲酰基-L-酪氨酸乙酯：6-苯基-2-硫脲嘧啶：N-(邻甲苯酰)甘氨酸：2-甲基-5-硝基咪唑-1-乙醇：甘草次酸：黄烷酮：ε-己内酯：2-氨基‘’吡啶＝1：0.5：0.5：2：1：0.4：0.1：0.1：0.2：0.5：0.5：1：1：0.1：0.5：2：0.2。作为本专利技术所述的液相色谱-质谱联用代谢组学检测通用质控方法的一种优选方案：所述4,4’-亚甲基双(2-氯苯胺)的浓度为1μg/mL、对茴香胺的浓度为0.5μg/mL、L-酪氨酸甲酯的浓度为0.5μg/mL、3-氯苯胺的浓度为2μg/mL、2，4-二甲基喹啉的浓度为1μg/mL、磺胺吡啶的浓度为0.4μg/mL、阿特拉津的浓度为0.1μg/mL、磺胺多辛的浓度为0.1μg/mL、DL-亮氨酸的浓度为0.2μg/mL、N-苯甲酰基-L-酪氨酸乙酯的浓度为0.5μg/mL、6-苯基-2-硫脲嘧啶的浓度为0.5μg/mL、N-(邻甲苯酰)甘氨酸的浓度为1μg/mL、2-甲基-5-硝基咪唑-1-乙醇的浓度为1μg/mL、甘草次酸的浓度为0.1μg/mL、黄烷酮的浓度为0.5μg/mL、ε-己内酯的浓度为2μg/mL、2-氨基吡啶的浓度为0.2μg/mL。作为本专利技术所述的液相色谱-质谱联用代谢组学检测通用质控方法的一种优选方案：每次检测在数据采集过程中通过采集的数据总离子流色谱图重叠情况判断仪器波动情况，色谱图重叠较好说明仪器稳定，重叠不好则通过重叠情况判断仪器状态，保留时间重叠不上柱压或柱温不稳定，响应重叠不上说明色谱柱堵塞或质谱污染。作为本专利技术所述的液相色谱-质谱联用代谢组学检测通用质控方法的一种优选方案：所述代谢组学检测包括氨基酸及其代谢物酸检测、核酸检测、苯及其衍生物检测、杂环化合物检测、胺类检测、黄酮类物质检测、萜类化合物检测、醇类检测、内酯检测、吡啶及其衍生物检测。本专利技术的有益效果：本专利技术通过用2-氯苯丙氨酸作为通用内标代替溶剂来提取样本，能够准确监控样本采集情况，排除采集有问题的样本，避免发生错检，并将17个混标作为通用质控品监控仪器波动状态，从而使得在检测过程中不必再每次实验单独配制混标，并且排除每次实验的混标容易存在本身响应不佳、信号相互干扰、重复性差等技术问题，大大简化了高通量代谢组学检测中繁琐的操作和复杂的信号分析、数据处理的问题，并使得检测结果更加准确可靠。附图说明为了更清楚地说明本专利技术实施例的技术方案，下面将对实施例描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其它的附图。其中：图1为本专利技术方法MultiQuant软件参数设置示范。图2为本专利技术检测的样本内标异常的数据图。图3为本专利技术检测的异常样本的出峰图。图4为本专利技术重新采集后正常样本的出峰图。图5为本专利技术质控品在液相色谱-质谱联用仪器上出峰情况图。图6为本专利技术质控品在液相色谱-质谱联用仪器上的峰重叠情况图。图7为在一次验证实验中，本专利技术混标质控品的出峰及峰重叠情况图。图8为在一次验证实验中，已知样品的出峰及峰重叠情况图。图9为在一次验证实验中，本专利技术混标质控品的出峰情况图。图10为在一次验证实验中，已知样品的出峰及峰重叠情况图。图11为在一次验证实验中，本专利技术混标质控品的出峰及峰重叠情况图。图12为在一次验证实验中，已知样品的出峰及峰重叠情况图。具体实施方式为使本专利技术的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面结合具体实施例对本专利技术的具体实施方式做详细的说明。在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本专利技术，但是本专利技术还可以采用其他不同于在此描述的其它方式来实施，本领域技术人员可以在不违背本专利技术内涵的情况下做类似推广，因此本专利技术不受下面公开的具体实施例的限制。其次，此处所称的“一个实施例”或“实施例”是指可包含于本专利技术至少一个实现方式中的特定特征、结构或特性。在本说明书中不同地方出现的“在一个实施例中”并非均指同一个实施例，也不是单独的或选择性的与其他实施例互相排斥的实施例。本专利技术采用超高效液相色谱－三重四级杆/线性离子阱串联质谱(UPLC-QTRAP)技术，质谱仪为ABSciexQ-TRAP6500本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种液相色谱‑质谱联用代谢组学检测通用质控方法，其特征在于：包括，将2‑氯苯丙氨酸代替溶剂对样本进行提取，保证每个样本中2‑氯苯丙氨酸内标的浓度一致，采集数据，在数据采集过程中，通过2‑氯苯丙氨酸峰面积和保留时间反映实际样本的采集情况。

【技术特征摘要】
1.一种液相色谱-质谱联用代谢组学检测通用质控方法，其特征在于：包括，将2-氯苯丙氨酸代替溶剂对样本进行提取，保证每个样本中2-氯苯丙氨酸内标的浓度一致，采集数据，在数据采集过程中，通过2-氯苯丙氨酸峰面积和保留时间反映实际样本的采集情况。2.如权利要求1所述的液相色谱-质谱联用代谢组学检测通用质控方法，其特征在于：所述2-氯苯丙氨酸浓度为1μg/mL。3.如权利要求1或2所述的液相色谱-质谱联用代谢组学检测通用质控方法，其特征在于：所述液相色谱-质谱联用代谢组学检测包括超高效液相色谱－三重四级杆/线性离子阱串联质谱检测，使用分析软件包括MultiQuant。4.如权利要求1或2所述的液相色谱-质谱联用代谢组学检测通用质控方法，其特征在于：还包括，使用4,4’-亚甲基双(2-氯苯胺)、对茴香胺、L-酪氨酸甲酯、3-氯苯胺、2，4-二甲基喹啉、磺胺吡啶、阿特拉津、磺胺多辛、DL-亮氨酸、N-苯甲酰基-L-酪氨酸乙酯、6-苯基-2-硫脲嘧啶、N-(邻甲苯酰)甘氨酸、2-甲基-5-硝基咪唑-1-乙醇、甘草次酸、黄烷酮、ε-己内酯、2-氨基吡啶的混合标样，每次检测至少进两针所述代谢组学检测通用质控品，根据谱图重叠情况分析检测仪器的状态。5.如权利要求4所述的液相色谱-质谱联用代谢组学检测通用质控方法，其特征在于：以质量比计，所述4,4’-亚甲基双(2-氯苯胺)：对茴香胺：L-酪氨酸甲酯：3-氯苯胺：2，4-二甲基喹啉：磺胺吡啶：阿特拉津：磺胺多辛：DL-亮氨酸：N-苯甲酰基-L-酪氨酸乙酯：6-苯基-2-硫脲嘧啶：N-(邻甲苯酰)甘氨酸：2-甲基-5-硝基咪唑-1-乙醇：甘草次酸：黄烷酮：ε-己内酯：2-氨基吡啶＝...

【专利技术属性】
技术研发人员：唐堂，胡梦婷，王宏，郑彬，
申请(专利权)人：嘉兴迈维代谢生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江,33