一种血清钠比色法检测试剂盒制造技术

本发明专利技术公开了一种钠比色法检测试剂盒,属于临床体外检测试剂技术领域。本发明专利技术试剂盒包括试剂R1、试剂R2、校准品。通过在试剂R1中加入了EDTA、在试剂R2中加入硫脲,降低了血清中二价阳离子对实验准确度的影响。在试剂R1中加入NP‑7,使反应体系更加均一,从而提高了试剂的分析灵敏度。其线性范围也较好,试剂的准确度高,有利于在市场中进一步的推广使用。

A Kit for Detecting Serum Sodium by Colorimetry

The invention discloses a sodium colorimetric detection kit, which belongs to the technical field of clinical in vitro detection reagents. The kit comprises reagent R1, reagent R2 and calibration product. By adding EDTA in reagent R1 and thiourea in reagent R2, the influence of bivalent cations in serum on the experimental accuracy was reduced. NP_7 was added to reagent R1 to make the reaction system more uniform, thus improving the analytical sensitivity of reagent. The linear range of the reagent is also good, and the accuracy of the reagent is high, which is conducive to further promotion and use in the market.

【技术实现步骤摘要】
一种血清钠比色法检测试剂盒
本专利技术涉及临床体外检测试剂
,特别涉及一种血清钠比色法检测试剂盒。
技术介绍
随着离子选择性电极技术的不断发展和完善,用离子选择性电极(TSE)法对血液中无机离子的分析日趋广泛,与此同时,实验室其它项目测定多用分光光度法,对于制造厂家和使用者来说,把两者同时在一台仪器上进行自动分析要付出较高的费用并带来许多技术上和管理上的问题。分光光度法测定血液中的无机离子早有应用,但基本上是普通化学方法,准确度和灵敏度均较差,而且很难用于自动分析。无机离子在体内可以作为一些酶的辅助成份，对酶反应起激活和放大作用,近年来,酶法分析无机离子取得了可喜的进展。此类方法不但有较高的特异性和灵敏度,还可自动快速分析,适用于多种类型的以分光光度法为基础的分析仪。血清钠降低见于呕吐、腹泻等胃肠道失钠；肾炎、肾病综合症、肾上腺皮质功能不全、尿崩症、糖尿病等尿路失钠；烧伤、大汗时皮肤失钠。高血钠见于脑外伤、脑血管意外，严重脱水，肾上腺皮质机能亢进等。
技术实现思路
针对于现有技术存在的问题,本专利技术提供了一种钠比色法检测试剂盒,该试剂盒与常规的试剂盒相比,稳定性和线性范围比常规的检测试剂盒要好,分析灵敏度高,有利于试剂在临床上的推广应用。本专利技术是通过以下措施实现的：一种血清钠比色法检测试剂盒,其特征在于,它包含试剂R1、试剂R2,其中试剂R1组成为：100mmol/L的pH7.6Tris缓冲液、3.5KU/L的β-半乳糖苷酶、10ml/L-30ml/L的NP-7、2.1mL/L的kryptofix221、7.7mmol/L的PC-300、0.05g/L-0.12g/L的EDTA；试剂R2组成为：100mmol/L的Tris缓冲液(pH7.6)、0.5g/L的2-硝基苯-β-D-吡喃半乳糖苷、10mmol/L-26mmol/L的硫脲、7.7mmol/L的PC-300、1g/L的BSA。所述试剂R1和试剂R2在使用时的比例为R1：R2＝120：40。本专利技术所使用的校准品为北京九强生物技术有限公司生产的Na校准品。本专利技术的试剂盒在具有双试剂功能的自动生化分析仪上进行,其具体使用方法如下：加入生理盐水、样本或校准品4μl,之后再加入R1试剂120μl预孵育5min后读取吸光度A1,之后再加入40μl的试剂R2反应5min后,读取吸光度A2,并计算ΔA。本专利技术的有益效果：本专利技术提供的血清钠比色法检测试剂盒,通过在试剂R1中加入EDTA、在试剂R2中加入硫脲,降低了血清中二价阳离子对实验准确度的影响。在试剂R1中加入NP-7,使反应体系更加均一,从而提高了试剂的分析灵敏度。附图说明图1实施例2准确度验证实验检测结果与对照组检测结果相关性；图2实施例3准确度验证实验检测结果与对照组检测结果相关性；图3实施例4准确度验证实验检测结果与对照组检测结果相关性；图4实施例1-4线性相关验证实验检测结果；图5实施例1-4试剂稳定性验证实验检测结果；图6实施例1-4试剂灵敏度验证实验检测结果。