利用离子液体从鹅掌柴叶中提取三萜类化合物的方法技术

本发明专利技术涉及一种通过离子液体萃取来优化鹅掌柴叶中羽扇豆烷型五环三萜提取工艺，其将干燥的鹅掌柴叶粉末与萃取剂混合后于室温进行超声萃取，超声萃取结束后，离心，取上清液即得；所述萃取剂由离子液体（［BMIM］BF4、［BMIM］Br、［BMIM］PF6或［HMIM］PF6）与70%乙醇混合组成。经试验验证提取所得产物中化合物A（3α‑羟基‑羽扇‑20(29)‑烯‑23,28‑二酸）、和化合物B（3α‑羟基‑羽扇‑20(29)‑烯‑23,28‑二酸28‑O‑α‑L‑鼠李糖基‑(1→4)‑O‑β‑D‑葡萄糖基‑(1→6)‑β‑D‑葡萄糖苷）的总含量为288.03mg/g（n=6）。与传统的提取方法相比，加入离子液体后鹅掌柴叶中两个化合物的总提取率可达28.80%。

Extraction of Triterpenoids from the Leaves of Liriodendron chinensis by Ionic Liquids

The invention relates to an extraction process of lupinane-type pentacyclic triterpenoids from leaves of Euphorbia chinensis by ionic liquid extraction, in which dried powder of Euphorbia chinensis leaves is mixed with extractant and then extracted by ultrasound at room temperature. After the extraction, centrifugation and supernatant are obtained. The extractant is obtained by ionic liquid ([BMIM] [BF4] [BMIM] [Br], [BMIM] [PF6] or [HMIM]) and 7. Composition of 0% ethanol. \u7ecf\u8bd5\u9a8c\u9a8c\u8bc1\u63d0\u53d6\u6240\u5f97\u4ea7\u7269\u4e2d\u5316\u5408\u7269A\uff083\u03b1\u2011\u7f9f\u57fa\u2011\u7fbd\u6247\u201120(29)\u2011\u70ef\u201123,28\u2011\u4e8c\u9178\uff09\u3001\u548c\u5316\u5408\u7269B\uff083\u03b1\u2011\u7f9f\u57fa\u2011\u7fbd\u6247\u201120(29)\u2011\u70ef\u201123,28\u2011\u4e8c\u917828\u2011O\u2011\u03b1\u2011L\u2011\u9f20\u674e\u7cd6\u57fa\u2011(1\u21924)\u2011O\u2011\u03b2\u2011D\u2011\u8461\u8404\u7cd6\u57fa\u2011(1\u21926)\u2011\u03b2\u2011D\u2011\u8461\u8404\u7cd6\u82f7\uff09\u7684\u603b\u542b\u91cf\u4e3a288.03mg/g\uff08n=6\uff09\u3002 Compared with the traditional extraction method, the total extraction rate of the two compounds in the leaves of Liriodendron chinensis could reach 28.80%.

