本发明专利技术提出了异甘草素在制备治疗创伤性脑损伤(TBI)后血脑屏障障碍和炎症的药物中的应用，具体公开异甘草素在修复脑部血脑屏障和抗炎症中的用途。所述异甘草素在脑部受到创伤后应用，通过抑制由TBI诱导的脑组织丝氨酸/苏氨酸激酶(GSK3β)和抑制蛋白(NFκB)的激活，缓解由TBI诱导的脑组织白介素6(IL‑6)和肿瘤坏死因子α(TNF‑α)的增高来实现修复血脑屏障功能和抗炎的作用的。
Application of isoglycyrrhizin in the treatment of blood-brain barrier disorder and inflammatory drugs
The invention provides the application of isoglycyrrhizin in the preparation of drugs for treating blood-brain barrier disorder and inflammation after traumatic brain injury (TBI), and specifically discloses the use of isoglycyrrhizin in repairing brain blood-brain barrier and anti-inflammation. The isoglycyrrhizin is used after traumatic brain injury to restore blood-brain barrier function and anti-inflammatory effect by inhibiting the activation of serine/threonine kinase (GSK3bet) and inhibitor protein (NFkB) induced by TBI and alleviating the increase of interleukin-6 (IL-6) and tumor necrosis factor-alpha (TNF-alpha) in brain tissue induced by TBI.
【技术实现步骤摘要】
异甘草素在治疗血脑屏障障碍和炎症药物中的应用
本专利技术涉及制药
，具体涉及一种治疗创伤性脑损伤后血脑屏障障碍和炎症反应的药物以及药物发挥这些作用机制通路。
技术介绍
异甘草素(isoliquiritigenin)是从甘草属植物分离、纯化的异黄酮类化合物，其化学名称为(E)-1-(2，4-二羟基苯基)-3-(4-羟基苯基)-2-丙烯-1-酮。异甘草素有着很强的生物活性，具有抗菌、抗病毒、抗感染、抗肿瘤、抑制脂质过氧化等多种药理作用，备受广大学者的青睐。创伤性脑损伤(Traumaticbraininjury,TBI)是导致全世界死亡的主要疾病之一，世界卫生组织研究指出，到2020年创伤性脑损伤有可能成为死亡和致残的主要疾病。有效修复血脑屏障是治疗损伤性脑损伤手段之一，血脑屏障能够将中枢神经系统和血液系统隔离，其主要目的是防止血浆中神经毒性物质进入脑内，介导废弃外排，因此可以维持中枢神经系统的正常功能。相关文献已经报道，创伤性脑损伤后血脑屏障的破坏出现脑出血以及脑水肿，是继发性脑损伤致死的重要原因。到目前为止，临床上并没有很好有效修复TBI后血脑屏障的药物。另一种有效治疗TBI的手段是抗炎症治疗，炎症反应在TBI后脑组织的损伤中扮演着重要的角色，TBI后周围循环中的细胞大量进入中枢神经系统(centralnervoussystem，CNS)，包括白细胞、单核细胞和淋巴细胞等。这些活化细胞可分泌多种炎症介质，产生的炎症介质能进一步诱导趋化因子和细胞黏附分子的生成，引起胶质细胞向受损区域聚集，介导神经系统的损伤。因此，深入了解创伤性脑损伤后血脑屏障障碍和炎症反应的确切机制和发现新的药物干预措施十分必要。
技术实现思路
为了解决上述的技术问题，本专利技术提供了异甘草素在治疗血脑屏障障碍和炎症药物中的应用，其目的在于，提供一种异甘草素的新应用，通过异甘草素制备的药剂治疗血脑屏障障碍和炎症，可明显延缓病情进展恶化，显著减少病死率和病残率，提高生存质量，治疗的可操作性强，费用低等优点。本专利技术提供一种异甘草素在制备治疗创伤性脑损伤后血脑屏障障碍和炎症的药物中的应用。作为本专利技术进一步的改进，所述药物，其为以异甘草素为唯一活性成分的制剂。作为本专利技术进一步的改进，所述药物，其为将异甘草素和其他药物制成的复方制剂。作为本专利技术进一步的改进，所述药物，其为含有从甘草根、红芪、黄芪和/或串果藤中提取得到含有异甘草素的提取物的制剂。作为本专利技术进一步的改进，所述药物，其为含有人工合成的异甘草素的制剂。作为本专利技术进一步的改进，所述制剂，其为注射液、皮下埋植剂、片剂、粉剂、颗粒剂、胶囊、口服液、缓释剂中的一种。作为本专利技术进一步的改进，所述复方制剂，其为注射液、皮下埋植剂、片剂、粉剂、颗粒剂、胶囊、口服液、缓释剂中的一种。本专利技术的药物异甘草素的用药剂量可为2.2g/kg体重以下(该剂量为小鼠口服最大耐受剂量(MTD)的换算剂量，小鼠的MTD＞20g/kg，因此其LD50＞20g/kg)。