一种新型的抗人IgG1-Fc抗体试剂及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种新型的抗人IgG1‑Fc抗体试剂及其制备方法，涉及抗原检测技术领域。该抗人IgG1‑Fc抗体试剂包括多种抗体；在多种抗体中，任意两种抗体具有不同的可变区和相同的恒定区，或任意两种抗体具有不同的可变区和不同的恒定区，不同的抗体结合人IgG1‑Fc抗原的不同抗原表位。采用本发明专利技术的抗体试剂可以避免IgG1‑Fc抗原在不同位置的突变导致检测无响应的结果，提高检测结果成功率及准确性，避免产生假阴性结果。

【技术实现步骤摘要】
一种新型的抗人IgG1-Fc抗体试剂及其制备方法
本专利技术涉及抗原检测
，具体而言，涉及一种新型的抗人IgG1-Fc抗体试剂及其制备方法。
技术介绍
生命科学领域使用的抗体试剂分为单克隆抗体试剂和多克隆抗体试剂。单克隆抗体试剂和多克隆抗体试剂的制备均已被业内技术人员所熟知。单克隆抗体试剂的制备的其中一种经典的方法是：首先通过抗原免疫动物，然后将免疫后动物的B细胞与瘤细胞融合，通过形成杂交瘤细胞，进一步筛选得到阳性单克隆杂交瘤细胞株，使用阳性杂交瘤细胞制备腹水，通过腹水纯化获得大量单抗；或者分析阳性杂交瘤细胞株抗体基因序列，获得抗体序列后构建抗体表达载体，转染细胞，培养后收集细胞培养上清，经纯化获得大量单克隆抗体。阳性抗体序列获得的方式不限于来自于杂交瘤，也可以通过抗体展示技术及单细胞测序技术等获得。多克隆抗体试剂的制备相对于单克隆抗体试剂的制备较简单一些，通过免疫动物后，采集血清，血清即可作为多克隆抗体试剂来使用，或者从血清中将抗体分离出来，制备成多克隆抗体试剂。单克隆抗体试剂的缺点包括但不限于如下：识别抗原表位单一，灵敏度不如多克隆抗体，且抗原表位容易受实验过程中理化性质的影响，常导致抗原表位改变，使单克隆抗体试剂无法识别或敏感程度降低。多克隆抗体试剂的缺点包括但不限于如下：特异性差，常有非特异反应和交叉反应。组成成分复杂，标准化生产较难，生产批次间存在差异等。鉴于此，特提出本专利技术。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种新型的抗人IgG1-Fc抗体试剂。本专利技术的另一目的在于提供一种分离的核酸。本专利技术的另一目的在于提供一种载体。本专利技术的另一目的在于提供一种重组细胞或重组菌。本专利技术的另一目的在于提供一种制备新型的抗人IgG1-Fc抗体试剂的方法。本专利技术的另一目的在于提供一种检测试剂盒。本专利技术是这样实现的：一方面，本专利技术提供了一种新型的抗人IgG1-Fc抗体试剂，其包括：多种抗体；在所述多种抗体中，任意两种抗体具有不同的可变区和相同的恒定区，或任意两种抗体具有不同的可变区和不同的恒定区，不同的抗体结合人IgG1-Fc抗原的不同抗原表位。本专利技术提供的抗人IgG1-Fc抗体试剂其包括了可结合人IgG1-Fc抗原的不同抗原表位的多种抗体，采用本专利技术的抗体试剂可以避免IgG1-Fc抗原在不同位置的突变导致检测无响应的结果，提高检测结果成功率及准确性，避免产生假阴性结果。进一步地，在本专利技术的一些实施方案中，人IgG1-Fc抗原的不同抗原表位包括人IgG1-Fc-CH2位置和人IgG1-Fc-CH3位置。进一步地，在本专利技术的一些实施方案中，所述多种抗体分别是抗人IgG1-Fc-CH2抗原表位的第1抗体和抗人IgG1-Fc-CH3抗原表位的第2抗体。进一步地，在本专利技术的一些实施方案中，在所述多种抗体中，任意两种抗体的可变区具有不同的CDR区。