本发明专利技术提供了一种miRNA‑378及其抑制剂的应用和应用其的产品,涉及医学工程技术领域,本发明专利技术提供的miRNA‑378通过实验发现在血管平滑肌细胞异常增殖相关疾病中明显高表达,通过对miRNA‑378进行特异性的检测能达到诊断血管平滑肌细胞异常增殖相关疾病的目的。将miRNA‑378的抑制剂作为药物,对血管平滑肌细胞异常增殖相关疾病将具有预防及治疗作用。因此,miRNA‑378可以作为一种新的生物标志物,应用血管平滑肌细胞异常增殖相关疾病的诊断;而与之相应的miRNA‑378的抑制剂,可以作为一种新型的药物用于血管平滑肌细胞异常增殖相关疾病的预防和/或治疗。
【技术实现步骤摘要】
miRNA-378及其抑制剂的应用和应用其的产品
本专利技术涉及医学工程
,尤其是涉及一种miRNA-378及其抑制剂的应用和应用其的产品。
技术介绍
血管平滑肌是指存在于血管壁且组成其主要部分的特定类型平滑肌,血管平滑肌的主要功能是通过收缩或松弛调节血管的管径。而血管平滑肌细胞(vascularsmoothmusclecell,VSMC)是维持血管张力和功能的主要细胞成分,正常情况下,血管壁为分化成熟的VSMC,以收缩型(分化型)为主,增殖速度极慢,通过舒一缩功能维持血管壁的紧张性。当血管壁受损或VSMC受到生长因子的刺激时,VSMC会从分化型转化为去分化型(分泌型),细胞进入分裂周期,获得增殖能力。VSMC转化为去分化型后,首先,从血管中膜迁移至血管内膜,然后,分裂增殖,并分泌大量的细胞外基质(extracellularmatrixc,ECM),使血管内膜增厚,形成新生的血管内膜。研究结果证实动脉粥样硬化、高血压或PTCA术后再狭窄等许多心血管疾病中血管结构和功能的改变都与血管壁中血管平滑肌细胞的变化密切相关。由于VSMC是唯一通过增殖、迁移及合成细胞外基质等生物学功能来修复血管壁的损伤,大量研究证实,动脉内膜损伤后,如果VSMC异常增殖,会导致血管内膜异常增生,从而引起动脉粥样硬化等血管增殖性疾病的发生。因而研究VSMC增殖的防治药物,对治疗动脉粥样硬化、血管内膜成形术后血管再狭窄等血管增殖性疾病十分必要。有鉴于此,特提出本专利技术。
技术实现思路
本专利技术的第一个目的在于提供miRNA-378在制备用于诊断血管平滑肌细胞异常增殖相关疾病的药物中的应用,本专利技术的第二个目的在于提供一种用于诊断血管平滑肌细胞异常增殖相关疾病的试剂盒,本专利技术的第三个目的在于提供miRNA-378的抑制剂在制备用于治疗和/或预防血管平滑肌细胞异常增殖相关疾病的药物中的应用,本专利技术的第四个目的在于提供一种用于治疗和/或预防血管平滑肌细胞异常增殖相关疾病的药物,以缓解现有技术中存在的对VSMC增殖的防治药物研究不足的技术问题。本专利技术提供了miRNA-378在制备用于诊断血管平滑肌细胞异常增殖相关疾病的药物中的应用,所述miRNA-378含有如SEQIDNO.1所示的核苷酸序列。进一步地,所述血管平滑肌细胞异常增殖相关疾病包括血管支架后再狭窄和/或动脉粥样硬化。本专利技术还提供了一种用于诊断血管平滑肌细胞异常增殖相关疾病的试剂盒,所述试剂盒包括用于特异性检测miRNA-378的引物。进一步地,所述用于特异性检测miRNA-378的引物包括如SEQIDNo.2所示序列的上游引物和如SEQIDNo.3所示序列的下游引物。本专利技术还提供了miRNA-378的抑制剂在制备用于治疗和/或预防血管平滑肌细胞异常增殖相关疾病的药物中的应用,所述miRNA-378含有如SEQIDNO.1所示的核苷酸序列。进一步地,所述血管平滑肌细胞异常增殖相关疾病包括血管支架后再狭窄和/或动脉粥样硬化。另外,本专利技术还提供了一种用于治疗和/或预防血管平滑肌细胞异常增殖相关疾病的药物,所述药物包括miRNA-378的抑制剂。进一步地,所述药物还包括药学上可接受的载剂或辅料。进一步地,所述药物的给药方式包括口服给药或者注射给药;优选地,所述注射给药包括静脉注射、肌肉注射、或者冠状动脉内注射。进一步地,所述miRNA-378的抑制剂具有如SEQIDNO.4所示的核苷酸序列;优选地,所述miRNA-378抑制剂的核苷酸序列的每个碱基均进行了2’-O-甲基修饰。本专利技术提供的miRNA-378通过实验发现在血管平滑肌细胞异常增殖相关疾病中明显高表达,通过对miRNA-378进行特异性的检测能达到诊断血管平滑肌细胞异常增殖相关疾病的目的。并且差异表达miRNA-378之后,能够明显的改变VSMC细胞的增殖、迁移和浸润等生物学功能。而且,miRNA-378的抑制剂通过抑制miRNA-378的表达,能够明显改善诱导动脉粥样硬化发生的VSMC的表型转换。将miRNA-378的抑制剂作为药物,导入血管或体内,对血管平滑肌细胞异常增殖相关疾病将具有预防及治疗作用。