一种解淀粉芽孢杆菌及其应用制造技术

技术编号:19770511 阅读:210 留言:0更新日期:2018-12-15 07:21
一种解淀粉芽孢杆菌及其应用,属于微生物技术领域。本发明专利技术一方面提供了一株新的解淀粉芽孢杆菌,另一方面提供了该解淀粉芽孢杆菌作为杀菌剂的应用。本发明专利技术提供的解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)hzq1601及其菌剂不仅能够防治植物病原细菌引起的植物病害,而且能够防止植物病原真菌引起的植物病害,抑菌效果好,防效高,克服了化学杀菌剂容易产生抗性的弊端。

【技术实现步骤摘要】
一种解淀粉芽孢杆菌及其应用
本专利技术属于微生物
,具体涉及一种解淀粉芽孢杆菌及其应用。
技术介绍
植物病原菌(包括真菌、细菌、病毒等)引起的植物病害给农业生产造成了重大的经济损失。目前对植物病害的防治主要是使用化学农药(杀菌剂),化学农药虽在农产品的安全生产中作出了巨大贡献,而杀菌剂多是单作用位点的内吸性药剂,长期使用产生了一系列问题,如病原菌产生抗药性、农产品农药残留超标,农田生态环境污染等问题。这些问题增加了农田生产成本,同时也使本身具有优良品质的农产品因农药的过度使用而受影响。新的防治技术和病害防治手段成为植保科技工作者探索的方向。植物周围不仅存在病原菌,而且还存在着大量的非病原菌,其中有的还是病原菌的拮抗微生物。这些拮抗微生物可通过与病原菌的抗生作用、竞争作用、重寄生作用及诱导植物产生系统抗性等机理来抑制病原菌,达到防治植物病害的目的。同时拮抗微生物不易使病原菌产生耐药性,有些还具有促进植物生长的作用,且实际生产工艺简单。此外,拮抗微生物对环境安全,不像化学农药那样造成环境污染以及对人畜的毒害,因此,利用拮抗微生物来防治植物病害的研究日益受到国内外的重视。目前,人们已经分离到多种对植物病害有不同程度防治效果的拮抗微生物,其中有些己经进入实际应用阶段,产生了相当的社会效益和经济效益。解淀粉芽孢杆菌能产生低分子量抗生素以及抗菌蛋白或多肽等活性物质,抑制植物病原菌的生长或直接杀灭病原物,通过营养和空间的竞争抑制病原菌的生长繁殖,或诱导植物体内防御机能,从而抑制病害的发生,具有抗病抑菌、抗逆防衰、改良土壤、降低农残等多种作用,具有广泛的工业应用前景。关于解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)在防治植物病害方面屡有报道,Ng等(2012)将解淀粉芽孢杆菌UPMS3和多种微生物混配的微生物菌肥,田间使用后显著提高了对穗瘟和叶瘟的生防效果,可以减少31%的水稻产量损失,对分蘖数、叶面积和株高的促生作用显著提高。李双东等(2015)报道解淀粉芽孢杆菌RL263发酵液对水稻叶瘟的防效最高可达到70%以上,能够显著提高水稻产量。已经发现,解淀粉芽孢杆菌对植物病原菌具有广谱抑菌性,但其抑菌的有效性仍具有极强的特异性,针对不同的病原菌需要筛选出特异的生防菌株才能达到最佳抑菌效果。目前,对于同时防治由水稻基腐病菌、水稻白叶枯病菌、甘薯茎腐病菌、番茄青枯病菌和黄瓜角斑病菌引起的植物病害以及水稻稻瘟病菌、水稻纹枯病菌、小麦赤霉病菌、葡萄灰霉病菌、葡萄溃疡病菌、葡萄白腐病菌和葡萄炭疽病菌引起的植物病害的解淀粉芽孢杆菌未见报道。
技术实现思路
针对现有技术存在的问题,本专利技术的目的在于设计提供一种解淀粉芽孢杆菌及其应用的技术方案。所述的解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)hzq1601,其保藏号为GDMCCNO:60355。所述的解淀粉芽孢杆菌在制备植物杀菌剂的应用。所述的植物杀菌剂,其特征在于由权利要求1所述的解淀粉芽孢杆菌制备得到。所述的植物杀菌剂,其特征在于包括解淀粉芽孢杆菌的菌体和代谢产物中的至少一种。所述的植物杀菌剂用于防治由植物病原细菌引起的植物病害,所述的植物病原细菌为水稻基腐病菌、水稻白叶枯病菌、甘薯茎腐病菌、番茄青枯病菌和黄瓜角斑病菌。所述的植物杀菌剂用于防治由植物病原真菌引起的植物病害,所述的植物病原真菌为水稻稻瘟病菌、水稻纹枯病菌、小麦赤霉病菌、葡萄灰霉病菌、葡萄溃疡病菌、葡萄白腐病菌和葡萄炭疽病菌。本专利技术中解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)hzq1601已保藏于广东省微生物菌种保藏中心(简称GDMCC,地址:广州市先烈中路100号大院59号楼5楼广东省微生物研究所,邮政编码:510075),保藏号为GDMCCNO:60355,保藏时间为:2018年4月16日,分类命名为Bacillusamyloliquefaciens。