本发明专利技术公开了一种1‑(3,5‑二甲氧基苯基)‑3‑(取代嘧啶‑4‑基)脲类化合物及其制备和应用，该化合物的结构如式(I)所示，研究结果表明，这类化合物对BEAS‑2B细胞(肺正常细胞)的增殖无毒性作用，而对所选的五种非小细胞肺癌细胞系，包括A549细胞(WT EGFR),PC‑9细胞(EGFR del E746‑A75),H520细胞(FGFR amplification)，H1581细胞(FGFR amplification)，H226细胞(FGFR amplification/overexpressed EGFR)，都有一定的抑制作用，表现出一定的抗肿瘤活性。
【技术实现步骤摘要】
1-(3,5-二甲氧基苯基)-3-(取代嘧啶-4-基)脲类化合物及其制备和应用
本专利技术涉及医药化学
，尤其涉及一种1-(3,5-二甲氧基苯基)-3-(6-(取代苯胺基)嘧啶-4-基)脲类EGFR/FGFR双重小分子抑制剂及其制备方法与应用。
技术介绍
受体酪氨酸激酶(Receptortyrosinekinases，RTKs)是人体中最大的一类酶联受体，人类基因组中已知的RTKs共有58种。RTKs在细胞生长、增殖、迁移和分化等活动中起着至关重要的作用，从表皮生长因子受体(epidermalgrowthfactorreceptors，EGFRs)、成纤维细胞生长因子受体(fibroblastgrowthfactorreceptors，FGFRs)、肝细胞生长因子受体(hepatocytegrowthfactorreceptors，HGFRs)、以及血小板衍生生长因子受体(platelet-derivedgrowthfactorreceptors，PDGFR)等许多RTKs发出的信号，已被药理学证明对表达相关蛋白质突变形式的癌症的生存至关重要。靶向这些失调的RTKs的酪氨酸激酶抑制剂(tyrosinekinaseinhibitors，TKIs)，可以给癌症患者带来明显的临床益处。RTKs中的EGFR和FGFR都已被充分表征为NSCLC的重要致癌驱动因素。在过去的十几年中，已有许多EGFR-TKIs被直接批准用于特定的NSCLC患者的临床治疗，例如第一代的EGFR-TKIs吉非替尼(Gefitinib)和厄洛替尼(Erlotinib)；第二代的EGFR-TKIs阿法替尼(Afatinib)；以及第三代的EGFR-TKIs奥希替尼(Osimertinib)。而作为另一重要的抗NSCLC的药物作用靶标FGFR，虽说还没有相对应的上市药物，但因为近年来，有大量的体外研究和独立实验表明，在NSCLC中存在着FGFR1的基因扩增和FGFR2的过表达。且在一项对59个NSCLC患者的定量RT-PCR实验中发现，NSCLC患者的肿瘤组织FGFR1的转录活性是癌旁组织的两倍多。因此，越来越多的FGFR-TKIs也正被报道用于治疗NSCLC的探索研究。然而，尽管已有多种化学型的小分子抑制剂作为EGFR-TKIs和FGFR-TKIs进行了抗NSCLC的广泛研究，但迄今为止，还没有真正可以作为两种激酶受体的双重小分子抑制剂的相关报道。已经证明，临床使用EGFR-TKIs如吉非替尼或阿法替尼治疗后，会以负反馈的方式增加NSCLC细胞株的FGFR1的扩增而产生耐药(原理见图1)，而通过基因沉默方式敲除FGFR1，或是同FGFR-TKIs进行联合用药处理，可以有效抑制耐药株的形成。由此可见，对EGFR靶向抑制而导致的FGFR负反馈活化，即旁路激活，也是EGFR-TKIs产生耐药抵抗的重要原因之一；并且，随着进行单细胞测序的能力提高，已有报道同时携带突变型EGFR和FGFR的致癌等位基因的肿瘤。考虑到，不同类别的药物联合使用，往往存在患者用药不便、药物相互作用或配伍禁忌，结果出现一些毒副作用或不良反应。所以，EGFR与FGFR的双重抑制剂的研发特别是对于NSCLC及其耐药治疗，具有迫切的临床需要和发展前景。
技术实现思路
本专利技术提供了一种1-(3,5-二甲氧基苯基)-3-(取代嘧啶-4-基)脲类化合物及其制备和应用，这类化合物具有较好的抗肿瘤活性，并可以在一定程度上防止耐药性的产生。本专利技术采用如下技术方案：本专利技术的1-(3,5-二甲氧基苯基)-3-(6-(取代苯胺基)嘧啶-4-基)脲类EGFR/FGFR双重小分子抑制剂的化学结构如下：表1-1：Y系列化合物的结构作为优选，所述的化合物1-(3,5-二甲氧基苯基)-3-(6-((5-碘-2-甲氧基苯基)氨基)嘧啶-4-基)脲(Y6)，化学结构如下：作为优选，所述的化合物1-(3,5-二甲氧基苯基)-3-(6-((2-甲氧基-5-(三氟甲基)苯基)氨基)嘧啶-4-基)脲(Y13)，化学结构如下：本专利技术还通了一种制备1-(3,5-二甲氧基苯基)-3-(6-(取代苯胺基)嘧啶-4-基)脲类EGFR/FGFR双重小分子抑制剂，包括第一步中间产物的合成：步骤一：取一干燥的三口反应瓶，放入磁石。