一种快速、准确测定中药材硒含量的方法技术

本发明专利技术属于分析技术领域，具体涉及一种快速、准确测定中药材硒含量的方法。该方法中采用混合酸对中药材样品进行消化，在盐酸介质中，以氢氧化钠、硼氢化钾为还原剂，利用氢化物‑原子荧光法测定中药材中的硒含量。该方法具有准确高效、检出限低、灵敏度高、回收率高等优点，能够快速、准确的测定中药材中的硒含量，可满足中药材中硒的分析要求，且可用于大量样品的快速检测。因氢化物‑原子荧光法具有抗干扰能力强的特点，可以不用抗干扰试剂，试验结果几乎不受影响，使方法更加简单、易操作。

A Rapid and Accurate Method for the Determination of Selenium in Traditional Chinese Medicine

The invention belongs to the technical field of analysis, and in particular relates to a rapid and accurate method for determining selenium content in Chinese medicinal materials. In this method, mixed acid was used to digest the samples of traditional Chinese medicines. In the medium of hydrochloric acid, sodium hydroxide and potassium borohydride were used as reducing agents, and the selenium content in traditional Chinese medicines was determined by hydride generation atomic fluorescence spectrometry. The method has the advantages of high accuracy, high efficiency, low detection limit, high sensitivity and high recovery. It can quickly and accurately determine the content of selenium in traditional Chinese medicines. It can meet the analysis requirements of selenium in traditional Chinese medicines and can be used for rapid detection of a large number of samples. Because hydride atomic fluorescence method has strong anti-interference ability, it can be used without anti-interference reagents. The test results are almost unaffected, which makes the method simpler and easier to operate.

