本发明专利技术属于微生物发酵技术领域，具体涉及一种产巴弗洛霉素A1的灰棕褐链霉菌，并进一步公开其发酵生产巴弗洛霉素A1的应用。本发明专利技术通过菌种筛选及诱变育种筛选得到一株高产bafliomycins化合物的灰棕褐链霉菌，该菌株能够有效提高发酵液中bafliomycin A1化合物的效价，在发酵实验中，灰棕褐链霉菌FIM‑Ba150115发酵产bafliomycin A1的效价高达615.87mg/L左右，极大地有利于bafliomycin A1的提取纯化工作，可以满足工业化需求。
【技术实现步骤摘要】
一种灰棕褐链霉菌及其发酵生产巴弗洛霉素A1的应用
本专利技术属于微生物发酵
，具体涉及一种产巴弗洛霉素A1的灰棕褐链霉菌，并进一步公开其发酵生产巴弗洛霉素A1的应用。
技术介绍
Bafliomycins是一类由放线菌发酵产生的含有16元环骨架的多烯大环内脂类抗生素，化学结构上极为特殊，大部分此类化合物侧链结构中都含有一个六元环的半缩醛结构。已报道的bafilomycins化合物有bafilomycinA1，A2，B1，B2，C1，C2，D，E，F，K和L等。Bafilomycins具有抗细菌、抗真菌、杀虫、抗肿瘤和免疫抑制等多种生物活性，还可用于治疗骨质疏松、耳聋等。且已有研究表明，Bafilomycins系列化合物，特别是bafilomycinA1具有特异性的自噬抑制作用和较好的抗瘤作用，可作为抗肿瘤先导化合物研究，用于创制衍生新的抗肿瘤药物；而且BafilomycinA1具有特异性的杀伤儿童急性B淋巴细胞白血病细胞的新作用，可为制备治疗白血病新药物提供新的配方。bafilomycinA1是一种空泡H+-ATP酶(vacuolar-typeH+-ATPase，V-ATPase)的特异性抑制剂，在极低的nmol/L水平即可对V-ATPase具有较强的抑制作用。V-ATPase广泛分布于真核生物的液泡、反式高尔基体、溶酶体、核内体、分泌颗粒等细胞内膜系统中，并根据细胞器官的微小酸性差别，各自发挥独立机能，是一种新的药物靶点。ViolettaN等于2010年的研究发现，低剂量的bafilomycinA1可在一定程度上维持正常的自噬过程，这使应用bafilomycinA1治疗帕金森综合症等神经退行性疾病成为可能。2013年HansPeter等报道bafilomycinA1可以作为抗体药物(antibody-drugconjugate，ADC)用于治疗肿瘤。2015年YUANN等报道bafilomycinA1在低浓度下(1nM)通过抑制细胞自噬和促进细胞凋亡两种途径抑制并且杀死急性B淋巴细胞白血病细胞。可见bafilomycins具有很强的应用潜力。然而，目前己报道的bafilomycins系列化合物的生产，多数以微生物发酵法获得，但整体的发酵产量却并不是很高。1984年GerherdWerner等从10L灰色链霉菌发酵液中分离得到bafilomycinA145mg、bafilomycinA236mg、bafilomycinB192mg、bafilomycinB241mg、bafilomycinC1120mg、bafilomycinC224mg，整体的发酵效价极低；2010年GavinCarr等报道，从海洋放线菌Streptomycessp.RJA71和RJA635中分离得到了8个bafilomycins化合物，其中bafilomycinF-J等5个为新结构化合物，其它3个为bafilomycinA1、B1、D；2011年Yu等从菌株YIM56209的9.6L发酵产物分离得到bafilomycinA19.8mg；2011年魏刚等从海洋放线菌Y12-26的发酵液中分离得到了3个大环内酯类活性化合物bafilomycinD(14.7mg)、bafilomycinA1(15.8mg)、bafilomyeinK(9.6mg)；2012年潘华奇等的专利CN103829351B报道卡伍尔链霉菌(Streptomycescavourensis)经发酵产生的bafilomycinB1和bafilomycinC1，含量分别达23.45mg/L和6.603mg/L；2013年杨巍民等从海洋放线菌Y-0117的40L发酵液经分离纯化得到BafilomycinD纯品约14.7mg。以上这些已公开的报道bafilomycins系列化合物的微生物发酵生产方法，普遍存在的问题即是产量都比较低，不足以达到工业化水平。而造成这一问题的一个主要即是现有发酵菌株的发酵活力和稳定性较差，可见，筛选出发酵活力强的菌株对于bafilomycins系列化合物的发酵生产具有重要的意义。
技术实现思路