因此,miRNA-378可以作为一种新的生物标志物,应用血管平滑肌细胞异常增殖相关疾病的诊断;而与之相应的miRNA-378的抑制剂,可以作为一种新型的药物用于血管平滑肌细胞异常增殖相关疾病的预防和/或治疗。附图说明为了更清楚地说明本专利技术具体实施方式或现有技术中的技术方案,下面将对具体实施方式或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍,显而易见地,下面描述中的附图是本专利技术的一些实施方式,对于本领域普通技术人员来讲,在不付出创造性劳动的前提下,还可以根据这些附图获得其他的附图。图1为本专利技术实施例1提供的miRNA-378在动脉粥样硬化模型小鼠中主动脉中表达情况的结果图;图2为本专利技术实施例1提供的miRNA-378在动脉粥样硬化临床样本中的表达情况的结果图;图3A为本专利技术实施例2提供的采用MTT方法检测的HA-VSMC细胞增殖情况的结果图;图3B为本专利技术实施例2提供的采用EdU方法检测的HA-VSMC细胞增殖情况的结果图;图4A为本专利技术实施例3提供的采用划痕法检测细胞的迁移能力的显微结果图;图4B为本专利技术实施例3提供的采用划痕法检测细胞的迁移能力的折线结果图;图5A为本专利技术实施例3提供的采用Transwell法检测细胞的侵袭能力的显微结果图;图5B为本专利技术实施例3提供的采用Transwell法检测细胞的侵袭能力的统计结果图;图6A为本专利技术实施例4提供的采用westernblot检测VSMC表型转换标记蛋白a-SMA和smMHC2的表达的结果图;图6B为本专利技术实施例4提供的采用imageJ计算westernblot条带灰度值的结果图图7为本专利技术实施例5提供的生物信息学分析miRNA-378在不同物种中的下游靶标情况的结果图;图8A为本专利技术实施例6提供的采用real-timePCR检测CDK1的表达的结果图;图8B为本专利技术实施例6提供的采用westernblot检测CDK1的表达的结果图;图8C为本专利技术实施例6提供的采用westernblot检测CDK1的表达的结果图。具体实施方式下面将结合实施例对本专利技术的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例是本专利技术一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本专利技术保护的范围。本专利技术提供了miRNA-378在制备用于诊断血管平滑肌细胞异常增殖相关疾病的药物中的应用,所述miRNA-378含有如SEQIDNO.1所示的核苷酸序列:5’-CUCCUGACUCCAGGUCCUGUGU-3’(SEQIDNO.1)。其中,本专利技术中涉及的miRNA-378可以为:与SEQIDNO.1所示序列完全相同的序列,或者含有SEQIDNO.1所示序列的序列,或者SEQIDNO.1所示序列的生物活性功能片段,或者SEQIDNO.1所示序列的变体。凡是具备SEQIDNO.1所示序列功能的序列,都应当理解为本专利技术的保护范围,而不应当仅理解为与SEQIDNO.1所示序列完全相同的序列。在一些优选的实施方式中,所述血管平滑肌细胞本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.miRNA‑378在制备用于诊断血管平滑肌细胞异常增殖相关疾病的药物中的应用,所述miRNA‑378含有如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列。
【技术特征摘要】
1.miRNA-378在制备用于诊断血管平滑肌细胞异常增殖相关疾病的药物中的应用,所述miRNA-378含有如SEQIDNO.1所示的核苷酸序列。2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述血管平滑肌细胞异常增殖相关疾病包括血管支架后再狭窄和/或动脉粥样硬化。3.一种用于诊断血管平滑肌细胞异常增殖相关疾病的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括用于特异性检测miRNA-378的引物。4.根据权利要求3所述的试剂盒,其特征在于,所述用于特异性检测miRNA-378的引物包括如SEQIDNo.2所示序列的上游引物和如SEQIDNo.3所示序列的下游引物。5.miRNA-378的抑制剂在制备用于治疗和/或预防血管平滑肌细胞异常增殖相关疾病的药物中的应用,所述miRNA-378含有如SEQIDNO.1所...
【专利技术属性】
技术研发人员:于涛,杨艳艳,
申请(专利权)人:青岛大学,
类型:发明
国别省市:山东,37
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