【技术实现步骤摘要】
利用离子液体从鹅掌柴叶中提取三萜类化合物的方法
本专利技术属于医药或/和保健品
，具体涉及一种利用离子液体结合响应曲面法从鹅掌柴叶中提取两种主要三萜类化合物（化合物A3α-羟基-羽扇-20(29)-烯-23,28-二酸和化合物B3α-羟基-羽扇-20(29)-烯-23,28-二酸28-O-α-L-鼠李糖基-(1→4)-O-β-D-葡萄糖基-(1→6)-β-D-葡萄糖苷）的方法。
技术介绍
鹅掌柴（Scheffleraoctophylla(Lour.)Harms）为五加科鹅掌柴属植物，主要分布在热带和亚热带等地区，在中国，鹅掌柴主要分布在福建、广东、广西、云南等地。药用始载于《岭南草药志》、《生草药性备要》、《岭南采药录》和广州部队《常用中草药手册》均记载其性凉，味苦涩，治流感发热，咽喉肿痛，风湿骨痛，跌打瘀积肿痛。《陆川本草》：驳骨止血，消肿止痛，治风湿骨痛，跌打骨折，伤积肿痛，刀伤出血。广州部队《常用中草药手册》：发汗解表，祛风除湿，治流感发热，咽喉肿痛，风湿骨痛，跌打瘀积肿痛。《广西中草药》：活血祛瘀，清热，治风湿，跌打，烧伤。鹅掌柴叶具有治疗各种疼痛、胃疼、外伤出血等功效。离子液体(ionicliquid，IL)是一种新型的绿色有机溶剂，又称室温熔盐，由特定的、体积相对较大的、结构不对称的有机阳离子和体积相对较小的无机阴离子组成，具有良好的热稳定性和化学稳定性、粘度范围宽、可调节性和溶解性好等特点。不仅减少了对环境的污染，还能破坏纤维素的结构，从而促进有效成分的溶出，继而提高了提取率。近年来，有文献报道，离子液体应用于中药活性化合物的提取，目前，尚未见有关利用离子液体对鹅掌柴叶中三萜类成分萃取研究的报道。
技术实现思路
本专利技术目的在于克服现有技术缺陷，提供一种利用离子液体从鹅掌柴叶中优化提取两种主要三萜类化合物（3α-羟基-羽扇-20(29)-烯-23,28-二酸和3α-羟基-羽扇-20(29)-烯-23,28-二酸28-O-α-L-鼠李糖基-(1→4)-O-β-D-葡萄糖基-(1→6)-β-D-葡萄糖苷）的方法，该提取方法操作简单，提取效率高。为实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：一种利用离子液体从鹅掌柴叶中优化提取两种主要三萜类化合物（3α-羟基-羽扇-20(29)-烯-23,28-二酸和3α-羟基-羽扇-20(29)-烯-23,28-二酸28-O-α-L-鼠李糖基-(1→4)-O-β-D-葡萄糖基-(1→6)-β-D-葡萄糖苷）的方法，其将干燥的鹅掌柴叶粉末与萃取剂混合后于室温（25－30℃）进行超声萃取，超声萃取结束后，离心，取上清液即得；所述萃取剂由离子液体与70%乙醇混合组成。化合物A（3α-羟基-羽扇-20(29)-烯-23,28-二酸）和化合物B（3α-羟基-羽扇-20(29)-烯-23,28-二酸28-O-α-L-鼠李糖基-(1→4)-O-β-D-葡萄糖基-(1→6)-β-D-葡萄糖苷）的化学结构如下所示：。具体的，上述提取方法中，所述离子液体为［BMIM］BF4、［BMIM］Br、［BMIM］PF6或［HMIM］PF6；萃取剂中离子液体浓度为0.1~1.0mol/L（优选0.4~0.8mol/L）。文中如无特殊说明，70%乙醇均指的是体积浓度。进一步优选的，可以将鹅掌柴叶粉末与萃取剂按照固液比1g：10~100mL（优选1g：60~80mL）进行添加，鹅掌柴叶粉末的适宜目数范围在10~100目（优选50~70目）。为了获得较好的提取效果，超声萃取时间以10~60min（优选40~60min）为宜，超声功率为100~500W。离心转速以7000~9000r/min（优选3000~8000r/min）为宜。本专利技术采用离子液体-超声波辅助萃取-高效液相色谱法，应用Design-Expert8.06统计分析软件，设计Box-Benhnken4因素3水平的中心组合实验，利用HPLC法同时对鹅掌柴叶中的化合物A（3α-羟基-羽扇-20(29)-烯-23,28-二酸）和化合物B（3α-羟基-羽扇-20(29)-烯-23,28-二酸28-O-α-L-鼠李糖基-(1→4)-O-β-D-葡萄糖基-(1→6)-β-D-葡萄糖苷）进行含量测定，筛取最佳的提取工艺。