【技术实现步骤摘要】
一种快速、准确测定中药材硒含量的方法
本专利技术属于分析
，具体涉及一种氢化物-原子荧光法快速、准确测定中药材硒含量的分析方法。
技术介绍
硒是微生物、动物以及人体所必需的微量元素，是硒蛋白的主要构成部分，参与谷胱甘肽过氧化物酶(GPxs)、硫氧化蛋白还原酶(TrxR)等一系列酶系统中，发挥着抗氧化、抗癌、抗肿瘤等相关免疫系统功能。硒在土壤中分布不均匀，全球40多个国家和地区处于缺硒状态，我国2/3的地区缺硒。此类地区因缺硒导致的疾病发生率极高。目前，使用含硒药物预防因缺硒导致的克山病、大骨节病等有显著疗效。目前硒测定方法主要有分光光度法、电感耦合等离子体质谱法、氢化物-原子荧光法等。其中氢化物-原子荧光法因具有仪器简单、气相干扰少、精密度和准确度高、可以同时测定多种元素等特点得到众多研究者的青睐，在环境、食品、药物等领域得到应用。已有文献公布了氢化物-原子荧光法检测中药材硒含量结果。如郎春燕等建立了微波消解-双道原子荧光法测定中药材中硒方法，卑占宇建立了氢化物-原子荧光法测定黄芪中硒含量的方法，唐红芳等建立了原子荧光法测定抗癌中药硒含量的方法等。上述检测方法存在步骤多、操作繁杂、准确度和精密度低、线性范围小、其他金属离子干扰强等问题。为了克服上述问题和缺陷，本专利技术研究确定了一种氢化物-原子荧光法快速、准确测定中药材中硒含量的分析方法。
技术实现思路
本专利技术目的是提供一种氢化物-原子荧光法快速、准确测定中药材中硒含量的分析方法。该方法具有准确高效、检出限低、灵敏度高、回收率高、线性范围广等优点，因氢化物-原子荧光法具有抗干扰能力强的特点，可以不用抗干扰试剂，试验结果几乎不受影响，该方法更加简单、易操作，本专利技术能够快速、准确的测定中药材中的硒含量，可满足中药材中硒的分析要求，且可用于大量样品的快速检测，为中药材微量元素研究及药理功效研究提供便捷方法。为实现上述目的，本专利技术采用氢化物-原子荧光法测定中药材中硒含量的方法，包括以下步骤：(1)样品处理称取干燥中药材样品于消煮管，加入硝酸(HNO3)和高氯酸(HClO4)混合酸；将消煮管放于铝块自动消解炉中进行消解，消解完毕待消煮管冷却后，加入与消解混合酸等体积的浓盐酸进行还原，确保样品中硒(Ⅵ)充分还原为硒(Ⅳ)，再进行加热，蒸发至液体无色或冒白烟。待消煮管冷却后，将样品转移至离心管，使用去离子水定容，摇匀后备用，同时做样品重复及空白对照。(2)配制硒标准工作液取硒单元素标准物，用10％盐酸溶液进行稀释，选择0-80μg/L之间任意7个浓度梯度，准确配制不同浓度的硒标准工作液。(3)样品硒含量测定将原子荧光光度计预热一段时间，待仪器稳定后，将步骤(2)配制好的硒标准工作液引入原子荧光光度计，测定硒标准工作溶液的荧光强度并绘制标准曲线，直到标准曲线线性相关系数良好后，将步骤(1)处理好的空白对照和样品引入原子荧光光度计并测定荧光强度，根据已知浓度的硒标准工作溶液测得的荧光强度求出样品溶液中的硒含量。所述步骤(1)样品处理的具体步骤为：准确称取0.1g-0.2g干燥中药材样品于消煮管，加入硝酸(HNO3)和高氯酸(HClO4)混合酸2mL-4mL，所述硝酸(HNO3)和高氯酸(HClO4)的体积比为4:1；将消煮管放于铝块自动消解炉中，进入低温消解：40℃-60℃消解1-2小时，高温消解：逐渐升温至170℃-240℃消解4-6小时，消解完毕待消煮管冷却后，加入与消解混合酸等体积的浓盐酸进行还原，确保样品中硒(Ⅵ)充分还原为硒(Ⅳ)，再于60℃、120℃、170℃条件下分别加热1小时，蒸发至液体无色或冒白烟，液体约剩余2mL。待消煮管冷却后，将样品转移至15mL带刻度离心管，使用去离子水定容，摇匀后备用，同时做样品重复及空白对照。所述步骤(1)中中药材样品要风干、粉碎并过孔径为2mm筛。所述步骤(1)中为保证有机质充分消解，低温消解后，再逐渐升温进入高温消解阶段，设置消解温度高时要适当缩短消解时间。为保证安全，高温消解温度不宜超过240℃，温度过高易蒸干、发生危险，测定结果也会偏小。所述步骤(1)中混合酸的消解能力极强，消解程序分为低温消解和高温消解，不需要对样品进行冷消解。所述方法步骤(1)中定容后的样品溶液的硒浓度控制在硒标准工作液的浓度范围内。所述硒标准工作液要现配现用，根据一般中药材中总硒含量，为确保准确度以及标准曲线的良好线性关系，硒标准工作液最高浓度应定为80μg/L，所述标准曲线线性相关系数要求在0.9990以上。所述原子荧光光度计使用的还原剂为5g/L氢氧化钠、20g/L硼氢化钾；载流液为10％盐酸溶液。所述所述浓盐酸(HCl)、硝酸(HNO3)和高氯酸(HClO4)试剂为优级纯；硼氢化钾(KBH4)和氢氧化钠(NaOH)为分析纯。所述原子荧光光度计的工作参数为：预热30min，负高压为270V、原子化高度为8mm、灯电流为80mA、载气流量为300mL/min、屏蔽气流量为800mL/min、注入量为0.5mL、读数时间为10s、延迟时间为1s、读数方式为峰面积、测定方式为标准曲线。附图说明本专利技术有如下附图：图1为硒含量标准曲线图。具体实施方式以下实施例仅用于说明本专利技术技术构思及特点，其目的在于让熟悉此项技术者能了解本专利技术的内容并据以实施，并非以此限制本专利技术的保护范围。凡根据本专利技术精神实质所做的等效变换或修饰，都应涵盖于本专利技术的保护范围之内。实施例中采用的实施条件可根据具体厂家条件要求做进一步调整，未说明的实施条件通常为常规实验条件。实施例1黄芪中总硒含量测定(1)仪器与试剂本实验室使用的是北京吉天仪器公司AFS-8220双通道原子荧光光度计；济南晟升仪器铝块自动消解炉。北京华元气体有限公司氩气(Ar)：99.99％纯度气体；硒单元素标准物(100μg/mL)：GBW(E)080215；盐酸(HCl)、硝酸(HNO3)和高氯酸(HClO4)试剂为优级纯；硼氢化钾(KBH4)和氢氧化钠(NaOH)为分析纯；试验用水为去离子水。试验样品采自山西省灵丘县人工栽培黄芪，样品未经加工炮制。(2)样品处理准确称取0.1g(精确至0.0001g)干燥黄芪样品于消煮管，加入硝酸(HNO3)和高氯酸(HClO4)4:1混合酸2mL；将消煮管放于铝块自动消解炉中，进入60℃1小时、240℃4小时的消解程序进行消解。消解完毕待消煮管冷却后，加入2mL浓盐酸进行还原，再于60℃、120℃、170℃条件下分别加热1小时，蒸至液体无色或冒白烟，液体约剩余2mL。待消煮管冷却后，将样品转移至15mL带刻度离心管，以蒸馏水定容至10mL，摇匀后备用，同时做样品重复及空白对照。(3)配置硒标准工作液取1μL硒单元素标准物于带刻度的15mL离心管中，用10％盐酸溶液定容至10mL，再分别取0μL、5μL、10μL、15μL、20μL、25μL、80μL，准确配制浓度为0μg/L、5μg/L、10μg/L、15μg/L、20μg/L、25μg/L、80μg/L的硒标准工作液。(4)仪器工作条件原子荧光光度计的工作参数为：负高压为270V、原子化高度为8mm、灯电流为80mA、载气流量为300mL/min、屏蔽气流量为800mL/min、注入量为0.5mL、读数时间为10s本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种氢化物‑原子荧光法测定中药材中硒含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)样品处理称取干燥中药材样品于消煮管，加入硝酸和高氯酸混合酸；将消煮管放于铝块自动消解炉中进行消解，消解完毕待消煮管冷却后，加入与消解混合酸等体积的浓盐酸进行还原，确保样品中六价硒充分还原为四价硒，再进行加热，蒸发至液体无色或冒白烟；待消煮管冷却后，将样品转移至离心管，使用去离子水定容，摇匀后备用，同时做样品重复及空白对照；(2)配制硒标准工作液取硒单元素标准物，用10％盐酸溶液进行稀释，选择0‑80μg/L之间任意7个浓度梯度，准确配制不同浓度的硒标准工作液；(3)样品硒含量测定将原子荧光光度计预热一段时间，待仪器稳定后，将步骤(2)配制好的硒标准工作液引入原子荧光光度计，测定硒标准工作溶液的荧光强度并绘制标准曲线，直到标准曲线线性相关系数良好后，将步骤(1)处理好的空白对照和样品引入原子荧光光度计并测定荧光强度，根据已知浓度的硒标准工作溶液测得的荧光强度求出样品溶液中的硒含量。

