一种检测鸭蛋壳色素的方法技术

本发明专利技术公开了一种检测鸭蛋壳色素的方法，包括以下步骤：S1、预处理：将鸭蛋壳去除蛋壳膜并清洗干燥后制成粉末状，称取鸭蛋壳粉末并加入混合酸化沉淀液漩涡振荡后，在避光环境下超声溶解8～12h，所述混合酸化沉淀液包括丙酮、浓盐酸和醋酸，所述丙酮、浓盐酸和醋酸的体积比为3：1:0.5～0.8；S2、标准曲线的绘制；S3、检测分析：将溶解后的蛋壳溶液离心后取上清液从波长300～760nm每间隔2nm测定一次吸光值，根据412nm处的吸光值推算原卟啉‑IV含量，根据680nm处的吸光值推算胆绿素的含量。与现有技术相比，本发明专利技术方案具有检测结果准确可靠等优点，在绿壳鸭蛋的选种育种中有良好的应用前景。

A Method for Detecting Duck Eggshell Pigment

The invention discloses a method for detecting duck eggshell pigments, which includes the following steps: S1, pretreatment: removing duck eggshell membrane and cleaning and drying, making duck eggshell powder, weighing duck eggshell powder and adding mixed acidification precipitate whirlpool oscillation, ultrasonic dissolving in dark environment for 8-12 hours, the mixed acidification precipitate includes acetone, concentrated hydrochloric acid and acetic acid, the acetone and the concentration. Volume ratio of hydrochloric acid to acetic acid is 3:1:0.5-0.8; S2, standard curve drawing; S3, detection and analysis: after centrifuging the dissolved eggshell solution, the supernatant was taken from the wavelength of 300-760 nm and the absorbance value was determined at 2 nm interval. The content of protoporphyrin IV was calculated according to the absorbance value at 412 nm, and the content of biliverdin was calculated according to the absorbance value at 680 nm. Compared with the prior art, the scheme of the invention has the advantages of accurate and reliable detection results, and has a good application prospect in the breeding and breeding of green shell duck eggs.