进一步地，在本专利技术的一些实施方案中，在所述多种抗体中，任意两种抗体的可变区具有相同的FR区。进一步地，在本专利技术的一些实施方案中，在所述多种抗体中，任意两种抗体的可变区具有不同的FR区。进一步地，在本专利技术的一些实施方案中，所述抗体为包括完整结构的抗体及基因工程抗体例如scFv、Fab、Fab’、F(ab)’2等。进一步地，在本专利技术的一些实施方案中，所述多种抗体中的每种抗体标记有标记物。进一步地，在本专利技术的一些实施方案中，所述标记物选自荧光标记物、酶标记物和放射性核素标记物。进一步地，在本专利技术的一些实施方案中，所述荧光标记物选自Alexa350、Alexa405、Alexa430、Alexa488、Alexa555、Alexa647、AMCA、氨基吖啶、BODIPY630/650、BODIPY650/665、BODIPY-FL、BODIPY-R6G、BODIPY-TMR、BODIPY-TRX、5-羧基-4’,5’-二氯-2’,7’-二甲氧基荧光素、5-羧基-2’,4’,5’,7’-四氯荧光素、5-羧基荧光素、5-羧基罗丹明、6-羧基罗丹明、6-羧基四甲基罗丹明、CascadeBlue、Cy2、Cy3、Cy5、Cy7、6-FAM、丹磺酰氯、荧光素、HEX、6-JOE、NBD(7-硝基苯并-2-氧杂-1,3-二唑)、OregonGreen488、OregonGreen500、OregonGreen514、PA18042790cificBlue、邻苯二甲酸、对苯二甲酸、间苯二甲酸、甲酚固紫、甲酚蓝紫、亮甲酚蓝、对氨基苯甲酸、赤藓红、酞菁、偶氮甲碱、花青、黄嘌呤、琥珀酰荧光素、稀土金属穴状化合物、三双吡啶基二胺铕、铕穴状化合物或螯合物、二胺、双花青苷、LaJolla蓝染料、别藻蓝蛋白、allococyaninB、藻蓝蛋白C、藻蓝蛋白R、硫胺、藻红青蛋白、藻红蛋白R、REG、罗丹明绿、罗丹明异硫氰酸酯、罗丹明红、ROX、TAMRA、TET、TRIT(四甲基罗丹明异硫醇)、四甲基罗丹明和德克萨斯红；优选的，所述酶标记物选自碱性磷酸酶、辣根过氧化物酶和葡萄糖氧化酶；优选的，所述放射性核素标记物选自110In、111In、177Lu、18F、52Fe、62Cu、64Cu、67Cu、67Ga、68Ga、86Y、90Y、89Zr、94mTc、94Tc、99mTc、120I、123I、124I、125I、131I、154-158Gd、32P、11C、13N、15O、186Re、188Re、51Mn、52mMn、55Co、72As、75Br、76Br、82mRb和83Sr。另一方面，本专利技术提供了一种分离的核酸，其编码上述的新型的抗人IgG1-Fc抗体试剂中的任意一种抗体。另一方面，本专利技术提供了一种载体，其含有上述的分离的核酸。另一方面，本专利技术提供了一种重组细胞或重组菌，含有上述的载体。另一方面，本专利技术提供了一种制备新型的抗人IgG1-Fc抗体试剂的方法，其包括：分别培养上述重组细胞或重组菌或利用人IgG1-Fc抗原的不同抗原表位制备抗血清或杂交瘤细胞制备腹水，从产物中分离、纯化分别得到多种抗体；将得到多种抗体组合，得到所述新型的抗人IgG1-Fc抗体试剂。其中，上述重组细胞或重组菌可分别表达出多种不同的抗体，在该多种抗体中，任意两种抗体具有不同的可变区和具有相同的恒定区，不同的抗体结合人IgG1-Fc抗原的不同的抗原表位。另一方面，本专利技术提供了一种检测试剂盒，其含有上述的新型的抗人IgG1-Fc抗体试剂。