本发明专利技术提供了一株唾液乳杆菌ZM06及其在下调变形链球菌生物膜形成的基因表达中的应用，属于微生物技术领域。本发明专利技术所述唾液乳杆菌ZM06，保藏编号为CGMCC NO.13978。本发明专利技术所述唾液乳杆菌ZM06，可在浓度0.2mg/mL至1mg/mL的溶菌酶溶液中正常生长，因而完全能够耐受口腔高溶菌酶浓度。本发明专利技术所述唾液乳杆菌对溶菌酶有很好的耐受性、适应口腔环境，不以杀死变形链球菌为目的，而是通过降低变形链球菌中与生物膜形成的相关基因表达水平，特异性地抑制变形链球菌生物膜的形成，以降低龋齿发生和发展风险。
【技术实现步骤摘要】
一株唾液乳杆菌及在下调变形链球菌生物膜形成的基因表达中的应用
本专利技术属于微生物
，具体涉及一株唾液乳杆菌及在下调变形链球菌生物膜形成的基因表达中的应用。
技术介绍
龋齿是世界流行的慢性疾病，该疾病由菌斑生物膜在牙齿表面堆积起始，表现为牙齿硬组织损伤甚至牙齿脱落。牙菌斑生物膜由大量细菌、蛋白质、胞外多糖、少量白细胞、脱落上皮细胞和食物残屑堆积形成，具有特殊的空间结构，其存在大大阻碍了菌斑内外的物质交换，菌斑内不能得到唾液的缓冲，使牙齿表面pH值迅速下降；复杂空间结构的生物膜还使其内部细菌与细菌之间的信息交流更加便捷，增强了牙菌斑内菌株对抗生素治疗的耐受性，同时还保护生物膜内的细菌免受宿主免疫系统的攻击。变形链球菌被认为是最重要的致龋菌，主要依赖于生物膜状态生存，具有强大的产酸和耐酸能力，成型的生物膜为其生存提供了保护性的环境，导致药物治疗效果不好。变形链球菌生物膜的形成大致分为两个过程：由表面结合蛋白介导的蔗糖依赖的起始粘附和由葡萄糖基转移酶将蔗糖合成葡聚糖。粘附是形成生物膜的先决条件，变形链球菌或其聚集体借助两种独立的机制粘附于牙齿硬组织：蔗糖依赖性粘附和非蔗糖依赖性粘附。研究还发现，细菌的许多生物学功能如耐酸、生物膜形成、感受态形成等通过一种称为群体感应的机制得到调节。群体感应是细菌间的一种交流方式，当细菌分泌的信号分子达到一定阈值时，受体菌接受信号并在胞内进行一系列的反应，起始或抑制相关基因的表达。尽管初步研究认为，益生菌对口腔健康有益，但并不是所有的益生菌都具有口腔保健功能，大多具有菌株特异性。前期发现有些菌种，如鼠李糖乳杆菌、唾液链球菌等可杀灭口腔致病菌，但由于其杀菌作用特异性不强，长期服用产生耐药性风险增加，目前并没有一种不以杀菌为目的的防治龋齿的药物。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一株唾液乳杆菌(Lactobacillussalivarius)ZM06，显著降低变形链球菌中与生物膜形成的相关基因表达水平，特异性地抑制变形链球菌生物膜的形成。为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：本专利技术提供了一株唾液乳杆菌(Lactobacillussalivarius)ZM06，保藏编号为CGMCCNO.13978。本专利技术还提供了上述唾液乳杆菌(Lactobacillussalivarius)ZM06在下调变形链球菌生物膜形成的基因表达中的应用。优选的，所述变形链球菌生物膜形成的基因包括：参与变形链球菌生物膜形成直接相关基因和参与调控变形链球菌调控生物膜形成信号通路的基因。优选的，所述变形链球菌生物膜形成直接相关基因包括：葡糖糖基转移酶基因gtfB，葡糖糖基转移酶基因gtfC，果糖基转移酶基因ftf，编码葡聚糖结合蛋白的基因gbpB和编码葡聚糖结合蛋白的基因gbpC。优选的，所述变形链球菌调控生物膜形成信号通路包括：两组分信号转导系统TCS和AI-2信号分子介导的种间信号转导系统。优选的，所述两组分信号转导系统TCS中基因包括：TCS-1中VicR/VicK基因，TCS-2中CiaR/CiaH基因，TCS-11中HK11/RR11基因和TCS-13中ComD/ComE基因。优选的，所述AI-2信号分子介导的种间信号转导系统中基因为luxS基因。优选的，所述唾液乳杆菌的应用包括：作为龋齿的预防、控制或治疗产品的有效成分。优选的，所述唾液乳杆菌作为有效成分时的活菌浓度为106-109CFU/mL或106-109CFU/g。本专利技术提供了一株唾液乳杆菌(Lactobacillussalivarius)ZM06及其在制备调节变形链球菌生物膜形成的基因表达的调节剂中的应用，本专利技术所述唾液乳杆菌ZM06，可在浓度0.2mg/mL至1mg/mL的溶菌酶溶液中正常生长，因而完全能够耐受口腔高溶菌酶浓度。本专利技术所述唾液乳杆菌对溶菌酶有很好的耐受性、适应口腔环境，不以杀死变形链球菌为目的，而是通过降低变形链球菌中与生物膜形成的相关基因表达水平，特异性地抑制变形链球菌生物膜的形成，以降低龋齿发生和发展风险。