【技术实现步骤摘要】
一种检测鸭蛋壳色素的方法
本专利技术涉及家禽养殖
，具体涉及一种检测鸭蛋壳色素的方法。
技术介绍
鸭蛋壳品质对于禽蛋的运输、贮藏与加工具有重要意义，鸭蛋壳颜色的深浅直接影响到鸭蛋的销售，也间接地影响着蛋禽饲养者的经济效益。鸭蛋蛋壳色泽与蛋壳质量密切相关，青壳鸭蛋色彩鲜自然，且其蛋壳质量明显优于白壳蛋。在加工、运输、贮藏过程中，较好的蛋壳质量有利于减少因破损所造成的经济损失，青壳鸭蛋，由于蛋白质含量比白壳鸭蛋高4.23个百分点，除硒与赖氨酸含量略低于白壳蛋外，其他15种氨基酸和锌含量比白壳鸭蛋均有不同程度增加，又因青壳鸭蛋具有自然鲜艳的外观，深受消费者的喜爱，消费量与日俱增。蛋壳色素是复合色素，主要包括原卟啉-IV和胆绿素，其中，原卟啉-IV形成黄色、粉红色、淡黄色或褐色，而胆绿素引起蛋壳呈现蓝色和绿色，因此，鸭蛋壳的颜色取决于这三种色素的比例。因此，对鸭蛋壳中原卟啉-IV和胆绿素-IX的准确检测对于育种具有重要意义。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是：提供一种结果准确可靠的检测鸭蛋壳色素的方法。为了解决上述技术问题，本专利技术采用的技术方案为：一种检测鸭蛋壳色素的方法，包括以下步骤：S1、预处理：将鸭蛋壳去除蛋壳膜并清洗干燥后制成粉末状，称取鸭蛋壳粉末并加入混合酸化沉淀液漩涡振荡后，在避光环境下超声溶解8～12h，所述混合酸化沉淀液包括丙酮、浓盐酸和醋酸，所述丙酮、浓盐酸和醋酸的体积比为3：1:0.5～0.8；S2、标准曲线的绘制：称取原卟啉-IV0.36mg，胆绿素0.26mg，分别溶于6ml所述混合酸化沉淀液中，漩涡振荡，避光超声保存8～12h，分别制备成原卟啉标准品原液和胆绿素标准品原液，分别用混合酸化沉淀液对两种标准品原液逐步稀释成系列溶液，用紫外分光光度外从波长300～760nm每间隔2nm测定一次吸光值，根据412nm和680nm处的吸光值与对应的浓度，分别绘制出原卟啉-IV和胆绿素的标准工作曲线；S3、检测分析：将溶解后的蛋壳溶液离心后取上清液从波长300～760nm每间隔2nm测定一次吸光值，根据412nm处的吸光值推算原卟啉-IV含量，根据680nm处的吸光值推算胆绿素的含量。进一步地，所述干燥为自然干燥或热风干燥，优选地，所述热风干燥的温度为35～45℃。进一步地，所述步骤S1中，所述鸭蛋壳粉末与混合酸化沉淀液的质量体积比为0.15～0.4g:6ml。进一步地，所述步骤S1和S2中，超声功率和时间均一致且所述超声功率为750～900W。进一步地，所述步骤S2中，稀释的系列溶液的稀释倍数依次为2倍、4倍、8倍、16倍和32倍。进一步地，所述步骤S3中，离心速度为3000～4000r/min，时间为40～50min。进一步地，所述步骤S1中还包括对制成粉末状的鸭蛋壳进行过筛，所述过筛操作为过80目筛。进一步地，所述浓盐酸的中HCl的质量百分数为36～38％。进一步地，所述醋酸中CH3COOH的质量百分数为36～38％。本专利技术的有益效果在于：通过巧妙的设计有机酸与无机酸的配比，使得溶解过程中色素被更好的提取出来，采用本专利技术方案检测鸭蛋壳色素，测定结果准确可靠，更方法的稳定性更好，检测效率高，通过超声溶解，耗时更短，成本低廉，通过紫外分光光度计即可准确完成检测，无需昂贵精密检测设备，适用范围广。具体实施方式为详细说明本专利技术的
技术实现思路
、所实现目的及效果，以下结合实施方式予以说明。本专利技术的实施例为：一种检测鸭蛋壳色素的方法，包括以下步骤：S1、预处理：各取市售山麻鸭绿壳鸭蛋(蛋重65.82±0.32g，色泽基本一致)和飞鸭绿壳鸭蛋(蛋重69.63±0.94g，色泽基本一致)10枚，将鸭蛋壳去除蛋壳膜并清洗经自然干燥后制成粉末状过80目筛，称取鸭蛋壳粉末0.25g并加入6ml混合酸化沉淀液漩涡振荡后，在避光环境下800W下超声溶解8h，所述混合酸化沉淀液包括丙酮、浓盐酸和醋酸，所述丙酮、浓盐酸和醋酸的体积比为3：1:0.5；S2、标准曲线的绘制：称取原卟啉-IV0.36mg，胆绿素0.26mg，分别溶于6ml所述混合酸化沉淀液中，漩涡振荡，避光800W超声保存8h，分别制备成原卟啉标准品原液和胆绿素标准品原液，分别用混合酸化沉淀液对两种标准品原液逐步稀释成依次为2倍、4倍、8倍、16倍和32倍的系列溶液，用紫外分光光度外从波长300～760nm每间隔2nm测定一次吸光值，根据412nm和680nm处的吸光值与对应的浓度，分别绘制出原卟啉-IV和胆绿素的标准工作曲线；S3、检测分析：将溶解后的蛋壳溶液4000r/min离心40min后取上清液从波长300～760nm每间隔2nm测定一次吸光值，根据412nm处的吸光值推算原卟啉-IV含量，根据680nm处的吸光值推算胆绿素的含量。对比例一为：与实施例一的区别在于：对比例一所使用的混合酸化沉淀液包括丙酮和浓盐酸，所述丙酮和浓盐酸的体积比为3:1.5。对比例二为：与实施例一的区别在于：对比例一所使用的混合酸化沉淀液包括丙酮和浓盐酸，所述丙酮和浓盐酸的体积比为3:1.5且溶解时未超声。山麻鸭和飞鸭中色素的检测结果平均值分别表1和2所示：表1山麻鸭的鸭蛋壳色素检测结果表实施例对照例一对照例二原卟啉-IV(mg)12.4511.3810.25胆绿素(mg)3.552.952.53表2飞鸭的鸭蛋壳色素检测结果表实施例对照例一对照例二原卟啉-IV(mg)11.8211.249.83胆绿素(mg)2.732.122.03对比实施例与对照例一、二的检测结果可知，本专利技术方案可提取的色素含量更高，因此，本专利技术的前处理操作效果更好。计算实施例、对照例一和对照例二10个样本间的相对标准偏差(relativestandarddeviation，RSD)，山麻鸭和飞鸭的结果分别如下表2所示：表2山麻鸭和飞鸭的RSD值实施例对照例一对照例二山麻鸭(％)1.062.062.36飞鸭(％)1.552.122.69从表2可以看出，本专利技术方案对山麻鸭或飞鸭的检测相对标准偏差RSD均低于1.55％，表明本专利技术检测方法具有良好的重复性和较高的精密度。综上所述，本专利技术提供的一种检测鸭蛋壳色素的方法，该方法具有检测结果准确可靠等优点，在绿壳鸭蛋的选种育种中有良好的应用前景。以上所述仅为本专利技术的实施例，并非因此限制本专利技术的专利范围，凡是利用本专利技术说明书内容所作的等同变换，或直接或间接运用在相关的
，均同理包括在本专利技术的专利保护范围内。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种检测鸭蛋壳色素的方法，其特征在于：包括以下步骤：S1、预处理：将鸭蛋壳去除蛋壳膜并清洗干燥后制成粉末状，称取鸭蛋壳粉末并加入混合酸化沉淀液漩涡振荡后，在避光环境下超声溶解8～12h，所述混合酸化沉淀液包括丙酮、浓盐酸和醋酸，所述丙酮、浓盐酸和醋酸的体积比为3：1:0.5～0.8；S2、标准曲线的绘制：称取原卟啉‑IV 0.36mg，胆绿素0.26mg，分别溶于6ml所述混合酸化沉淀液中，漩涡振荡，避光超声保存8～12h，分别制备成原卟啉标准品原液和胆绿素标准品原液，分别用混合酸化沉淀液对两种标准品原液逐步稀释成系列溶液，用紫外分光光度外从波长300～760nm每间隔2nm测定一次吸光值，根据412nm和680nm处的吸光值与对应的浓度，分别绘制出原卟啉‑IV和胆绿素的标准工作曲线；S3、检测分析：将溶解后的蛋壳溶液离心后取上清液从波长300～760nm每间隔2nm测定一次吸光值，根据412nm处的吸光值推算原卟啉‑IV含量，根据680nm处的吸光值推算胆绿素的含量。

