本发明专利技术涉及一株自主筛选的具有调节血糖和胆固醇水平等益生功能的嗜酸乳杆菌（Lactobacillus acidophilus SJLH001，简称La‑SJLH001）及其在益生菌食品中的应用。该菌株具有良好的胃肠道环境耐受能力，并具有抗氧化性、疏水性、超声波抗性、还原力等体外益生活性。体外、体内功能验证实验表明，La‑SJLH001具有显著的淀粉酶抑制活性和α‑葡萄糖甘酶抑制活性等，并能显著降低小鼠空腹血糖、餐后血糖水平，增强机体对葡萄糖的耐受能力，缓解胰岛变大，同时还具有降低血清总胆固醇水平、增强小肠黏膜保护作用等功能。La‑SJLH001显著的降血糖和降胆固醇活性使其在多种形式的益生食品（如益生菌压片糖果、益生菌固体饮料等）中具有广泛的应用价值。
【技术实现步骤摘要】
一株具有调节血糖和胆固醇水平等益生功能的嗜酸乳杆菌La-SJLH001及其应用
本专利技术属于微生物工程领域，涉及一种具有调节血糖和胆固醇水平等益生功能的嗜酸乳杆菌La-SJLH001的分离、鉴定、活性检测、功能验证、菌粉制备及其在益生菌压片糖果和益生菌固体饮料中的应用。
技术介绍
随着人们生活水平的日益提高，生活方式发生改变，膳食中高脂肪、高蛋白过量摄入，其引发的心脑血管疾病、肥胖等问题日益严重，成为威胁人们健康的主要因素之一。益生菌是用于提高人、动物和植物健康水平的活的微生物及其代谢产物，是改善宿主肠道微生物菌群平衡的核心功能因子。研究表明，益生菌具有调节肠道菌群平衡、预防和缓解多种慢性疾病的功能。目前益生菌主要包括乳酸菌、芽孢杆菌和酵母菌等三大类，其中乳酸菌包括嗜酸乳杆菌、双歧杆菌等，在食品行业中应用最为广泛。乳酸菌是一类能利用碳水化合物产生乳酸的非病原性、革兰氏阳性细菌的总称，包括乳杆菌、乳球菌和双歧杆菌等20多个属。大量研究表明，乳酸菌作为益生菌，在维持肠道微生态平衡、增强机体免疫机能、降低血清胆固醇、预防和抑制肿瘤发生等方面发挥着重要的作用，是维持机体健康必不可少的生理菌群之一，已广泛地应用于医药、食品和饲料等行业。当前市场上乳酸菌相关制品种类多样，包括酸奶、乳酸饮料、单复合菌食品、保健品等，但大部分产品菌株均依赖进口，且存在乳酸菌制品活菌数不稳定、功能模糊、产品保质期短等问题。因此，拓展菌株的来源，选育具有优良发酵特性、活菌数高、安全性能好、具有一定益生功能的乳酸菌菌株并开发益生菌食品，将带来巨大的经济效益、社会效益和生态效益。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种自主筛选的微生物菌株——嗜酸乳杆菌La-SJLH001的分离、鉴定、功能验证、菌粉的制备方法及其在益生菌压片糖果和益生菌固体饮料制备中的应用。本专利技术涉及一株自主筛选的嗜酸乳杆菌菌株（LactobacillusacidophilusSJLH001），是从中国传统发酵食品东北酸菜中分离筛选的，其保藏名称为“嗜酸乳杆菌SJLH001”；保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心CGMCC；保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号；保藏日期：2018年4月20日；保藏编号：CGMCCNO.15634。本专利技术所述的嗜酸乳杆菌菌株，单菌落接种到MRS固体培养基上，37ºC厌氧生长良好，菌落呈圆形，直径大小0.5mm-2.0mm，较光滑，乳白色；革兰氏染色呈阳性，菌体较平直或稍弯，两端钝圆，成单或双存在，无芽孢；菌株在高胆盐培养基上表现出胆盐水解酶活性；经16SrDNA序列鉴定，La-SJLH001为嗜酸乳杆菌。