为此，本专利技术所要解决的技术问题在于提供一种产bafilomycinA1的灰棕褐链霉菌，以解决现有技术中bafilomycinA1化合物发酵效价低的问题；本专利技术要解决的第二个技术问题在于提供所述灰棕褐链霉菌发酵生产bafilomycinA1的应用。为解决上述技术问题，本专利技术所述的一种灰棕褐链霉菌，其分类命名为StreptomycesgriseobrunneusFIM-Ba150115，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC)，保藏单位地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏编号为CGMCCNo.15241，保藏日期为2018年1月18日。所述菌株为bafliomycinsA1化合物高产菌株。本专利技术还公开了所述的灰棕褐链霉菌在发酵生产bafliomycins化合物中的应用。所述bafliomycins化合物为bafliomycinsA1。所述的灰棕褐链霉菌在发酵生产bafliomycins化合物中的应用，即将所述的灰棕褐链霉菌接种于适宜发酵培养基中进行发酵培养。所述发酵培养基包括如下质量含量的组分：可溶性淀粉3.0-4.0％、蛋白胨1.5-3％、酵母粉1-2％、玉米浆干粉0.5-1.5％、碳酸钙0.2-0.3％，调pH值7.0-7.5。所述发酵培养基还包括0.025-0.3％的前体物，所述前体物包括异丁醇、异丁酸、醋酸铵、异亮氨酸、亮氨酸和/或缬氨酸。所述发酵培养的条件包括：控制转速200-400rpm，通气量0.08-1.2vvm，于25-30℃进行发酵培养。所述的灰棕褐链霉菌在发酵生产bafliomycins化合物中的应用，还包括将所述的灰棕褐链霉菌接种于种子培养基中进行种子液培养，所述种子培养基包括如下质量含量的组分：可溶性淀粉2.0％、蛋白胨2.0％、酵母粉1.0％、碳酸钙0.2％，调pH值7.2。所述的灰棕褐链霉菌在发酵生产bafliomycins化合物中的应用，还包括将所述的灰棕褐链霉菌接种于ISP2斜面培养基中进行保存，所述ISP2斜面培养基包括如下质量含量的组分：葡萄糖0.4％、麦芽提取物1.0％、酵母提取物0.4％、琼脂1.8％，调pH值7.2。本专利技术通过菌种筛选及诱变育种筛选得到一株高产bafliomycins化合物的灰棕褐链霉菌，该菌株能够有效提高发酵液中bafliomycinA1化合物的效价，在发酵实验中，灰棕褐链霉菌FIM-Ba150115发酵产bafliomycinA1的效价高达615.87mg/L左右，极大地有利于bafliomycinA1的提取纯化工作，可以满足工业化需求。附图说明为了使本专利技术的内容更容易被清楚的理解，下面根据本专利技术的具体实施例并结合附图，对本专利技术作进一步详细的说明，其中，图1为FIM-Ba150115菌株的进化树；图2为HPLC法检测bafilomycinA1的标准曲线图；图3为对照品(A)和发酵液样品bafilomycinA1(B)紫外吸收峰图谱；图4为发酵化合物Ba0115的HPLC-Q-TOF-MS图谱；图5为发酵化合物Ba0115的红外图谱；图6为发酵化合物Ba01本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种灰棕褐链霉菌，其分类命名为Streptomyces griseobrunneus FIM‑Ba150115，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.15241，保藏日期为2018年1月18日。
【技术特征摘要】
1.一种灰棕褐链霉菌，其分类命名为StreptomycesgriseobrunneusFIM-Ba150115，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCCNo.15241，保藏日期为2018年1月18日。2.根据权利要求1所述的灰棕褐链霉菌，其特征在于，所述菌株为bafliomycinsA1化合物高产菌株。3.权利要求1或2所述的灰棕褐链霉菌在发酵生产bafliomycins化合物中的应用。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述bafliomycins化合物为bafliomycinsA1。5.根据权利要求3或4所述的应用，其特征在于，将权利要求1或2所述的灰棕褐链霉菌接种于适宜发酵培养基中进行发酵培养。6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述发酵培养基包括如下质量含量的组分：可溶性淀粉3.0-4.0％、蛋白胨1.5-3％、酵母粉1-2％、玉米浆干粉0.5-1.5％、碳酸钙0.2-0.3％，调pH...
【专利技术属性】
技术研发人员：周剑，江红，
申请(专利权)人：福建省微生物研究所，
类型：发明
国别省市：福建,35
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