博来霉素在制备抑制牙齿萌出的药物中的应用制造技术

本发明专利技术涉及药品发明专利技术专利领域，公开了博来霉素在制备抑制牙齿萌出的药物中的应用，申请人发现，局部应用适当浓度博来霉素于靶向牙囊内，可达到抑制该牙齿萌出的作用，使其继续位于颌骨内，预防其诱发的邻近软硬组织疾病。应用博来霉素抑制牙齿萌出具有确定的效果，且具有良好的生物安全性，为临床预防及治疗阻生牙或埋伏牙及其并发症提供了一种微创、舒适、易行的新方法。

【技术实现步骤摘要】
博来霉素在制备抑制牙齿萌出的药物中的应用
本专利技术涉及药品专利技术专利领域，更具体涉及博来霉素在制备抑制牙齿萌出的药物中的应用，本专利技术的技术方案为预防及治疗阻生牙或埋伏牙及其并发症提供了一种微创、舒适、易行的新方法。
技术介绍
阻生牙或埋伏牙及其诱发的口腔颌面部炎症、肿瘤是口腔颌面外科最常见的疾病，好发于上、下颌第三磨牙，常导致邻近软硬组织不可逆性损伤或邻近间隙感染，且可能诱发颌骨肿瘤。因正畸或牙种植修复治疗计划，需预防性去除阻生牙或埋伏牙等潜在干扰因素。目前，临床上阻生牙或埋伏牙治疗方式主要有：手术拔除、正畸牵引等。正畸牵引适应症窄，仅能应用于少数病例。由于疾病本身特点及正畸、牙体牙髓等相关科室治疗需要，手术拔除阻生牙或埋伏牙成为临床上最主要的治疗方案。但手术过程复杂、手术对周边软硬组织创伤大、术后反应重、患者恐惧、主观感受痛苦等是当前手术治疗难以克服的。牙囊起源于外胚间充质，是包绕牙胚的一层疏松结缔组织。牙囊可形成牙槽骨、牙周膜、牙骨质等组织，引导牙根向正常方向生长并形成牙根，形成冠向萌出通道，其中牙囊干细胞或祖细胞是其中一类具有多分化潜能的细胞，在上述过程中扮演重要角色。临床手术去除阻生牙或埋伏牙时，常可发现其周围有牙囊包裹，且与成年人相比，青少年牙囊明显较厚，为早期影响牙囊结构和功能以抑制牙齿萌出的可行性进一步提供了临床依据。博来霉素(Bleomycin，BLM)是口腔颌面外科常用药物，可有效治疗血管瘤、静脉畸形、淋巴管畸形、黏液腺囊肿术后复发等口腔颌面部疾病，局部注射用药副作用小、未见明显全身毒性反应。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供博来霉素在制备抑制牙齿萌出的药物中的应用，本专利技术的技术方案为预防及治疗阻生牙或埋伏牙及其并发症提供了一种微创、舒适、易行的新方法。本专利技术另一个目的在于提供博来霉素在制备预防阻生牙或埋伏牙或其萌出诱发的疾病的药物中的应用。所述的疾病包括但不限于阻生牙或埋伏牙或其萌出诱发的口腔颌面部炎症、肿瘤等疾病。为了达到上述目的，本专利技术采用以下技术措施：博来霉素在制备抑制牙齿萌出的药物中的应用，包括以博来霉素为唯一有效成分或有效成分之一，制备成抑制牙齿萌出的药物。博来霉素在制备预防阻生牙或埋伏牙或其萌出诱发的疾病的药物中的应用，包括以博来霉素为唯一有效成分或有效成分之一制备成预防阻生牙或埋伏牙或其萌出诱发的疾病的药物，所述的疾病包括但不限于阻生牙或埋伏牙及其萌出诱发的口腔颌面部炎症、邻牙龋坏、邻牙牙根吸收、牙源性囊肿及肿瘤、颞下颌关节紊乱病、牙列拥挤、冠周炎、颌面部间隙感染以及不明原因的神经疼痛。所述阻生牙或埋伏牙为各种原因造成其在颌骨内位置不正常，不能萌出到正常咬合位置或仍位于颌骨内发育中的牙齿，临床主要表现为牙列缺损、错颌畸形或无明显自觉症状等。本专利技术与现有技术相比，具有以下优点和效果：1、本专利技术涉及的博来霉素(Bleomycin，BLM)新应用、给药方法，能够抑制靶向牙齿萌出，可作为一种干预阻生牙或埋伏牙萌出，或预防该类牙齿及其萌出诱发的疾病的微创、舒适、易行的保守治疗手段，减少患者身心痛苦，具有良好的临床应用潜能和价值。2、本专利技术涉及的博来霉素制剂，所需药物为口腔颌面外科常用药，制备简单易于应用。3、细胞实验证明：该专利技术所用的不同浓度博来霉素制剂处理人牙囊干细胞，未见明显抑制细胞生长，影响细胞周期及表面标志物表达，未见明显细胞毒性。博来霉素可以抑制牙囊干细胞的成骨、成脂分化潜能，增强细胞粘附力，抑制细胞迁移，且能下调牙齿萌出相关的基因和蛋白表达。