开臂反颚茧蜂的人工繁殖生产方法技术

本发明专利技术涉及农业害虫生物防治领域，旨在提供一种开臂反颚茧蜂的人工繁殖生产方法。包括以下步骤：蜂种采集；寄主接种繁殖；开臂反颚茧蜂接种；开臂反颚茧蜂培养和收集；蜂种保存。本发明专利技术完善了果蝇优势蜂种田间诱集和繁蜂技术，实现优质、高效、大批量繁殖日本开臂反颚茧蜂；生产接种过程中，尽量使寄主黑腹果蝇幼虫龄期一致，与日本开臂反颚茧蜂寄生龄期相吻合，为寄生蜂的寄生及在寄主体内发育提供了更多机会，从而提高寄生效率；能够进行大规模连续生产，应用于农业害虫防治领域，不仅能用于防治杨梅果园果蝇，同时也适用于其他果蝇危害的果园特别是蓝莓等浆果类果园，从而更大程度上满足农业生产需要，为果园害虫的生物治提供了很大便利。

Artificial Reproduction of Cocoon Bee, Ophiognathus kaempferi

The invention relates to the field of biological control of agricultural pests, aiming at providing an artificial reproduction and production method of the Brachionus kaempferi. It includes the following steps: collection of bee species; host inoculation and reproduction; inoculation of cocoon wasp, cultivation and collection of cocoon wasp, and preservation of bee species. The invention improves the field trapping and propagating technology of Drosophila dominant species, realizes high-quality, high-efficiency and large-scale propagation of the Japanese open-arm anti-jaw cocoon wasp; in the production and inoculation process, the larval age of the host Drosophila melanogaster is as same as that of the Japanese open-arm anti-jaw cocoon wasp, and provides more opportunities for parasitism and development of the parasitoid wasps in the host, thereby improving the parasitic efficiency. It can be used in large-scale continuous production and agricultural pest control field, not only to control fruit flies in Bayberry orchards, but also to other fruit flies, especially berry orchards such as blueberries, so as to meet the needs of agricultural production to a greater extent and provide great convenience for biological control of pests in orchards.

