一种Fmoc氨基酸的分析方法技术

技术编号:19961535 阅读:53 留言:0更新日期:2019-01-03 11:28
本发明专利技术属于氨基酸分析技术领域,特别涉及一种Fmoc氨基酸的分析方法,包括以下步骤:步骤1,将Fmoc‑Arg(Pbf)‑OH溶解在乙腈中,所述Fmoc‑Arg(Pbf)‑OH的浓度为2‑10mg/mL;步骤2,将步骤1制得的Fmoc‑Arg(Pbf)‑OH溶液作为样品,进行高效液相色谱分析;所述高效液相色谱的色谱条件为:以十八烷基硅烷键合硅胶作为填充剂,Sinochrom ODS‑BP为色谱柱,采用梯度洗脱,流速1.0‑2.0ml/min,柱温:室温,检测波长为220nm,本发明专利技术的方法可以对Fmoc氨基酸:Fmoc‑Arg(Pbf)‑OH进行精准分析,具有灵敏度高、检测限低,检测方法简单、稳定性好、重复性高的优点。

A Method for the Analysis of Fmoc Amino Acids

The invention belongs to the field of amino acid analysis technology, in particular relates to an analytical method for Fmoc amino acids, which includes the following steps: step 1, dissolving Fmoc Arg (Pbf)OH in acetonitrile, the concentration of Fmoc Arg (Pbf)OH is 2 10mg/mL; step 2, using Fmoc Arg (Pbf)OH solution prepared in step 1 as a sample for high performance liquid chromatography analysis; The chromatographic conditions are as follows: using octadecyl silane bonded silica gel as filler, Sinochrom ODS BP as chromatographic column, gradient elution, flow rate 1.0 2.0 ml/min, column temperature: room temperature, detection wavelength 220 nm. The method can accurately analyze Fmoc amino acids: Fmoc Arg (Pbf)OH, with high sensitivity, low detection limit, simple detection method, good stability, and high detection accuracy. The advantages of high repeatability.