具体实施方式为了更好的理解本专利技术,下面结合具体实施例来进一步详细说明。实施例1一种血清钠比色法检测试剂盒,它包括试剂R1、试剂R2、校准品。其中试剂R1组成为：试剂R2组成为：本实施例描述的试剂盒,在使用时,其测定方法是采用具有双试剂功能的日立7180自动分析仪,操作如下：加入生理盐水、样本或校准品30μl,之后再加入R1试剂200μl预孵育5min后读取吸光度A1,之后再加入100μl的试剂R2反应5min后,读取吸光度A2,并计算ΔA。本实施例所使用的校准品为北京九强生物技术有限公司生产的NA校准品。实施例2一种钠比色法检测试剂盒,它包括试剂R1、试剂R2、校准品。其中试剂R1组成为：试剂R2组成为：具体测定方法同实施例1。实施例3一种血清钠比色法检测试剂盒,它包括试剂R1、试剂R2、校准品。其中试剂R1组成为：试剂R2组成为：具体测定方法同实施例1。实施例4一种钠比色法检测试剂盒,它包括试剂R1、试剂R2、校准品。其中试剂R1组成为：试剂R2组成为：具体测定方法同实施例1。对上述实施例1-4中制得的试剂盒分析性能进行实验验证。准确度验证实验：将实施例2、3、4的试剂盒作为实验组,市场上获得认可的一种准确度优异的钠比色法检测试剂盒(深圳某公司生产)作为对照组进行对比实验,对40个样本进行检测,检测的结果如图1-图3。通过图1-图3的检测数据可知,实施例2、3、4检测试剂盒与对照检测试剂盒的检测结果相关性分别为0.9838、0.9920、0.9960,相关性比较好,表明本专利技术的试剂盒与市场上获得认可的具有优异准确度的钠比色法检测试剂盒有高度一致性,证明本专利技术试剂盒添加的其他各种成分对其准确性不会造成影响,试剂盒依然保持较好的准确度。线性相关性验证实验：找到钠高值样本为180mmol/L,用生理盐水进行系列稀释,配制6个不同浓度的样本,依次为180mmol/L、144mmol/L、108mmol/L、72mmol/L、36mmol/L、0mmol/L浓度的样本,每个浓度水平各样本分别测定三次,分别取其平均值。分别利用实施例1、2、3、4的试剂进行检测。检测结果图4所示。检测结果显示,实施例1-4检测结果相关性均大于0.990,但实施例2、3、4的检测结果大于0.998,与实施例1相比具有更好的线性相关性,这说明本专利技术试剂具有更好的线性相关性。稳定性验证实验：在2℃-8℃、无腐蚀性气体的避光环境中贮存试剂,检测实施例1-4试剂的稳定性。实施例1-4试剂每月选取同一样本测定其吸光度三次,取平均值,与新鲜的实施例1试剂检测结果进行对比,从而确定试剂的稳定时间。检测数据见图5。实验结果显示,实施例1试剂在2℃-8℃、无腐蚀性气体的避光环境中贮存15个月稳定,而实施例2、3、4试剂在2℃-8℃、无腐蚀性气体的避光环境中贮存24个月稳定,说明通过在试剂R1中加入了EDTA、在试剂R2中加入硫脲,降低了血清中二价阳离子对实验准确度的影响。在试剂R1中加入NP-7,使反应体系更加均一,从而提高了试剂的稳定性。分析灵敏度验证实验：用本专利技术血清钠比色法检测试剂盒测试已知浓度在50.3U/mL的样本,记录吸光度差值。分别利用实施例1、2、3、4的试剂进行检测。检测结果见图6。通过检测数据可知,实施例2、3、4检测试剂盒的吸光度差值均比实施例1的高,说明通过在试剂R1中加入了EDTA、在试剂R2中加入硫脲,降低了血清中二价阳离子对实验准确度的影响。在试剂R1中加入NP-7,使反应体系更加均一,从而提高了试剂的分析灵敏度。因此，本专利技术提供的血清钠比色法检测试剂盒有利于在市场中进一步的推广使用。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种血清钠比色法检测试剂盒, 其特征在于, 它包含试剂R1、试剂R2, 其中试剂R1组成为：100 mmol/L 的pH 7.6 Tris缓冲液、3.5KU/L的β‑半乳糖苷酶、10ml/L‑30ml/L 的NP‑7、2.1mL/L的kryptofix221、7.7 mmol/L的PC‑300、0.05g/L‑0.12g/L的EDTA；试剂R2组成为：100 mmol/L的Tris缓冲液（pH 7.6）、0.5g/L的2‑硝基苯‑β‑D‑吡喃半乳糖苷、10mmol/L‑26mmol/L的硫脲、7.7 mmol/L的PC‑300、1g/L的BSA。

【技术特征摘要】
1.一种血清钠比色法检测试剂盒,其特征在于,它包含试剂R1、试剂R2,其中试剂R1组成为：100mmol/L的pH7.6Tris缓冲液、3.5KU/L的β-半乳糖苷酶、10ml/L-30ml/L的NP-7、2.1mL/L的kryptofix221、7.7mmol/L的PC-300、0.05g/L-0.12g/L的EDT...

【专利技术属性】
技术研发人员：罗维晓，李静，王美丽，胡晓飞，
申请(专利权)人：山东博科生物产业有限公司，
类型：发明
国别省市：山东,37