本专利技术利用离子液体从鹅掌柴叶中提取两种主要三萜类化合物的方法构思步骤如下：1）首先选择合适的溶剂来溶解离子液体并确定最佳的萃取剂类型；分别比较甲醇、乙腈、乙酸乙酯、70%乙醇和水来溶解离子液体并对鹅掌柴叶进行提取，筛选出70%乙醇对目标分析物的提取率最好。接着分别比较了［BMIM］BF4⁄70%乙醇，［BMIM］Br⁄70%乙醇，［BMIM］PF6⁄70%乙醇，［HMIM］PF6⁄70%乙醇四种萃取剂对目标分析物的萃取率，最终确定［BMIM］BF4⁄70%为最佳萃取剂；2）在步骤1）的基础上，设计提取条件的因素水平，以提取鹅掌柴叶工艺中的不同控制参数为因子，通过单因素分析法来确定响应曲面方法的因素水平；筛选多个提取工艺的控制参数后，选取影响最大的几个控制参数为因子：以固液比（倍）、萃取剂浓度（mol/L）、离心转速（r/min）、粉碎目数（目）为四个因子，进行试验；3）采用Design-Expert8.06设计响应曲面试验，通过方差分析并确定化合物A和化合物B的最大提取率以及其对应的因子水平；4）根据化合物A和化合物B的最大提取率对应的控制参数因子水平，在最优条件下提取鹅掌柴叶中两种主要三萜类化合物，检测提取率（将供试品溶液用高效液相色谱仪在210nm处检测峰面积，与化合物A和化合物B标准曲线比较，计算化合物A和化合物B的总萃取量）。将实际提取率与传统溶剂检测值相比较，确定离子液体萃取的先进性；本专利技术提供了一种利用离子液体结合响应曲面实验法优化提取两种主要三萜类化合物的工艺，应用Design-Expert8.06统计分析软件，设计Box-Benhnken4因素3水平的中心组合实验，利用HPLC法同时对鹅掌柴叶中的化合物A和化合物B进行含量测定，本专利技术为中药研究者们提供了新的思路和途径，本实验建立的最佳提取条件是科学可行的，可用于优化选取合适工业扩大化生产的提取技术，改善陈旧工艺，提高效率，为鹅掌柴的综合利用提供实验依据，对鹅掌柴的开发及利用提供了科学依据。此外，本专利技术提取方法操作简单，提取效率高，适合大规模工业化生产。附图说明图1为鹅掌柴叶供试品（a）与混合对照品（b）的HPLC图，1.化合物B2.化合物A；图2为不同提取溶剂对两种三萜类化合物萃取率的影响；图3为萃取剂种类对鹅掌柴两种三萜类化合物萃取率的影响；图4为粉碎目数对鹅掌柴两种三萜类化合物萃取率的影响；图5为萃取剂浓度对鹅掌柴两种三萜类化合物萃取率的影响；图6为超声时间对鹅掌柴两种三萜类化合物萃取率的影响；图7为固液比对鹅掌柴两种三萜类化合物萃取率的影响；图8为离心转速对鹅掌柴两种三萜类化合物萃取率的影响；图9为超声功率对鹅掌柴两种三萜类化合物萃取率的影响；图10为交互作用对鹅掌柴两种三萜类化合物萃取率的影响。具体实施方式以下结合实施例对本专利技术的技术方案作进一步地详细介绍，但本专利技术的保护范围并不局限于此。仪器与试剂。化合物A和化合物B（根据庞素秋等，Chemistry本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种利用离子液体从鹅掌柴叶中提取三萜类化合物的方法，其特征在于，将干燥的鹅掌柴叶粉末与萃取剂混合后于室温进行超声萃取，超声萃取结束后，离心，取上清液即得；所述萃取剂由离子液体与70%乙醇混合组成。

【技术特征摘要】
1.一种利用离子液体从鹅掌柴叶中提取三萜类化合物的方法，其特征在于，将干燥的鹅掌柴叶粉末与萃取剂混合后于室温进行超声萃取，超声萃取结束后，离心，取上清液即得；所述萃取剂由离子液体与70%乙醇混合组成。2.如权利要求1所述利用离子液体从鹅掌柴叶中提取三萜类化合物的方法，其特征在于，所述离子液体为［BMIM］BF4、［BMIM］Br、［BMIM］PF6或［HMIM］PF6；萃取剂中离子液体浓度为0.1~1.0mol/L。3.如权利要...

【专利技术属性】
技术研发人员：康文艺，许瑞安，牛云，刘绪强，
申请(专利权)人：河南大学，
类型：发明
国别省市：河南,41