本专利技术具有如下有益效果：本专利技术通过大量试验，从甘草根中提取得到异甘草素,其对修复创伤性脑损伤后的血脑屏障和抗炎效果好，且无毒副作用，成本低廉。将有助于延缓病情进展恶化，显著减少病死率和病残率，提高生存质量，还具有可操作性强，能显著降低患者及医疗机构的诊疗费用等优点。附图说明图1为异甘草素改善创伤性脑损伤所致血脑屏障通透性-创伤性脑损伤动物模型图；图2为异甘草素通过调节PI3K/AKT/GSK3β通路提高脑组织连接蛋白的表达修复血脑屏障-创伤性脑损伤动物模型图；图3为异甘草素通过调节PI3K/AKT/NFκB通路抑制脑组织炎症反应-创伤性脑损伤动物模型图；图4为异甘草素抑制脑组织炎症因子的表达-创伤性脑损伤动物模型图；图5为采用免疫荧光染色方法验证异甘草素抑制脑组织炎症因子的表达以及GSK3β和NFκB的激活-创伤性脑损伤动物模型图；图6为异甘草素通过PI3K/AKT通路缓解OGD诱导的SH-SY5Y细胞连接蛋白的降低以及炎症反应-细胞水平图。具体实施方式下面将结合本专利技术实施例，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整的描述，显然，所述的实施例只是本专利技术的部分具有代表性的实施例，而不是全部实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的其他所有实施例都属于本专利技术的保护范围。其次，此处所称的“一个实施例”或“实施例”是指可包含于本专利技术至少一个实现方式中的特定特征、结构或特性。在本说明书中不同地方出现的“在一个实施例中”并非均指同一个实施例，也不是单独的或选择性的与其他实施例互相排斥的实施例。TBI后继发性损伤及后续的组织再生与修复过程复杂，本专利技术经过大量实验发现，异甘草素可以用于作为治疗创伤性脑损伤后血脑屏障障碍和炎症反应的药物，并研究了其作用机制。实施例1异甘草素对创伤性脑损伤动物模型血脑屏障通透性的作用1.创伤性脑损伤小鼠模型的建立取40只6-8周龄雄性C57BL/6N小鼠，清洁级，体重为20-25g，购于上海斯莱克实验动物有限责任公司。将小鼠随机分为假手术组(Sham)、模型组(TBI)、给药组(TBI+异甘草素)。先将实验动物用4％水合氯醛(10ml/kg)腹腔内注射麻醉，给药结束后将小鼠固定于脑立体定位仪上，保持顶骨左右位水平、前后位切线水平，首先剃去小鼠头背部的毛并消毒，做正中矢状切口，用3％双氧水腐蚀并剪除筋膜，使颅骨上的前囟和人字点露出，于前囟后0.58mm，中线旁开1.1mm，用台式牙钻行颅骨钻孔，磨开一直径3mm的圆形骨窗，并确保硬脑膜完整，为保证损伤一致性我们采用控制性脑皮质撞击法(CCI)，运用先进的打击器，设置打击深度1mm，打击速度4m/s，并且打击管于矢状面平行，于管状面平行，确保垂直打击。给药后一小时后进行脑外伤模型造模，造模结束之后，缝合切口，将小鼠置于37℃热板上待其苏醒后将其置于鼠笼饲养。2.实验方法将异甘草素溶于生理盐水，按照20mg/kg的剂量给给药组小鼠进行腹腔注射，每天2次，连续给药7天，首次治疗在动物造模后6h进行；模型组在术后相同时间给予给药组等体积的生理盐水(0.5mL/200gwt)；假手术组动物开颅，但不打击，给予给药组等体积的生理盐水(0.5mL/200gwt)。3.创伤性脑损伤动物模型血脑屏障通透性检测将小鼠在处死前2小时分别腹腔注射0.25ml2％伊文思蓝和0.2ml的FITC-dextran(100μg/ml)溶液，然后麻醉仰卧固定四肢于手术板上，快速打开胸腔，从两侧将老鼠肋骨剪短，并用止血钳将肋骨往两侧翻开，暴露出心脏，然后用针头从心尖偏左位置将针尖插入到主动脉方向，并用止血钳夹住针头，将其固定，然后剪开右心耳。接着滴注生理盐水，尽量将全身血液灌流冲净。取脑组织，左右对半切，按脑组织重量(g)与甲酰胺体积(ml)1:5比例萃取用酶标仪检测伊文思蓝荧光强度(激发波长610nm和发射波长680nm)。脑组织加10ml的生理盐水，剪碎匀浆，在12000r离心20min，吸取上清液200μl，甲醇与乙醇体积按1:2的比例混合，离心，吸取上清液200μl，在用酶标仪检测FITC-dextran荧光强度(激发波长493nm和发射波长517nm)。具体结果如图1。结论：(A)伊文思蓝在脑损伤周本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.异甘草素在制备治疗创伤性脑损伤后血脑屏障障碍和炎症的药物中的应用。
【技术特征摘要】
1.异甘草素在制备治疗创伤性脑损伤后血脑屏障障碍和炎症的药物中的应用。2.根据权利要求1所述应用，其特征在于，所述药物，其为以异甘草素为唯一活性成分的制剂。3.根据权利要求1所述应用，其特征在于，所述药物，其为将异甘草素和其他药物制成的复方制剂。4.根据权利要求1所述应用，其特征在于，所述药物，其为含有从甘草根、红芪、黄芪和/或串果藤中提取得到含有异甘草素的提取物的制剂。5.根据权利要求1所述应用，其特征在于，所述药物，其为含有人工合成的异甘草素的制剂。6.根据权利要求2所...
【专利技术属性】
技术研发人员：张曼，葛利云，陈大庆，
申请(专利权)人：温州医科大学，
类型：发明
国别省市：浙江,33
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