The invention provides a method for rapid detection of paraquat based on a chemiluminescence resonance energy transfer sensor on the surface of nanogold, and relates to the technical field of food detection. The method enriches horseradish peroxidase on the surface of gold nanoparticles and provides a necessary condition for chemiluminescence resonance energy transfer between luminol, hydrogen peroxide, horseradish peroxidase and gold nanoparticles. The chemiluminescence reaction system of horseradish peroxidase-catalyzed chemiluminescence sensitizer has unique optical properties such as high photoquantum yield and long luminescence time. Paraquat can effectively compete with horseradish peroxidase to enrich on the surface of gold nanoparticles, thus reducing the energy transfer efficiency of chemiluminescence resonance, restoring chemiluminescence and detecting stronger chemiluminescence intensity. Microporous plate enzyme labeling instrument has a high performance microporous plate detection system, which can play a unique advantage in rapid batch screening operation. Thus, the fast detection and high sensitivity can be realized.
【技术实现步骤摘要】
一种基于纳米金表面的化学发光共振能量转移传感器快速检测百草枯的方法
本专利技术涉及食品检测
,具体涉及一种基于纳米金表面的化学发光共振能量转移传感器快速检测百草枯的方法。
技术介绍
百草枯,化学名1,1-二甲基-4,4-联吡啶阳离子,属于有机杂环类季铵盐除草剂。是一种快速灭生的除草剂,具有广谱速效和触杀的作用。它曾被人们认为是对环境无害的农药,其产量和用量在世界上名列前位,被全球推广使用。然而,近年来,百草枯已被世界卫生组织分类为中等毒性农药,其毒性极大,会造成心肺和肝肾等严重毒害,一旦中毒,无有效解毒药物,口服中毒死亡率达90%以上。据报道,每年在欧洲、亚洲、美洲均有大量百草枯致死的案例出现,大多案例为口服误食致死。我国是百草枯生产使用的大国,也是中毒者数量最多的国家之一。因此,加强百草枯检测方法学研究对于保障我国食品安全和农产品贸易具有重要意义。目前,百草枯的检测方法主要有气相色谱法、液相色谱法、高效液相色谱串联质谱法、拉曼光谱法等。其中,气相色谱法仪器普遍、灵敏度较高,很早就开始被应用于百草枯的检测,但存在百草枯沸点高、难裂解气化、前处理操作繁琐等不足;液相色谱法是百草枯检测最常用的方法,主要优点在于可以保留碱性化合物,无需使用离子对试剂,但其存在灵敏度不高、定性能力较差等缺点。高效液相色谱-串联质谱技术作为近年来得到广泛应用的技术,具有高灵敏度、痕量检测和准确定性等特点,成为检测分析的重要手段,但其检测成本较大,且前处理过程较繁琐。生物传感器是一种集生物识别元素和信号转换元素为一体的分析检测装置,其可选择性的提供定性或定量的分析信号,从而实现 ...
【技术保护点】
1.一种基于纳米金表面的化学发光共振能量转移传感器快速检测百草枯的方法,其特征在于,包括以下步骤:S1.首先将纳米金与辣根过氧化物酶溶液在15~35℃下温育30~35min,得到辣根过氧化物酶‑纳米金复合体;S2.将步骤S1得到的辣根过氧化物酶‑纳米金复合体与一系列百草枯标准液在15~35℃下混合温育30~35min,得到一系列辣根过氧化物酶‑纳米金、百草枯‑纳米金混合溶液;S3.将化学发光增敏液分别加入到S2得到的一系列辣根过氧化物酶‑纳米金、百草枯‑纳米金混合溶液中,得到Luminol‑H2O2‑HRP‑AuNPs化学发光共振能量转移体系;S4.在室温下用酶标仪测量化学发光共振能量转移体系的化学发光强度,绘制标准曲线;S5.将百草枯待测液代替百草枯标准液,重复步骤S1、S2和S3制备化学发光共振能量转移体系并测量其化学发光强度,达到对百草枯定量检测的目的。
【技术特征摘要】
1.一种基于纳米金表面的化学发光共振能量转移传感器快速检测百草枯的方法,其特征在于,包括以下步骤:S1.首先将纳米金与辣根过氧化物酶溶液在15~35℃下温育30~35min,得到辣根过氧化物酶-纳米金复合体;S2.将步骤S1得到的辣根过氧化物酶-纳米金复合体与一系列百草枯标准液在15~35℃下混合温育30~35min,得到一系列辣根过氧化物酶-纳米金、百草枯-纳米金混合溶液;S3.将化学发光增敏液分别加入到S2得到的一系列辣根过氧化物酶-纳米金、百草枯-纳米金混合溶液中,得到Luminol-H2O2-HRP-AuNPs化学发光共振能量转移体系;S4.在室温下用酶标仪测量化学发光共振能量转移体系的化学发光强度,绘制标准曲线;S5.将百草枯待测液代替百草枯标准液,重复步骤S1、S2和S3制备化学发光共振能量转移体系并测量其化学发光强度,达到对百草枯定量检测的目的。2.根据权利要求1所述的基于纳米金表面的化学发光共振能量转移传感器快速检测百草枯的方法,其特征在于,步骤S2中,一...
【专利技术属性】
技术研发人员:覃国新,闫飞燕,王静,金茂俊,劳水兵,何洁,莫仁甫,周其峰,杨玉霞,王海军,罗丽红,
申请(专利权)人:广西壮族自治区农业科学院农产品质量安全与检测技术研究所,
类型:发明
国别省市:广西,45
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