一种铂类衍生药物自我递送基因药物载体及其使用方法技术

本发明专利技术公开了一种铂类衍生药物自我递送基因药物载体，由多核铂配合物构成，所述多核铂配合物由下述物质反应而成：Pt(NH3)2(NO3)2和吡啶或吡嗪环。在耐药和不耐药的细胞水平上表明，自组装纳米颗粒具有一定的协同抑制细胞增殖能力；以及在细胞和活体水平的实验中显示，自组装的纳米颗粒可以有效的将siRNA和铂类配合物递送至靶向肿瘤组织和癌细胞中。

【技术实现步骤摘要】
一种铂类衍生药物自我递送基因药物载体及其使用方法
本专利技术涉及一种药物载体，更具体的说是涉及一种铂类衍生药物自我递送基因药物载体及其使用方法。
技术介绍
按照世界卫生组织(WHO)的定义，癌症是由于控制细胞分裂增殖的机制失常而引起的恶性肿瘤，其显著特征为异常细胞的快速且无限制地增殖，而且这些增生的细胞可能突破其固有范围入侵周围的正常组织，甚至经由体内循环系统或淋巴系统转移到身体的其他部分。癌症在全球范围内都严重威胁着人类的健康和生命，是造成人类死亡的重大恶性疾病之一。目前，铂类化合物的癌症治疗效果非常显著，但铂类药物的毒副作用及癌细胞对其产生的耐药性很大程度上限制了其临床上的进一步应用。近些年来，纳米材料作为铂类化合物药物载体在癌症的治疗中显示出巨大的优势和广阔的应用前景，已经成为国际上纳米科技和生物医药健康领域的重点研究方向之一。然而大部份纳米材料本身缺乏治疗药效，导致了多余的纳米材料载体本身就构成了安全隐患。特别是，没有充分代谢和从体内清除的载体会导致毒性。再者，大量的外源性纳米载体可以激活免疫系统，可能引起药物的清除和免疫毒性。另外，细胞也会达到药物载体摄取能力的极限，在获得有效治疗药物浓度之前，若细胞达到载体内吞极限的情况下，载体的药物负载能力将是治疗癌症的主要瓶颈。
技术实现思路
针对现有技术存在的不足，本专利技术的目的在于提供一种零载体药物自我递送体系，实现多靶点协同治疗的载体。为实现上述目的，本专利技术提供了如下技术方案：一种铂类衍生药物自我递送基因药物载体，由多核铂配合物构成，所述多核铂配合物由下述物质反应而成：Pt(NH3)2(NO3)2和吡啶或吡嗪环。作为本专利技术的进一步改进，所述Pt(NH3)2(NO3)2的结构式为：.作为本专利技术的进一步改进，所述Pt(NH3)2(NO3)2通过下述方法制备：将Pt(NH3)2Cl2通过AgNO3脱氯，得到Pt(NH3)2(NO3)2。作为本专利技术的进一步改进，所述Pt(NH3)2(NO3)2制备过程中，选用AgNO3的水溶液，在50～70℃下反应12～30小时，得到Pt(NH3)2(NO3)2水溶液。作为本专利技术的进一步改进，所述吡啶选用4，4-联吡啶，其结构式为：作为本专利技术的进一步改进，所述多核铂配合物的结构式为：作为本专利技术的进一步改进，所述多核铂配合物的反应条件为80～100℃下反应50～100小时，得到多核铂配合物水溶液。作为本专利技术的另一专利技术目的，提供一种以药物作为载体的基因药物载体的使用方法，将多核铂配合物水溶液和RNA溶液进行混合，搅拌10min。作为本专利技术的进一步改进，所述RNA选用siRNA。作为本专利技术的进一步改进，所述多核铂配合物和siRNA的比例为1～20∶1。本专利技术的有益效果，本专利技术制备的多核铂配合物本身具有治疗作用，同时还能够作为载体，将基因药物负载在其中，在进入人体后发挥双重作用。这样就不需要特别制备载体，以药物作为载体进行制备药物，实现“零载体”概念。附图说明图1为琼脂糖凝胶实验：(A)多核铂配合物和siRNA比例之间的优化，(B)和(C)多核铂配合物对siRNA在RNase和血清中的保护能力评估；图2为铂配合物和siRNA自组装纳米颗粒自我递送能力评估；图3为多核铂配合物和siRNA自组装纳米颗粒抑制肿瘤细胞能力评估：(A)MDA-MB-231肿瘤细胞增殖实验，(B)MDRMDA-MB-231耐药肿瘤细胞增殖实验。具体实施方式下面将结合附图所给出的实施例对本专利技术做进一步的详述。参照图1所示，一种肿瘤微环境多级响应的基因药物载体，由多核铂配合物构成，所述多核铂配合物由下述物质反应而成：Pt(NH3)2(NO3)2和吡啶或吡嗪环。