本专利技术提供的解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)hzq1601及其菌剂不仅能够防治植物病原细菌引起的植物病害,而且能够防止植物病原真菌引起的植物病害,抑菌效果好,防效高,克服了化学杀菌剂容易产生抗性的弊端。附图说明图1为解淀粉芽孢杆菌hzq1601菌落示意图;图2为解淀粉芽孢杆菌hzq1601对番茄青枯病菌的抑制效果图;图3为解淀粉芽孢杆菌hzq1601对甘薯茎腐病菌的抑制效果图;图4为解淀粉芽孢杆菌hzq1601对水稻白叶枯病菌的抑制效果图;图5为解淀粉芽孢杆菌hzq1601对水稻基腐病菌的抑制效果图;图6为解淀粉芽孢杆菌hzq1601对小麦赤霉病菌的抑制效果图;图7为解淀粉芽孢杆菌hzq1601对葡萄灰霉病菌的抑制效果图;图8为解淀粉芽孢杆菌hzq1601对葡萄白腐病菌的抑制效果图。具体实施方式以下结合实施例来进一步说明本专利技术。实施例1:解淀粉芽孢杆菌hzq1601的筛选样品采集:采集样品为水稻品种(甬优12)根围土壤,地点为浙江省农业科学院温室育苗地。连同水稻根系一同拔出,带回实验室分离。解淀粉芽孢杆菌分离:称取1g根围土壤,放入100mL无菌水中常温振荡混匀1个小时,用无菌水按照10、102、103梯度稀释,用微量移液器取梯度稀释液100ul用均匀在LB固体培养基平板,28℃培养箱培养24h后,接种针挑取单菌落在LB固体平板上用接种环划线培养后,得到纯化后的细菌单菌落,将单菌落用NA液体培养基28℃,200r/min振荡培养24小时后保存在50%甘油中,于-80℃超低温冰箱中保存备用。LB液体培养基:yeastextract5g,tryptone10g,NaCl5g,水1000ml,ph7.2,121℃灭菌15min。LB固体培养基:在液体培养基基础上加入15g琼脂粉。NA液体培养基:蛋白胨10.0g,牛肉粉3.0g,氯化钠5.0g,琼脂15.0g,pH7.2,121℃灭菌15min。NA固体培养基:在液体培养基基础上加入15g琼脂粉。PDA培养基:马铃薯200g,加水1000ml,煮沸后继续煮30min,双层纱布过滤除去固体物质,加水至1000ml,加15g琼脂粉分装灭菌(121℃,15min)。筛选:将备用的纯化菌株接种在预先混有水稻基腐病菌(DZ1601)(由浙江省农业科学院植物保护与微生物研究所粮食作物病害研究室分离并保存,下同)的LB培养基平板上,采用菌落对峙法,根据抑菌圈的大小逐一筛选(即:优先选取抑菌圈最大的菌落),即得解淀粉芽孢杆菌hzq1601。上述筛选方法为本领域常规方法。实施例2:解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)hzq1601的鉴定如图1所示,对实施例1筛选得到的解淀粉芽孢杆菌hzq1601在LB培养基上呈灰白色,不透明,表面干燥皱缩,边缘不规则,具有较强的粘附性和流动性,革兰氏染色阳性,周生鞭毛,有芽孢,呈杆状;该菌株既能在培养基表面生长又能沿着穿刺线生长,为兼性厌氧型细菌;能产生过氧化氢酶和淀粉水解酶,分解明胶和蛋白胨得色氨酸,但不能分解含硫的有机化合物;可还原培养基中的硝酸盐离子。根据对该解淀粉芽孢杆菌hzq1601的形态观察并结合生理生化特征,初步认定该解淀粉芽孢杆菌hzq16本文档来自技高网
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【技术保护点】
1.解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)hzq1601,其 保 藏 号 为 GDMCC NO:60355。

【技术特征摘要】
1.解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)hzq1601,其保藏号为GDMCCNO:60355。2.如权利要求1所述的解淀粉芽孢杆菌在制备植物杀菌剂的应用。3.植物杀菌剂,其特征在于由权利要求1所述的解淀粉芽孢杆菌制备得到。4.如权利要求3所述的植物杀菌剂,其特征在于包括解淀粉芽孢杆菌的菌体和代谢产物中的至少一种。5.如...

【专利技术属性】
技术研发人员:邱海萍柴荣耀张震王教瑜毛雪琴郝中娜杜新法王艳丽孙国昌
申请(专利权)人:浙江省农业科学院
类型:发明
国别省市:浙江,33

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