附图说明为了更清楚地说明本专利技术实施例的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，应当理解，以下附图仅示出了本专利技术的某些实施例，因此不应被看作是对范围的限定，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他相关的附图。图1为实施例1中的pCAG-mIgK-LC载体结构示意图。图2为实施例1中的pCAG-mIgG1-HC载体结构示意图。具体实施方式为使本专利技术实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。以下结合实施例对本专利技术的特征和性能作进一步的详细描述。实施例1一种新型抗人I本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种新型的抗人IgG1‑Fc抗体试剂，其特征在于，其包括：多种抗体；在所述多种抗体中，任意两种抗体具有不同的可变区和相同的恒定区，或任意两种抗体具有不同的可变区和不同的恒定区，不同的抗体结合人IgG1‑Fc抗原的不同抗原表位。

【技术特征摘要】
1.一种新型的抗人IgG1-Fc抗体试剂，其特征在于，其包括：多种抗体；在所述多种抗体中，任意两种抗体具有不同的可变区和相同的恒定区，或任意两种抗体具有不同的可变区和不同的恒定区，不同的抗体结合人IgG1-Fc抗原的不同抗原表位。2.根据权利要求1所述的新型的抗人IgG1-Fc抗体试剂，其特征在于，人IgG抗原的不同抗原表位包括人IgG1-Fc-CH2位置和人IgG1-Fc-CH3位置。3.根据权利要求2所述的新型的抗人IgG1-Fc抗体试剂，其特征在于，所述多种抗体分别是抗人IgG1-Fc-CH2抗原表位的第1抗体和抗人IgG1-Fc-CH3抗原表位的第2抗体。4.根据权利要求3所述的新型的抗人IgG1-Fc抗体试剂，其特征在于，在所述多种抗体中，任意两种抗体的可变区具有不同的CDR区。5.根据权利要求4所述的新型的抗人IgG1-Fc抗体试剂，其特征在于，在所述多种抗体中，任意两种抗体的可变区具有相同的FR区。6.根据权利要求4所述的新型的抗人IgG1-Fc抗体试剂，其特征在于，在所述多种抗体中，任意两种抗体的可变区具有不同的FR区。7.根据权利要求1-6任一项所述的新型的抗人IgG1-Fc抗体试剂，其特征在于，所述抗体为包括完整结构的抗体和基因工程抗体。8.根据权利要求1-4任一项所述的新型的抗人IgG1-Fc抗体试剂，其特征在于，所述多种抗体中的每种抗体标记有标记物。9.根据权利要求8任一项所述的新型的抗人IgG1-Fc抗体试剂，其特征在于，所述标记物选自荧光标记物、酶标记物和放射性核素标记物。10.根据权利要求9所述的新型的抗人IgG1-Fc抗体试剂，其特征在于，所述荧光标记物选自Alexa350、Alexa405、Alexa430、Alexa488、Alexa555、Alexa647、AMCA、氨基吖啶、BODIPY630/650、BODIPY650/665、BODIPY-FL、BODIPY-R6G、BODIPY-TMR、BODIPY-TRX、5-羧基-4’,5’-二氯-2’,7’-二甲氧基荧光素、5-羧基-2’,4’,5’,7’-四氯荧光素、5-羧基荧光素、5-羧基罗丹明、6-羧基罗丹明、6-羧基四甲基罗丹明、CascadeBlue、Cy2、Cy3、Cy5、Cy7、6-FAM、丹磺酰氯、荧...

【专利技术属性】
技术研发人员：程晓东，
申请(专利权)人：程晓东，杭州来伯生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：河北,13