【技术实现步骤摘要】
开臂反颚茧蜂的人工繁殖生产方法
本专利技术属于农业害虫生物防治领域，特别涉及开臂反颚茧蜂的人工繁殖生产方法。
技术介绍
果蝇属于果蝇科，双翅目环裂亚目有缝组无瓣类中的1科。世界性分布，目前已知约2500余种，分隶于横眼果蝇亚科与果蝇亚科的57属。中国迄今有记录者计17属180余种。其中黑腹果蝇Drosophilamelanogaster是生物学研究中最重要的模式生物之一。同时，果蝇食性非常广泛，可为害多种瓜果蔬菜，从而成为了农业上，尤其是果蔬业上的重要害虫。近年来，果蝇，特别是发源于东南亚的班翅果蝇，对果蔬的危害不断扩大，目前已蔓延到欧洲、北美洲、南美洲等30多个国家和地区。果蝇发育历期短、繁殖能力强，其幼虫常在果实内取食，常规的防治方法难以防治，且容易破坏生态环境，不利于农业可持续发展。在我国，果蝇严重危害南方杨梅种植区杨梅的品质与产量。在杨梅上，果蝇的危害具有爆发性。6月上旬开始，杨梅果蝇便从附近瓜田、菜地及其他果园迁向杨梅园；6月中旬虫口数量渐增；至6月下旬采收时达到高峰。在杨梅成熟采收期，雌性果蝇产卵于杨梅果实乳柱上，幼虫在果实内部取食为害的过程中，还会引发真菌、细菌等病害，造成二次侵染。杨梅成熟采收季时间短，果实为浆果，不易清洗，采用传统的化学防治喷施农药后将直接影响杨梅果实安全性，因而生物防治显得尤为重要。寄生性昆虫，特别是寄生蜂，是一类寄生于其他昆虫及节肢动物的膜翅目昆虫，是一类农林害虫的重要天敌。利用天敌控制害虫是害虫综合治理的重要手段之一。科学家们通过保护天敌、释放天敌等不同的手段增强天敌控制害虫的能力。其中天敌的大量释放涉及天敌的种群繁育。公告号为CN102578052A的中国专利申请公开了属于天敌昆虫人工饲养技术的一种杨梅园黑腹果蝇及其蛹期寄生蜂蝇蛹金小蜂的人工饲养方法；公告号为CN105794728A和CN107439491A的中国专利申请分别公开了果蝇蛹期寄生蜂毛角锤角细蜂室内繁殖的方法和加强果蝇类蛹期寄生蜂人工繁育生产方法。以上三个专利申请都只是涉及果蝇蛹期寄生蜂室内繁殖，而没有涉及幼虫期寄生蜂人工饲养方法。茧蜂科Braconidae开臂反颚茧蜂属Asobara是一类重要的果蝇幼虫寄生蜂，其在欧洲、北美、南美洲、澳大利亚、日本等地均有报道和研究，但是我国关于果蝇该属寄生蜂的研究比较少。2016年，首次在云南发现开臂茧蜂属5个新种，分别是Asobarabrevicauda、A.elongata、A.mesocauda、A.unicolorata和A.triangulata。申请人在系统调查浙江省杭州市、台州市、温州市、宁波市杨梅果园果蝇天敌种类的基础上，在台州、温州和宁波市等地均发现一种杨梅果蝇寄生蜂优势种，经形态和COI分子鉴定为日本开臂反颚茧蜂A.japonica。作为幼虫寄生蜂，将其与蛹期寄生蜂同时在果园同时释放，处于幼虫期和蛹期的果蝇均有被寄生的可能性，这样能减少果园放蜂次数，减小防治成本，有效的防治果蝇，避免果蝇的再次危害。但是目前尚未见对开臂反颚茧蜂A.japonica规模化繁殖及果园大面积应用等方面的报道。因此，鉴于开臂反颚茧蜂潜在控制和应用价值，本专利技术提出开臂反颚茧蜂人工繁殖饲养的方法。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是，克服现有技术中的不足，提供一种开臂反颚茧蜂的人工繁殖生产方法。为解决上述技术问题，本专利技术的解决方案是：提供一种开臂反颚茧蜂人工繁殖生产方法，包括下述步骤：(1)蜂种采集收集被开臂反颚茧蜂寄生的果蝇，置于温度为25±1℃、相对湿度RH为50％的恒温箱中发育；待开臂反颚茧蜂从被寄生的果蝇蛹中羽化出蜂后，转入装有寄生蜂食物的培养管中，饲养于温度为16±1℃、RH50％的恒温箱饲养，充分补充营养和糖分；(2)寄主接种繁殖将羽化一周左右且充分交配的成年果蝇转入装有果蝇食物的培养瓶中，在25±1℃培养箱中培育至产卵200-300头后取出果蝇；将带有果蝇卵的培养瓶置于25±1℃、RH为50％的恒温箱中培养，观察并记录果蝇卵的数量和发育情况；(3)开臂反颚茧蜂接种；待步骤(2)中果蝇卵孵化1-2天后，按雌蜂和果蝇卵1∶20的比例，选取步骤(1)中饲养的开臂反颚茧蜂中的雌蜂，转入果蝇培养瓶中；观察开臂反颚茧蜂对果蝇卵进行寄生，6小时后取出寄生蜂；(4)开臂反颚茧蜂培养和收集将步骤(3)中被寄生的果蝇卵置于25±1℃、RH为50％的恒温箱中培养中，待寄生蜂在寄主体内发育至18天时陆续开始羽化，收集羽化的开臂反颚茧蜂；(5)蜂种保存将步骤(4)中收集到的开臂反颚茧蜂放入装有寄生蜂食物的培养管中，培养管置于16±1℃、RH50％的恒温箱内保存，每管80-100头，用于下次育种时的接种。本专利技术中，在步骤(3)中进行接种时，要保证开臂反颚茧蜂处于羽化期，果蝇处于1-2龄幼虫期。本专利技术中，所述果蝇是黑腹果蝇Drosophilamelanogaster、斑翅果蝇D.suzukii，或者是黑果蝇D.virilis。本专利技术中，所述的开臂反颚茧蜂是下述的任意一种：日本开臂反颚茧蜂A.japonica，或者是开臂反颚茧蜂Asobarabrevicauda、开臂反颚茧蜂A.elongata、开臂反颚茧蜂A.mesocauda、开臂反颚茧蜂A.unicolorata、开臂反颚茧蜂A.triangulate、开臂反颚茧蜂A.rufescens、开臂反颚茧蜂A.pleuralis、开臂反颚茧蜂A.rossica。本专利技术中，在培养瓶中放置滤纸盒，滤纸盒中装有寄生蜂食物；在步骤(3)中进行接种前，先将步骤(1)中饲养的开臂反颚茧蜂以CO2麻醉，选取雌蜂移至培养瓶中，备用。本专利技术中，所述寄生蜂食物的配制方法为：取27g琼脂加入1000ml水中，充分搅拌混匀后，120℃高温蒸汽灭菌，然后加入33g红糖和330ml纯苹果汁，充分搅拌混匀后自然冷却至60℃，将100g尼泊金甲酯溶于900ml的95％乙醇中，然后加入冷却好的混合物中，充分搅拌混匀，4℃冷藏备用。本专利技术中，所述果蝇食物的配制方法为：取干酵母120g，以1000ml温水溶解，称取玉米粉318.75g、琼脂57g、蛋白胨60g，红糖90g、葡萄糖180g、酵母提取物60g加入5000ml温水中充分搅拌混匀后加入已溶解的1000ml酵母液，加热并搅拌；待混匀物煮熟时依次加入1.5gMgSO4·7H2O和1.5gCaCl2·2H2O，煮沸后自然冷却至50-60℃，加入180ml尼泊金甲酯溶液和丙酸50ml，搅拌均匀，冷却6～7h后，用纱布密封，放入4℃冰箱冷藏备用；所述尼泊金甲酯溶液是以100g尼泊金甲酯溶于900ml95％乙醇而成。与现有技术相比，本专利技术的有益效果是：1、本专利技术提供的技术方案完善了果蝇优势蜂种田间诱集和繁蜂技术，实现优质、高效、大批量繁殖日本开臂反颚茧蜂；2、本专利技术所述果蝇寄生蜂诱捕装置与现有的寄生蜂诱捕装置相比，材料简单，制作简便，成本低廉，能适应不同生境、不同时间、不同种类寄生蜂的诱捕。本装置底部利器盒盖因有开合的缝隙适合排水，无需特异添加排水管。本装置盒盖的红色与盒体的黄色，在田间对果蝇和寄生蜂有很好的诱集效果，从而提高诱集效率，同时便于作业人员在果园发现回收；3、本专利技术所述的生产接种过程中，尽量使寄主黑腹果蝇本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种开臂反颚茧蜂人工繁殖生产方法，其特征在于，包括下述步骤：(1)蜂种采集收集被开臂反颚茧蜂寄生的果蝇，置于温度为25±1℃、相对湿度RH为50％的恒温箱中发育；待开臂反颚茧蜂从被寄生的果蝇蛹中羽化出蜂后，转入装有寄生蜂食物的培养管中，饲养于温度为16±1℃、RH 50％的恒温箱饲养，充分补充营养和糖分；(2)寄主接种繁殖将羽化一周左右且充分交配的成年果蝇转入装有果蝇食物的培养瓶中，在25±1℃培养箱中培育至产卵200‑300头后取出果蝇；将带有果蝇卵的培养瓶置于25±1℃、RH为50％的恒温箱中培养，观察并记录果蝇卵的数量和发育情况；(3)开臂反颚茧蜂接种；待步骤(2)中果蝇卵孵化1‑2天后，按雌蜂和果蝇卵1∶20的比例，选取步骤(1)中饲养的开臂反颚茧蜂中的雌蜂，转入果蝇培养瓶中；观察开臂反颚茧蜂对果蝇卵进行寄生，6小时后取出寄生蜂；(4)开臂反颚茧蜂培养和收集将步骤(3)中被寄生的果蝇卵置于25±1℃、RH为50％的恒温箱中培养中，待寄生蜂在寄主体内发育至18天时陆续开始羽化，收集羽化的开臂反颚茧蜂；(5)蜂种保存将步骤(4)中收集到的开臂反颚茧蜂放入装有寄生蜂食物的培养管中，培养管置于16±1℃、RH 50％的恒温箱内保存，每管80‑100头，用于下次育种时的接种。...