【技术实现步骤摘要】
一种Fmoc氨基酸的分析方法
本专利技术属于氨基酸分析
,特别涉及一种Fmoc氨基酸的分析方法。
技术介绍
多肽合成过程中氨基酸易发生错接和许多副反应,需要对氨基酸进行保护,合成多肽后再脱去保护基团,即芴甲氧羰酰基(Fmoc)是常见的保护基团。现有技术中,一般通过用Fmoc-Cl或Fmoc-Osu引入Fmoc,合成的Fmoc氨基酸的纯度影响后续合成多肽的产品质量,因此,Fmoc氨基酸的纯度的分析具有重要意义。现有技术中,氨基酸的分析多采用高效液相色谱(HPLC),但是不同的HPLC分析条件对不同氨基酸的分析结果准确度产生很大影响。精氨酸是人体必需的氨基酸,在多肽合成中,为了避免副产物的产生,须对精氨酸的氨基和胍基进行保护;Fmoc-Arg(Pbf)-OH就是利用Fmoc(9-芴甲氧羰基)保护氨基,用Pbf(2,2,4,6,7-五甲基苯并呋喃-5-磺酰基)保护胍基;现有技术中,对Fmoc-Arg(Pbf)-OH未见报道。
技术实现思路
本专利技术解决现有技术中存在的上述技术问题,提供一种Fmoc氨基酸的分析方法。为解决上述问题,本专利技术的技术方案如下:一种Fmoc氨基酸的分析方法,所述Fmoc氨基酸为Fmoc-Arg(Pbf)-OH,所述分析方法包括以下步骤:步骤1,将Fmoc-Arg(Pbf)-OH溶解在乙腈中,所述Fmoc-Arg(Pbf)-OH的浓度为2-10mg/mL;步骤2,将步骤1制得的Fmoc-Arg(Pbf)-OH溶液作为样品,进行高效液相色谱分析;所述高效液相色谱的色谱条件为:以十八烷基硅烷键合硅胶作为填充剂,SinochromODS-BP为色谱柱,采用梯度洗脱,流速1.0-2.0ml/min,柱温:室温,检测波长为220nm,所述梯度洗脱按照下表执行:时间/min流动相A流动相B0.0150%50%20.00%100%优选地,所述流动相A为0.1%三氟乙酸溶液。优选地,所述流动相B为0.1%三氟乙酸乙腈溶液。优选地,所述流速为1.0ml/min。优选地,所述高效液相色谱分析的进样量为10μL。相对于现有技术,本专利技术的优点如下,本专利技术的方法可以对Fmoc氨基酸:Fmoc-Arg(Pbf)-OH进行精准分析,具有灵敏度高、检测限低,检测方法简单、稳定性好、重复性高的优点。附图说明图1为实施例1的高效液相色谱图。具体实施方式实施例1:一种Fmoc氨基酸的分析方法,所述Fmoc氨基酸为Fmoc-Arg(Pbf)-OH,所述分析方法包括以下步骤:步骤1,将Fmoc-Arg(Pbf)-OH溶解在乙腈中,所述Fmoc-Arg(Pbf)-OH的浓度为3mg/mL;步骤2,将步骤1制得的Fmoc-Arg(Pbf)-OH溶液作为样品,进行高效液相色谱分析;所述高效液相色谱的色谱条件为:以十八烷基硅烷键合硅胶作为填充剂,SinochromODS-BP为色谱柱,采用梯度洗脱,流速1.0ml/min,柱温:室温,检测波长为220nm,进样量为10μL,所述梯度洗脱按照下表执行:时间/min流动相A流动相B0.0150%50%20.00%100%所述流动相A为0.1%三氟乙酸溶液;所述流动相B为0.1%三氟乙酸乙腈溶液。实施例2:一种Fmoc氨基酸的分析方法,所述Fmoc氨基酸为Fmoc-Arg(Pbf)-OH,所述分析方法包括以下步骤:步骤1,将Fmoc-Arg(Pbf)-OH溶解在乙腈中,所述Fmoc-Arg(Pbf)-OH的浓度为2mg/mL;步骤2,将步骤1制得的Fmoc-Arg(Pbf)-OH溶液作为样品,进行高效液相色谱分析;所述高效液相色谱的色谱条件为:以十八烷基硅烷键合硅胶作为填充剂,SinochromODS-BP为色谱柱,采用梯度洗脱,流速2.0ml/min,柱温:室温,检测波长为220nm,进样量为10μL,所述梯度洗脱按照下表执行:时间/min流动相A流动相B0.0150%50%20.00%100%所述流动相A为0.1%三氟乙酸溶液;所述流动相B为0.1%三氟乙酸乙腈溶液。实施例3:一种Fmoc氨基酸的分析方法,所述Fmoc氨基酸为Fmoc-Arg(Pbf)-OH,所述分析方法包括以下步骤:步骤1,将Fmoc-Arg(Pbf)-OH溶解在乙腈中,所述Fmoc-Arg(Pbf)-OH的浓度为10mg/mL;步骤2,将步骤1制得的Fmoc-Arg(Pbf)-OH溶液作为样品,进行高效液相色谱分析;所述高效液相色谱的色谱条件为:以十八烷基硅烷键合硅胶作为填充剂,SinochromODS-BP为色谱柱,采用梯度洗脱,流速1.0ml/min,柱温:室温,检测波长为220nm,进样量为10μL,所述梯度洗脱按照下表执行:时间/min流动相A流动相B0.0150%50%20.00%100%所述流动相A为0.1%三氟乙酸溶液;所述流动相B为0.1%三氟乙酸乙腈溶液。需要说明的是上述实施例仅仅是本专利技术的较佳实施例,并没有用来限定本专利技术的保护范围,在上述基础上做出的等同替换或者替代均属于本专利技术的保护范围。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种Fmoc氨基酸的分析方法,所述Fmoc氨基酸为Fmoc‑Arg(Pbf)‑OH,其特征在于,所述分析方法包括以下步骤:步骤1,将Fmoc‑Arg(Pbf)‑OH溶解在乙腈中,所述Fmoc‑Arg(Pbf)‑OH的浓度为2‑10mg/mL;步骤2,将步骤1制得的Fmoc‑Arg(Pbf)‑OH溶液作为样品,进行高效液相色谱分析;所述高效液相色谱的色谱条件为:以十八烷基硅烷键合硅胶作为填充剂,Sinochrom ODS‑BP为色谱柱,采用梯度洗脱,流速1.0‑2.0ml/min,柱温:室温,检测波长为220nm,所述梯度洗脱按照下表执行:

【技术特征摘要】
1.一种Fmoc氨基酸的分析方法,所述Fmoc氨基酸为Fmoc-Arg(Pbf)-OH,其特征在于,所述分析方法包括以下步骤:步骤1,将Fmoc-Arg(Pbf)-OH溶解在乙腈中,所述Fmoc-Arg(Pbf)-OH的浓度为2-10mg/mL;步骤2,将步骤1制得的Fmoc-Arg(Pbf)-OH溶液作为样品,进行高效液相色谱分析;所述高效液相色谱的色谱条件为:以十八烷基硅烷键合硅胶作为填充剂,SinochromODS-BP为色谱柱,采用梯度洗脱,流速1.0-2.0ml/min,柱温:室温,检...

【专利技术属性】
技术研发人员:徐红岩贺秀慧杨明
申请(专利权)人:南京肽业生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:江苏,32

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