【技术特征摘要】
1.一种氢化物-原子荧光法测定中药材中硒含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)样品处理称取干燥中药材样品于消煮管，加入硝酸和高氯酸混合酸；将消煮管放于铝块自动消解炉中进行消解，消解完毕待消煮管冷却后，加入与消解混合酸等体积的浓盐酸进行还原，确保样品中六价硒充分还原为四价硒，再进行加热，蒸发至液体无色或冒白烟；待消煮管冷却后，将样品转移至离心管，使用去离子水定容，摇匀后备用，同时做样品重复及空白对照；(2)配制硒标准工作液取硒单元素标准物，用10％盐酸溶液进行稀释，选择0-80μg/L之间任意7个浓度梯度，准确配制不同浓度的硒标准工作液；(3)样品硒含量测定将原子荧光光度计预热一段时间，待仪器稳定后，将步骤(2)配制好的硒标准工作液引入原子荧光光度计，测定硒标准工作溶液的荧光强度并绘制标准曲线，直到标准曲线线性相关系数良好后，将步骤(1)处理好的空白对照和样品引入原子荧光光度计并测定荧光强度，根据已知浓度的硒标准工作溶液测得的荧光强度求出样品溶液中的硒含量。2.如权利要求1所述的氢化物-原子荧光法测定中药材中硒含量的方法，其特征在于，步骤(1)中为保证有机质充分消解，低温消解后，再逐渐升温进入高温消解阶段，设置消解温度高时要适当缩短消解时间；为保证安全，高温消解温度不宜超过240℃，温度过高易蒸干、发生危险，测定结果也会偏小。3.如权利要求2所述的氢化物-原子荧光法测定中药材中硒含量的方法，其特征在于，步骤(1)样品处理的具体步骤为：准确称取0.1g-0.2g干燥中药材样品于消煮管，加入硝酸和高氯酸混合酸2mL-4mL，所述硝酸和高氯酸的体积比为4:1；将消煮管放于铝块自动消解炉中，进入低温消解：40℃-6...

【专利技术属性】
技术研发人员：胡跃高，高游慧，姜英，祁香雪，王小芬，
申请(专利权)人：中国农业大学，
类型：发明
国别省市：北京,11