一种用于宫颈癌早筛的诊断染色液及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种用于宫颈癌早筛的诊断染色液及其制备方法，由还原态亚甲基蓝体系和叶酸衍生物体系组成，使用前，将两者混合均匀即可,所述的还原态亚甲基蓝体系由下述重量百分比成份制成：0.5‑1.5%医用级亚甲基蓝、2‑5%pH调节剂、0.5‑6%还原剂和87‑97%去离子水；所述叶酸衍生物体系由下述重量百分比成份制成：1‑9%叶酸衍生物、2‑18%环糊精、0.1‑1%碱和去离子水72‑97%。本发明专利技术是一种相对简单、经济、较少依赖仪器、较为直观、肉眼直接观察结果的宫颈癌早筛检测手段，并且准确率高。

A diagnostic dye for early screening of cervical cancer and its preparation method

The invention discloses a diagnostic dye solution for early screening of cervical cancer and its preparation method, which consists of reduced methylene blue system and folic acid derivative system. Before use, the two systems can be mixed evenly. The reduced methylene blue system is made of the following weight percentage components: 0.5 1.5% Medical Grade Methylene blue, 2 5% pH regulator, 0.5 6% reductant and 87 97%. Ionic water; the folic acid derivative system is made of the following weight percentage components: 1 9% folic acid derivative, 2 18% cyclodextrin, 0.1 1% alkali and 72 97% deionized water. The invention is a relatively simple, economic, less instrument-dependent, more intuitive, naked eye direct observation of the results of early screening for cervical cancer detection means, and has high accuracy.