【技术特征摘要】
1.一种开臂反颚茧蜂人工繁殖生产方法，其特征在于，包括下述步骤：(1)蜂种采集收集被开臂反颚茧蜂寄生的果蝇，置于温度为25±1℃、相对湿度RH为50％的恒温箱中发育；待开臂反颚茧蜂从被寄生的果蝇蛹中羽化出蜂后，转入装有寄生蜂食物的培养管中，饲养于温度为16±1℃、RH50％的恒温箱饲养，充分补充营养和糖分；(2)寄主接种繁殖将羽化一周左右且充分交配的成年果蝇转入装有果蝇食物的培养瓶中，在25±1℃培养箱中培育至产卵200-300头后取出果蝇；将带有果蝇卵的培养瓶置于25±1℃、RH为50％的恒温箱中培养，观察并记录果蝇卵的数量和发育情况；(3)开臂反颚茧蜂接种；待步骤(2)中果蝇卵孵化1-2天后，按雌蜂和果蝇卵1∶20的比例，选取步骤(1)中饲养的开臂反颚茧蜂中的雌蜂，转入果蝇培养瓶中；观察开臂反颚茧蜂对果蝇卵进行寄生，6小时后取出寄生蜂；(4)开臂反颚茧蜂培养和收集将步骤(3)中被寄生的果蝇卵置于25±1℃、RH为50％的恒温箱中培养中，待寄生蜂在寄主体内发育至18天时陆续开始羽化，收集羽化的开臂反颚茧蜂；(5)蜂种保存将步骤(4)中收集到的开臂反颚茧蜂放入装有寄生蜂食物的培养管中，培养管置于16±1℃、RH50％的恒温箱内保存，每管80-100头，用于下次育种时的接种。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(3)中进行接种时，要保证开臂反颚茧蜂处于羽化期，果蝇处于1-2龄幼虫期。3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述果蝇是黑腹果蝇Drosophilamelanogaster、斑翅果蝇D.suzukii，或者是黑果蝇D.virilis。4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的开臂反颚茧蜂是...

【专利技术属性】
技术研发人员：王知知，陈学新，黄健华，时敏，叶熹骞，
申请(专利权)人：浙江大学，
类型：发明
国别省市：浙江,33