4、Wistar大鼠实验证明0.5～2U/kg浓度博来霉素制剂牙囊内注射相比于对照侧，有明显的抑制靶向牙齿萌出作用，抑制效果在一定范围内呈浓度依赖性。5、Wistar大鼠免疫组织化学染色结果证明：博来霉素可下调牙囊组织中牙齿萌出相关蛋白的表达，并诱导牙囊组织向纤维组织方向转变，从而阻碍牙齿萌出。6、该专利技术所用的不同浓度博来霉素制剂局部注射于大鼠体内后，均未观察到体温异常波动、体重下降、恶心呕吐、厌食、黏膜溃疡等副反应；切取主要脏器心、肝、肾、肺、脾等，制作石蜡切片，HE染色后均未见明显异常改变。证明其具有良好的生物安全性。附图说明图1为不同浓度BLM处理人牙囊干细胞后其细胞特性变化示意图；其中：A为BLM处理12h及24h后细胞活性检测；B为BLM处理12h及24h后细胞周期检测；C为BLM处理12h及24h后细胞表面标记物检测；D为BLM处理24h后细胞成骨、成脂分化潜能改变。图2为不同浓度BLM处理人牙囊干细胞后其细胞黏附及迁移能力变化示意图；其中：A为BLM处理12h及24h后细胞黏附能力变化；B为BLM处理12及24h后细胞迁移能力变化。图3为不同浓度BLM处理人牙囊干细胞后RUNX2、α-SMA基因和蛋白表达情况示意图；图4为不同浓度BLM处理大鼠牙囊组织后牙齿萌出情况示意图；其中：A为各组大鼠在药物注射后1周、2周及3周下颌骨大体观；B为各组大鼠在药物注射后1周、2周及3周双侧下颌骨X线对比；C为各组大鼠在药物注射后1周、2周及3周双侧下颌骨masson染色。图5为不同浓度BLM处理大鼠牙囊组织后生物安全性指标检测示意图；其中：A为BLM注射后3周血常规检测示意图；B为BLM注射后3周肝肾功能检测示意图；C为BLM注射后3周内体重变化记录；D为BLM注射后3周内体温变化记录；E为BLM注射后3周内脏HE染色。图6为不同浓度BLM处理大鼠牙囊组织后RUNX2表达情况示意图；其中：A为BLM处理1周及3周后大鼠牙囊组织中RUNX2表达情况；B和C分别为BLM处理1周及3周后大鼠牙囊组织中RUNX2表达量的组织学评分。图7为不同浓度BLM处理大鼠牙囊组织后α-SMA表达情况示意图；其中：A为BLM处理1周及3周后大鼠牙囊组织中α-SMA表达情况；B和C分别为BLM处理1周及3周后大鼠牙囊组织中α-SMA表达量的评分。具体实施方式本专利技术所述技术方案，如未特别说明，均为本领域的常规方案；所述试剂或材料，如未特别说明，均来源于商业渠道。本专利技术实施例所用的博来霉素制剂是将博来霉素用生理盐水或磷酸缓冲盐溶液常温溶解成2U/ml的博来霉素溶液。实施例1：博来霉素(Bleomycin，BLM)对人牙囊干细胞的影响：其步骤如下：(1)用牙囊干细胞培养基将配制好的博来霉素制剂稀释到相应的药物浓度0.1mU/ml、1mU/ml、10mU/ml，先使用正常培养基培养人牙囊干细胞(hDFSCs)，待人牙囊干细胞贴壁生长后，更换上述稀释好的含博来霉素的培养基，并检测博来霉素处理12h及24h后hDFSCs细胞活性、细胞周期及细胞表面标记物表达情况。结果提示：不同浓度BLM处理后hDFSCs的细胞活性、细胞周期、细胞表面标记物未见明显统计学差异(图1中A-C)。(2)检测不同浓度BLM处理后hDFSCs的干细胞分化能力。结果示，hDFSCs的成骨、成脂能力在BLM处理后降低，并呈浓度依赖性(图1中D)。(3)检测不同浓度BLM处理12h及24h后hDFSCs在基质胶上的黏附能力。种入细胞20min后用PBS缓冲液冲洗细胞3次后，统计仍黏附在基质胶上的细胞，结果示：BLM处理后hDFSCs黏附能力增强，且BLM浓度越高，黏附能力增强越明显(图2本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.博来霉素在制备抑制牙齿萌出的药物中的应用。

【技术特征摘要】
1.博来霉素在制备抑制牙齿萌出的药物中的应用。2.博来霉素在制备预防阻生牙或埋伏牙或其萌出诱发的疾病的药物中的应用。3.根据权利要求2所述的应用，所述的疾病包括...

【专利技术属性】
技术研发人员：任建岗，王海涛，赵吉宏，王竟楠，李志政，夏厚福，蔡育，
申请(专利权)人：武汉大学，
类型：发明
国别省市：湖北,42