本专利技术所述嗜酸乳杆菌，具有良好的胃肠道耐受性，在胃酸和肠道高胆盐环境中存活率高，同时具有较强的抗氧化性、疏水性、超声波抗性及还原力等优良特性；具有较好的体外α-葡萄糖甘酶抑制活性和淀粉酶抑制活性，具备应用于体内调节血糖水平的潜能；经小鼠体内功能实验验证，能显著降低空腹血糖、餐后90min和120min血糖水平，增强机体对葡萄糖的耐受能力，缓解胰岛变大，同时还具有降低血清总胆固醇水平、增强小肠黏膜保护作用等体内益生功能。本专利技术所述的嗜酸乳杆菌菌粉是由嗜酸乳杆菌La-SJLH001的发酵产物经冷冻干燥制备而成，该菌粉具有超高细胞浓度，菌落形成单位大于1×1011CFU/g。上述应用所述嗜酸乳杆菌制备嗜酸乳杆菌菌粉经过如下步骤：无菌条件下，将嗜酸乳杆菌La-SJLH001在MRS平板上进行划线分离，接种至培养基中37ºC厌氧培养16h后得高浓度细胞培养液。培养液离心后与脱脂乳按一定比例混合均匀，经冷冻干燥制成嗜酸乳杆菌菌粉。本专利技术提供一种益生菌压片糖果的制备方法，是将上述嗜酸乳杆菌菌粉混合脱脂奶粉、天然果粉、乳糖、甘露醇、微晶纤维素和硬脂酸镁等中的一种或几种为原料，经粉碎、过筛、称量配料、总混、压片、包装等工艺制成益生菌压片糖果。本专利技术提供一种益生菌固体饮料的制备方法，是将上述嗜酸乳杆菌混合天然果粉、麦芽糖醇、抗性糊精和食用香精等中的一种或几种为原料，经称量配料、混合、包装等工艺制成。所述嗜酸乳杆菌菌株、嗜酸乳杆菌菌粉的制备方法、益生菌压片糖果的制备方法和益生菌固体饮料的制备方法均属于本专利技术的保护范围。本专利技术提供的嗜酸乳杆菌具备益生菌的优良特性，具有体内外调节血糖的功能活性，可增强机体对葡萄糖的耐受能力，同时还能降低血清总胆固醇水平、增强小肠黏膜保护作用。本专利技术所述嗜酸乳杆菌能够采用上述发酵培养方法获得超高细胞浓度菌粉，菌落形成单位大于1×1011CUF/g。本专利技术提供的嗜酸乳杆菌菌粉可用于制备益生菌压片糖果和益生菌固体饮料，食用口感好。附图说明本专利技术有如下附图：图1嗜酸乳杆菌La-SJLH001在MRS平板上的菌落形态图。图2嗜酸乳杆菌La-SJLH001革兰氏染色图。图3嗜酸乳杆菌La-SJLH001胆盐水解酶活性检测图。CK：空白对照组（ControlCheck）；LA：嗜酸乳杆菌La-SJLH001（LactobacillusacidophilusSJLH001）。滤纸片周围出现白色沉淀圈说明具有胆盐水解酶活性。图4嗜酸乳杆菌La-SJLH001体外耐酸性（pH=3.0）测定图。图5嗜酸乳杆菌La-SJLH001体外耐肠液（pH=6.8）测定图。图6嗜酸乳杆菌La-SJLH001体外耐胆盐（胆盐浓度0.3%-1%）测定图。图7嗜酸乳杆菌La-SJLH001体外抗氧化活性测定图。图8嗜酸乳杆菌La-SJLH001疏水性测定图。图9嗜酸乳杆菌La-SJLH001超声波抗性测定图。图10嗜酸乳杆菌La-SJLH001还原力测定图。图11嗜酸乳杆菌La-SJLH001淀粉酶抑制活性测定图。图12嗜酸乳杆菌La-SJLH001α-葡萄糖甘酶抑制活性测定图。图13嗜酸乳杆菌La-SJLH001体内降胆固醇测定图。HF:高脂组（Highfatdiet），LA:嗜酸乳杆菌灌胃组（LactobacillusacidophilusSJLH001），NC:普通膳食组（Normalcontroldiet）。图14嗜酸乳杆菌La-SJLH001体内降血糖测定图。A：口服葡萄糖耐受测定图，*P<0.05;**P<0.01;***P<0.001；B：曲线下面积图（AUC）。图15小鼠胰腺组织切片图。