【技术实现步骤摘要】
一种用于宫颈癌早筛的诊断染色液及其制备方法
本专利技术涉及医药
，尤其涉及一种用于宫颈癌早筛的诊断染色液及其制备方法。
技术介绍
子宫颈癌是一种严重危害妇女健康的恶性肿瘤，宫颈癌被认为是人类唯一可明确病因的癌症，其病因主要由人乳头瘤病毒即HPV感染所致。研究发现，癌前病变有一个相当长的发展过程，将病变阻断于癌前病变，即可以减少宫颈癌的发病，降低宫颈癌的死亡率。所以宫颈癌是可以预防、治疗和治愈的，关键在于早诊断、早治疗，而筛查是预防和控制宫颈癌的重要手段。临床常用的筛查方法包括传统的涂片检测法、液基细胞学检测法即TCT，人乳头瘤病毒基因检测法等。TCT检查对于宫颈癌细胞的检出率高达100%，对于部分癌前病变也较易筛查出。但由于经济因素的限制，在经济不发达的地区，TCT检查难以全面推广，因此，找到一种操作简单和易于推广的诊断方式显得尤为重要。
技术实现思路
本专利技术是为了解决上述不足，提供了一种用于宫颈癌早筛的诊断染色液及其制备方法，是一种相对简单、经济、较少依赖仪器、较为直观、肉眼直接观察结果的宫颈癌早筛检测手段。本专利技术的上述目的通过以下的技术方案来实现：一种用于宫颈癌早筛的诊断染色液，由还原态亚甲基蓝体系和叶酸衍生物体系组成，使用前，将两者混合均匀即可,所述的还原态亚甲基蓝体系由下述重量百分比成份制成：0.5-1.5%医用级亚甲基蓝、2-5%pH调节剂、0.5-6%还原剂和87-97%去离子水；所述叶酸衍生物体系由下述重量百分比成份制成：1-9%叶酸衍生物、2-18%环糊精、0.1-1%碱和去离子水72-97%。临床研究证实，细胞间变时，叶酸受体在细胞表面有高表达，而在正常细胞组织中无表达或少表达。亚甲基蓝还原态时为无色，氧化态时显蓝色。将还原态亚甲基蓝与叶酸衍生物混合制成复合物，用于宫颈癌检测。若宫颈有癌细胞存在，则叶酸衍生物就会与之结合，同时将还原态亚甲基蓝经细胞内吞进入胞质，肿瘤细胞内的活性氧会将还原态亚甲基蓝氧化为蓝色氧化态。在生物大分子的不断进入使得细胞内的渗透压也随之增高，氧化态亚甲蓝随之被挤出细胞外，并在棉签上呈现出颜色。进一步的：所述的还原剂为维生素C和/或锌粉。所述的pH调节剂为乙酸、乳酸或柠檬酸。所述的叶酸衍生物为叶酸钠、叶酸钾、叶酸钙、四氢叶酸和/或亚叶酸钙。所述的环糊精为α、β、γ-环糊精。所述的碱为氢氧化钠、碳酸钠、碳酸氢钠、乙酸钠、碳酸钾和/或氢氧化钾。该用于宫颈癌早筛的诊断染色液的制备方法为：将亚甲基蓝按照上述的比例加到去离子水中，搅拌待溶解完全之后，加入还原剂，搅拌至变成无色溶液，加入pH调节剂，用深棕色瓶密封保存；将叶酸衍生物加入到去离子水中，搅拌至完全溶解，加入环糊精，搅拌至完全溶解，加入碱，用深棕色瓶密封保存；使用时将两组分混合均匀之后就可以进行染色检测。进一步地，两组分染色液混合均匀之后涂抹在一载体上使用，所述的载体为脱脂棉签、微囊、纤维膜或滤纸。本专利技术所涉及的一种用于宫颈癌早筛的诊断染色液及其制备方法，对叶酸进行改性制成水溶性好的叶酸衍生物，增加叶酸衍生物亚甲基蓝复合物的浓度，从而更迅速的与叶酸受体结合，使亚甲基蓝更准确的显色，提高检测得准确性；同时将还原态亚甲基蓝组分和叶酸衍生物组分分开储存，使用的时候再混和生成叶酸衍生物亚甲基蓝复合物，提高了染色液储存的稳定性。具体实施方式下面结合实施例对本专利技术进一步详述。实施例1将亚甲基蓝溶于去离子水中，搅拌均匀之后加入还原剂维生素C，搅拌至无色之后，加入分析纯乙酸，搅拌混匀，用深棕色瓶密封保存。将叶酸钠溶于去离子水中，加入β-环糊精搅拌均匀，加入氢氧化钠，用深棕色瓶密封保存。上述各成份的重量百分含量按照表1中的实施例1数据进行配比。将两瓶组分混合均匀之后用大脱脂棉签蘸取，均匀涂抹于组织或细胞表面，观察脱脂棉签颜色以及组织、细胞颜色的变化，根据颜色的变化决定所测试的组织细胞区域或细胞是否存在病变。结合了还原态亚甲基蓝的叶酸衍生物与癌细胞的叶酸受体结合，进入癌细胞，亚甲基蓝被癌细胞中的活性氧氧化，亚甲基蓝变成蓝色，溢出细胞，从而检测出癌细胞。正常宫颈细胞表面几乎没有叶酸受体表达，因此不会与叶酸衍生物结合，因此还原态亚甲基蓝不会变色。实施例2将亚甲基蓝溶于去离子水中，搅拌均匀之后加入还原剂锌粉，搅拌至无色之后，加入分析纯乙酸，搅拌混匀。将叶酸钠溶于去离子水中，加入β-环糊精搅拌均匀，加入氢氧化钠。将两组分混合均匀之后用大棉签蘸取，均匀涂抹于组织或细胞表面，观察棉签颜色以及组织、细胞颜色的变化。上述各成份的重量百分含量按照表1中的实施例2数据进行配比。实施例3按照表1中实施例3的数据配比各成份的重量百分含量重复实施例1的方法，制成染色液组合物。将两组分混合均匀之后用大棉签蘸取，均匀涂抹于组织或细胞表面，观察棉签颜色以及组织、细胞颜色的变化。实施例4按照表1中实施例4的数据配比各成份的重量百分含量重复实施例1的方法，叶酸衍生物为亚叶酸钙，制成染色液组合物。将两组分混合均匀之后用大棉签蘸取，均匀涂抹于组织或细胞表面，观察棉签颜色以及组织、细胞颜色的变化。实施例5按照表1中实施例5的数据配比各成份的重量百分含量重复实施例2的方法，使用叶酸钠作为叶酸衍生物，制成染色液组合物。将两组分混合均匀之后用大棉签蘸取，均匀涂抹于组织或细胞表面，观察棉签颜色以及组织、细胞颜色的变化。实施例6按按照表1中实施例6的数据配比各成份的重量百分含量重复实施例2的方法，使用亚叶酸钙作为叶酸衍生物，制成染色液组合物。将两组分混合均匀之后用大棉签蘸取，均匀涂抹于组织或细胞表面，观察棉签颜色以及组织、细胞颜色的变化。表1本专利技术中，用灵敏度说明染色液对宫颈癌组织细胞染色，灵敏度越高，发现异常细胞的能力越强；用特异度说明染色液的准确性，特异度越高，表明染色的异常细胞与病理学检测结果符合率高。灵敏度和特异度计算：灵敏度=真阳性人数/(真阳性人数+假阴性人数)*100%特异度=真阴性人数/(真阴性人数+假阳性人数)*100%。以上所述仅为本专利技术的实施例，并非因此限制本专利技术的专利范围，凡是利用本专利技术说明书及实施例内容所作的等效结构或等效流程变换，或直接或间接运用在其他相关的
，均同理包括在本专利技术的专利保护范围内。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于宫颈癌早筛的诊断染色液，其特征在于:由还原态亚甲基蓝体系和叶酸衍生物体系组成，使用前，将两者混合均匀即可,所述的还原态亚甲基蓝体系由下述重量百分比成份制成：0.5‑1.5%医用级亚甲基蓝、2‑5%pH调节剂、0.5‑6%还原剂和87‑97%去离子水；所述叶酸衍生物体系由下述重量百分比成份制成：1‑9%叶酸衍生物、2‑18%环糊精、0.1‑1%碱和去离子水72‑97%。

【技术特征摘要】
1.一种用于宫颈癌早筛的诊断染色液，其特征在于:由还原态亚甲基蓝体系和叶酸衍生物体系组成，使用前，将两者混合均匀即可,所述的还原态亚甲基蓝体系由下述重量百分比成份制成：0.5-1.5%医用级亚甲基蓝、2-5%pH调节剂、0.5-6%还原剂和87-97%去离子水；所述叶酸衍生物体系由下述重量百分比成份制成：1-9%叶酸衍生物、2-18%环糊精、0.1-1%碱和去离子水72-97%。2.按照权利要求1所述的一种用于宫颈癌早筛的诊断染色液，其特征在于:所述的还原剂为维生素C和/或锌粉。3.按照权利要求1所述的一种用于宫颈癌早筛的诊断染色液，其特征在于:所述的pH调节剂为乙酸、乳酸或柠檬酸。4.按照权利要求1所述的一种用于宫颈癌早筛的诊断染色液，其特征在于：所述的叶酸衍生物为叶酸钠、叶酸钾、叶酸钙、四氢叶酸和/或亚叶酸钙。5.按照权利要求1所述的一...

【专利技术属性】
技术研发人员：何海肖，杨维，罗海浪，徐丽君，
申请(专利权)人：杭州元研细胞生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江,33