作为改进的一种具体实施方式，所述Pt(NH3)2(NO3)2的结构式为：.作为改进的一种具体实施方式，所述Pt(NH3)2(NO3)2通过下述方法制备：将Pt(NH3)2Cl2通过AgNO3脱氯，得到Pt(NH3)2(NO3)2。作为本专利技术的进一步改进，所述Pt(NH3)2(NO3)2制备过程中，选用AgNO3的水溶液，在50～70℃下反应12～30小时，得到Pt(NH3)2(NO3)2水溶液。作为改进的一种具体实施方式，所述吡啶选用4，4-联吡啶，其结构式为：作为改进的一种具体实施方式，所述多核铂配合物的结构式为：作为改进的一种具体实施方式，所述多核铂配合物的反应条件为80～100℃下反应50～100小时，得到多核铂配合物水溶液。作为改进的一种具体实施方式，一种基因药物载体的使用方法，将多核铂配合物水溶液和RNA溶液进行混合，搅拌10min。作为改进的一种具体实施方式，所述RNA选用siRNA。作为改进的一种具体实施方式，所述多核铂配合物和siRNA的比例为2～20∶1。其具体反应方程式如下：如图1所述，通过琼脂糖凝胶实验首先研究了不同质量比(Pt/siRNA)下的siRNA亲和力，图1A所示，在Pt/siRNA＞1的时候，多核铂配合物就可以有效的亲和siRNA，图1B和C的琼脂糖凝胶实验显示，多核铂配合物可以有效地保护siRNA放在RNase或者血清的降解。Alexa555标记的siRNA和Pt配合物自组装纳米颗粒，将单独的siRAN和Pt/siRNA分别在MDA-MB-231三阴性乳腺癌细胞共同孵育6，24，48，72h，如下图2所示：激光共聚焦实验结果表明Pt/siRNA能有效地计入细胞浆，而Pt配合物需要进一步验证其所在亚细胞的位置。以及需要通过流式细胞仪定量分析siRNA的递送效率，和ICP-MS分析Pt配合物进细胞能力。如图3所示，和单独的多核铂配合物、siRNA药物相比较，自组装纳米颗粒在MDA-MB-231和MDRMDA-MB-231细胞能够显著性的抑制癌细胞增殖。以上初步试验结果表明，在耐药和不耐药的细胞水平上表明，自组装纳米颗粒具有一定的协同抑制细胞增殖能力；以及在细胞和活体水平的实验中显示，自组装的纳米颗粒可以有效的将siRNA和铂类配合物递送至靶向肿瘤组织和癌细胞中。以上所述仅是本专利技术的优选实施方式，本专利技术的保护范围并不仅局限于上述实施例，凡属于本专利技术思路下的技术方案均属于本专利技术的保护范围。应当指出，对于本
的普通技术人员来说，在不脱离本专利技术原理前提下的若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本专利技术的保护范围。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种铂类衍生药物自我递送基因药物载体，其特征在于：由多核铂配合物构成，所述多核铂配合物由下述物质反应而成：Pt(NH3)2(NO3)2和吡啶或吡嗪环。

【技术特征摘要】
1.一种铂类衍生药物自我递送基因药物载体，其特征在于：由多核铂配合物构成，所述多核铂配合物由下述物质反应而成：Pt(NH3)2(NO3)2和吡啶或吡嗪环。2.根据权利要求1所述的一种铂类衍生药物自我递送基因药物载体，其特征在于：所述Pt(NH3)2(NO3)2的结构式为：.3.根据权利要求1所述的一种铂类衍生药物自我递送基因药物载体，其特征在于：所述Pt(NH3)2(NO3)2通过下述方法制备：将Pt(NH3)2Cl2通过AgNO3脱氯，得到Pt(NH3)2(NO3)2。4.根据权利要求3所述的一种铂类衍生药物自我递送基因药物载体，其特征在于：所述Pt(NH3)2(NO3)2制备过程中，选用AgNO3的水溶液，在50～70℃下反应12～30小时，得到Pt(NH3)2(NO3)2水溶液。5.根据权利要求1所述的一种肿瘤微环境多级响应的基...

【专利技术属性】
技术研发人员：沈建良，钱宇娜，
申请(专利权)人：温州医科大学，
类型：发明
国别省市：浙江,33