菌种保藏信息唾液乳杆菌(Lactobacillussalivarius)，菌株编号为ZM06，保藏编号为CGMCCNO.13978。所述唾液乳杆菌(Lactobacillussalivarius)的保藏单位为中国普通微生物菌种保藏管理中心(CGMCC)，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏时间为2017年04月05日。附图说明图1为非接触共培养益生菌和变形链球菌的方法；图2为变形链球菌生物膜形成观察图；图3为变形链球菌生物膜形成电镜图。具体实施方式本专利技术提供了一株唾液乳杆菌(Lactobacillussalivarius)ZM06，保藏编号为CGMCCNO.13978。本专利技术所述唾液乳杆菌ZM06的保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏时间为2017年04月05日。本专利技术还提供了上述唾液乳杆菌ZM06在下调变形链球菌生物膜形成的基因表达中的应用。在本专利技术的所述应用中，所述变形链球菌生物膜形成的基因优选包括：变形链球菌生物膜形成直接相关基因和参与变形链球菌调控生物膜形成信号通路的基因。本专利技术所述变形链球菌生物膜形成直接相关基因优选包括：葡糖糖基转移酶基因gtfB，葡糖糖基转移酶基因gtfC，果糖基转移酶基因ftf，编码葡聚糖结合蛋白的基因gbpB和编码葡聚糖结合蛋白的基因gbpC。本专利技术所述变形链球菌调控生物膜形成信号通路优选包括：两组分信号转导系统TCS和AI-2信号分子介导的种间信号转导系统。本专利技术所述两组分信号转导系统TCS中基因优选包括：TCS-1中VicR/VicK基因，TCS-2中CiaR/CiaH基因，TCS-11中HK11/RR11基因和TCS-13中ComD/ComE基因。本专利技术所述AI-2信号分子介导的种间信号转导系统中基因优选为luxS基因。本专利技术所述应用包括：作为龋齿的预防、控制或治疗产品的有效成分，当所述产品为液体时，作为有效成分时的活菌浓度为106-109CFU/mL；当所述产品为固体时，作为有效成分时的活菌浓度为106-109CFU/g。本专利技术对所述调节剂的剂型并没有特殊限定，利用本领域的常规剂型即可。下面结合实施例对本专利技术提供的唾液乳杆菌(Lactobacillussalivarius)ZM06及其应用进行详细的说明，但是不能把它们理解为对本专利技术保护范围的限定。实施例1唾液乳杆菌ZM06直接自健康人口腔样本中分离获得，是革兰氏染色阳性杆菌，不生成芽孢，在好氧及厌氧环境均能生长。收集MRS培养对数期的菌体，采用DNA提取试剂盒提取DNA，进行16SrRNA基因测序，其序列如SEQIDNO.31所示，将该序列与GenBank数据库比对，可鉴定为唾液乳杆菌(Lactobacillussalivarius)。以实施例1分离得到的唾液乳杆菌ZM06进行试验：1、糖代谢试验在MRS固体培养基上对唾液乳杆菌ZM06进行37℃培养24h后，刮取平板上的单个菌落，使用API50CH生化鉴定剂盒进行生化反应检测，结果如表1所示：表1.唾液乳杆菌ZM06糖代谢谱注：“+”表示阳性，“-”表示阴性结果表明其属于乳杆菌属、唾本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一株唾液乳杆菌(Lactobacillus salivarius)ZM06，保藏编号为CGMCC NO.13978。
【技术特征摘要】
1.一株唾液乳杆菌(Lactobacillussalivarius)ZM06，保藏编号为CGMCCNO.13978。2.权利要求1所述唾液乳杆菌(Lactobacillussalivarius)ZM06在下调变形链球菌生物膜形成的基因表达中的应用。3.根据权利要求2所述应用，其特征在于，所述变形链球菌生物膜形成的基因包括：参与变形链球菌生物膜形成直接相关基因和参与调控变形链球菌生物膜形成的信号通路中的基因。4.根据权利要求3所述应用，其特征在于，所述变形链球菌生物膜形成直接相关基因包括：葡糖糖基转移酶基因gtfB，葡糖糖基转移酶基因gtfC，果糖基转移酶基因ftf，编码葡聚糖结合蛋白的基因gbpB和编码葡聚糖结合蛋白的基因gbpC。5.根据权利要求3所述应用，其特征在于，所述参...
【专利技术属性】
技术研发人员：不公告发明人，
申请(专利权)人：嘉兴益诺康生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江,33
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