加入4-氨基-6-氯嘧啶(1eq)，KI(0.5eq)，并用的无水乙醇(35mL)溶解。在磁力搅拌器上，搅拌加热10min后，加入三氟乙酸(200mL)。活化。大约1h后，加入无水乙醇(15mL)溶解的取代苯胺(0.8eq)反应。注意，要以滴加的方式加进去，以达到长时过量反应的效果，滴加时间控制在1h左右。步骤二：用TLC法，检测反应进程和反应效果。一般是反应36h后，反应几乎完全。反应完全后，先旋干溶剂无水乙醇，然后加入一定量的乙酸乙酯溶解。先用适量的20％的碳酸氢钠溶液除酸，后再加入一定量的50％的氯化钠溶液萃取分层，收集有机层并旋干至剩一定量，加入无水硫酸钠适量，除水过夜。步骤三：抽滤，制砂，称取原料总和15到20倍的柱层硅胶粉装柱，过柱收集产物点。一般先是用石油醚:乙酸乙酯＝2:1过出第一个点(苯胺类点)，石油醚:乙酸乙酯＝1:1过出第二个点(嘧啶类点)，乙酸乙酯或甲醇冲出产物点。收集旋干产物点，放烘箱干燥，打质谱及核磁，验证。本专利技术还提供了一种制备1-(3,5-二甲氧基苯基)-3-(6-(取代苯胺基)嘧啶-4-基)脲类EGFR/FGFR双重小分子抑制剂，包括：第二步中间产物的合成：步骤一：取一干燥的三口反应瓶，加入磁石。称取三光气(0.5eq)，并用二氯甲烷(20mL)溶解，超声使其充分。于0℃下，缓慢滴加二氯甲烷(10mL)溶解的3,5-二甲氧基苯胺(1eq)，每一分钟一滴，滴加时间控制在0.5h左右。滴毕，记得加2～3滴的三乙胺。加热回流反应3～6h,反应一般会完全。减压浓缩至干，剩余物用乙酸乙酯溶解，依次用10％的硫酸氢钾溶液除碱、20％的碳酸氢钠溶液除酸和50％的氯化钠溶液洗涤除无机相，收集有机相并旋干，经无水硫酸钠除水干燥过夜后，抽滤，制砂。步骤二：制砂，装柱，过出3,5-二甲氧基苯胺后，分离提纯异氰酸酯。送去打质谱和核磁，验证。本专利技术还提供了一种制备1-(3,5-二甲氧基苯基)-3-(6-(取代苯胺基)嘧啶-4-基)脲类EGFR/FGFR双重小分子抑制剂，其特征在于：第三步目标产物的合成：步骤一：取一干燥的三口反应瓶，加入磁石。称取的嘧啶苯胺(1eq)，异氰酸酯(1.2eq)，并用甲苯(10mL)溶解，于70～80℃加热回流反应8～10h，基本反应完全，TLC检测。冷却至室温，滤饼用甲苯洗涤2～3次，刮下后用乙酸乙酯溶解，20％的碳酸氢钠溶液洗涤除酸，再加入50％的氯化钠溶液萃取分层。收集并旋干有机层。步骤二：点板检测纯度，送去打质谱及核磁，验证。本专利技术的1-(3,5-二甲氧基苯基)-3-(6-(取代苯胺基)嘧啶-4-基)脲类衍生物可以用于肿瘤的治疗。本专利技术的1-(3,5-二甲氧基苯基)-3-(6-(取代苯胺基)嘧啶-4-基)脲类衍生物表现出一定的抗肿瘤活性。根据抗肿瘤活性测试结果，化合物Y6和Y13对五个非小细胞肺癌细胞系，都表现出了一定的抑制活性；其中，相对较好的是化合本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一种1‑(3,5‑二甲氧基苯基)‑3‑(取代嘧啶‑4‑基)脲类化合物，其特征在于，结构如式(I)所示：
【技术特征摘要】
1.一种1-(3,5-二甲氧基苯基)-3-(取代嘧啶-4-基)脲类化合物，其特征在于，结构如式(I)所示：式(I)中，R独立的选自C1～C5烷基、C1～C5烷氧基、卤素、三氟甲基、哌啶基中的一个或者多个。2.根据权利要求1所述的1-(3,5-二甲氧基苯基)-3-(取代嘧啶-4-基)脲类化合物，其特征在于，为化合物Y1～Y20，化合物Y1～Y20的结构如式(I)所示，其中，R的基团如下表所示：3.如权利要求2所述的1-(3,5-二甲氧基苯基)-3-(取代嘧啶-4-基)脲类化合物，其特征在于，为化合物1-(3,5-二甲氧基苯基)-3-(6-((5-碘-2-甲氧基苯基)氨基)嘧啶-4-基)脲(Y6)，化学结构如下：4.如权利要求2所述的1-(3,5-二甲氧基苯基)-3-(取代嘧啶-4-基)脲类化合物，其特征在于，为化合物1-(3,5-二甲氧基苯基)-3-(6-((2-甲氧基-5-(三氟甲基)苯基)氨基...
【专利技术属性】
技术研发人员：叶发青，程冬华，韩超，潘苏伟，潘雅倩，谢自新，
申请(专利权)人：温州医科大学，
类型：发明
国别省市：浙江,33
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