A：高脂组小鼠胰腺组织；B：嗜酸乳杆菌灌胃组小鼠胰腺组织。箭头处指示的是小鼠胰腺组织中的胰岛部分，和HF组相比，LA组胰岛变大现象得到显著缓解。图16小鼠小肠组织切片图。A：高脂组小鼠小肠组织；B：嗜酸乳杆菌灌胃组小鼠小肠组织。箭头处指示的是小鼠小肠组织中的肠腔部分，LA组肠腔内容物明显增加，增强了小肠黏膜保护作用。具体实施方式下面结合附图1-16和具体实施例对本专利技术作进一步说明，但本专利技术并不限于以下实施例。下述实施例中，如无特殊说明，按照本领域内的文献所描述的常规实验步骤操作或条件即可进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规试剂产品。实施例1：产胆盐水解酶菌株的筛选、鉴定及保藏1、样品采集：采集多种我国传统发酵食品（酸菜、豆豉、腐乳等），冷藏保存。2、菌株的分离纯化：将采集的样品1g加本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一株嗜酸乳杆菌菌株，其特征在于：所述嗜酸乳杆菌（Lactobacillus acidophilus SJLH001，简称La‑SJLH001）是从中国传统发酵食品东北酸菜中分离的耐酸和耐胆盐的益生菌；该菌株保藏名称为“嗜酸乳杆菌SJLH001”；保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心CGMCC；保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号；保藏日期：2018年4月20日；保藏编号：CGMCC NO. 15634。
【技术特征摘要】
1.一株嗜酸乳杆菌菌株，其特征在于：所述嗜酸乳杆菌（LactobacillusacidophilusSJLH001，简称La-SJLH001）是从中国传统发酵食品东北酸菜中分离的耐酸和耐胆盐的益生菌；该菌株保藏名称为“嗜酸乳杆菌SJLH001”；保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心CGMCC；保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号；保藏日期：2018年4月20日；保藏编号：CGMCCNO.15634。2.如权利要求1所述的嗜酸乳杆菌La-SJLH001菌株，其特征在于：所述嗜酸乳杆菌菌株的单菌落接种到MRS固体培养基上37ºC厌氧生长良好，菌落呈圆形，直径大小0.5mm-2.0mm，较光滑，乳白色；革兰氏染色呈阳性，菌体较平直或稍弯，两端钝圆，成单或双存在，无芽孢；La-SJLH001菌株在高胆盐培养基上表现出胆盐水解酶活性；经16SrDNA序列鉴定，La-SJLH001为嗜酸乳杆菌。3.如权利要求1和2所述的嗜酸乳杆菌La-SJLH001，其特征在于：所述嗜酸乳杆菌具有良好的胃肠道耐受性，在胃酸和肠道高胆盐环境中存活率高；所述菌株具有较强的抗氧化性、疏水性、超声波抗性及还原力等优良生物活性；所述菌株具有较好的体外α-葡萄糖甘酶抑制活性和淀粉酶抑制活性，具备应用于体内调节血糖水平的潜能。4.如权利要求1-3所述的嗜酸乳杆菌La-SJLH001，其特征在于：所述嗜酸乳杆菌经小鼠体内功能实验验证，能显著降低空腹血糖、餐后9...
【专利技术属性】
技术研发人员：万向元，孙倩，张勇，刘欣洁，李金萍，
申请(专利权)人：北京首佳利华科技有限公司，北京科技大学，
类型：发明
国别省市：北京,11
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。