【技术特征摘要】
1.一种检测鸭蛋壳色素的方法，其特征在于：包括以下步骤：S1、预处理：将鸭蛋壳去除蛋壳膜并清洗干燥后制成粉末状，称取鸭蛋壳粉末并加入混合酸化沉淀液漩涡振荡后，在避光环境下超声溶解8～12h，所述混合酸化沉淀液包括丙酮、浓盐酸和醋酸，所述丙酮、浓盐酸和醋酸的体积比为3：1:0.5～0.8；S2、标准曲线的绘制：称取原卟啉-IV0.36mg，胆绿素0.26mg，分别溶于6ml所述混合酸化沉淀液中，漩涡振荡，避光超声保存8～12h，分别制备成原卟啉标准品原液和胆绿素标准品原液，分别用混合酸化沉淀液对两种标准品原液逐步稀释成系列溶液，用紫外分光光度外从波长300～760nm每间隔2nm测定一次吸光值，根据412nm和680nm处的吸光值与对应的浓度，分别绘制出原卟啉-IV和胆绿素的标准工作曲线；S3、检测分析：将溶解后的蛋壳溶液离心后取上清液从波长300～760nm每间隔2nm测定一次吸光值，根据412nm处的吸光值推算原卟啉-IV含量，根据680nm处的吸光值推算胆绿素的含量。2.根据权利要求1所述的检测鸭蛋壳色素的方法，其特征在于：所述干燥为自然干燥或热风干燥。3.根据权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：区炳庆，景栋林，黄得纯，李华，于辉，
申请(专利权)人：佛山科学技术学院，
类型：发明
国别省市：广东,44