一种橘红珠药材质量检测方法技术

本发明专利技术公开了橘红珠药材的质量检测方法，该方法包括外观性状鉴别、显微鉴别、薄层鉴别、水分测定、总灰分测定、特征图谱鉴别和含量测定。所述方法均具有较强的专属性与良好的重现性。为建立统一可行的橘红珠药材质量标准提供了可操作性手段。以利于保护优质药材，避免以次充好，更好地保障临床用药的安全、有效。

【技术实现步骤摘要】
一种橘红珠药材质量检测方法
：本专利技术属于中药质量检测领域，特别是涉及橘红珠药材质量检测方法。
技术介绍
：橘红珠为芸香科植物化州柚(Citrusgrandis‘Tomentosa’)的未成熟幼小果实，又称橘珠、橘胎、橘红胎。化州柚生长于广东化州及其周边地域，始种于梁朝，至今已有约一千五百年的栽培历史。化州柚是柚而不是橘，其幼果之所以称为“橘红珠”，是借助了宋、明以来橘红的声誉。相关的文字记载，始见于1675年(康熙14年)《广东通志》，在高州府药之属类别下有如下描述：“粤中虽称沃壤，然风土浅薄赋质柔脆，人物同之，至于灵奇珍异，物亦独擅其美者，若…化州之橘红，增城之荔枝，琼南之香犀、象贝”。《广东省化州志》(1827年)卷十一引《橘红辨》：“化州所产橘红，医家以之利气化痰，功峻于他药。(果实)有红白瓤两种，明明柚也，无毫发异，而混呼之曰橘，且饰其色曰红。夫果有利于用，即存其名以著其实可也。奚必橘之贵而柚之贱哉。或曰柚诚柚也，何以他产不利于用，予曰此正所谓道地也。”清光绪十五年(1890年)《广东省高州府志》记载：“若夫化州之橘非橘也，柚也，天下之人皆橘之，吾亦不得不橘之。”化州柚早期作为药用时，其炮制方法也效仿橘红“去白取皮”，使用外果皮入药，即化橘红药材。而由于化州柚皮厚肉酸，不中食，在实际使用中，逐渐演变为使用未成熟幼果入药。化州柚幼果中大部分都是中果皮，其中柚皮苷、野漆树苷等药理活性成分含量很高，将其除去无疑是一种浪费，且耗费人力物力，不利于资源的合理利用。橘红珠最早收载于《广西中药志》(1963年)第二辑，用于“止渴，助消化，除胸中气滞。治食积，症瘕”；后亦收载于《中药大辞典》、《中华本草》。经过近50年的市场流通，橘红珠临床疗效确证，目前已成为化州柚的主流加工规格。橘红珠用药广泛，尤其是在两广地区；但是现行版国家药典及地方标准均尚未收载该品种。缺乏统一的质量标准，造成流通及使用中的混乱。
技术实现思路
本专利技术公开了橘红珠中药药材的质量检测方法，包括外观性状鉴别、显微鉴别、薄层鉴别、水分测定、总灰分测定、特征图谱鉴别和含量测定方法。为建立统一的、可行的橘红珠药材质量标准提供可操作性手段。本专利技术所述的橘红珠外观性状鉴别方法包括如下步骤：鉴别方法：检视供试品的外观性状，并拍照记录；使用游标卡尺测量果实横向直径与纵向直径，以其平均值作为果实直径；供试品外观应呈近球形、半球形或圆柱形，表面墨绿色或灰绿色，密布茸毛，有皱纹及小油室，先端有花柱脱落的痕迹，基部有呈圆形果柄的疤痕；质坚硬，不易切开，断面平整，黄白色或淡红棕色，有脉络纹。外缘有一列不整齐的下凹的油室。气芳香，味苦、微辛。选定果实直径作为外观性状指标，可将橘红珠药材分为一等、二等、三等、四等4个等级，一等：果实直径不超过4cm；二等：果实直径不超过5cm；三等、四等：果实直径不超过6cm。本专利技术所述的橘红珠显微鉴别包括如下步骤：供试品制备：供试品粉碎，过二号筛，混合均匀。取适量于载玻片上，滴数滴水合氯醛溶液将粉末浸润后，酒精灯加热，再滴加适量稀甘油溶液，充分混合，盖上盖玻片；鉴别方法：将制好的玻片置于显微镜下观察，供试品粉末黄棕色至棕褐色。中果皮薄壁细胞形状不规则，壁不均匀增厚，有的作连珠状或在角隅处特厚。果皮表皮细胞表面观多角形、类方形或长方形，垂周壁增厚，气孔类圆形，直径18～31μm，副卫细胞5～7个，侧面观外被角质层，靠外方的径向壁增厚。可见碎断的非腺毛，碎断细胞多至十数个，最宽处直径约33μm，具壁疣或外壁光滑、内壁粗糙，胞腔内含淡黄色或棕色颗粒状物。草酸钙方晶成片或成行存在于中果皮薄壁细胞中，呈多面形、菱形、棱柱形、长方形或形状不规则，直径1～32μm，长5～40μm。导管为螺纹导管和网纹导管。偶见石细胞及纤维。本专利技术所述的橘红珠薄层鉴别方法包括如下步骤：供试品溶液的制备：取供试品粉末0.5g，加甲醇5ml，超声处理15分钟，离心，取上清液作为供试品溶液；对照品溶液的制备：取柚皮苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；展开剂：乙酸乙酯∶丙酮∶冰乙酸∶水＝8∶4∶0.3∶1；鉴别方法：吸取供试品溶液和对照品溶液各2μl，分别点于同一高效硅胶G薄层板上，展开，取出，晾干，喷5％三氯化铝乙醇溶液，在105℃加热1分钟，置波长365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。本专利技术所述的橘红珠水分测定方法包括如下步骤：供试品制备：供试品粉碎，过二号筛，取2～5g，平铺于干燥至恒重的扁形称量瓶中；测定方法：精密称定装有供试品的称量瓶，开启瓶盖在100～105℃干燥5小时，将瓶盖盖好，移置干燥器中，放冷30分钟，精密称定，再在上述温度干燥1小时，放冷，称重，至连续两次称重的差异不超过5mg为止。根据减失的重量，计算供试品中含水量小于12.0％。本专利技术所述的橘红珠总灰分测定方法包括如下步骤：供试品制备：供试品粉碎，过二号筛，混合均匀后，取2～3g，置炽灼至恒重的坩埚中，称定重量(准确至0.01g)，缓缓炽热，至完全炭化时，逐渐升高温度至500～600℃，使完全灰化并至恒重；测定方法：根据残渣重量，计算供试品中总灰分的含量小于4.5％。本专利技术所述的橘红珠特征图谱方法包括如下步骤：供试品溶液的制备：取供试品粉末，过二号筛约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加甲醇10ml，称定重量，超声处理，30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液；参照物溶液的制备：取柚皮苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含柚皮苷500μg的溶液，作为参照物溶液。色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇为流动相A，以2％醋酸溶液为流动相B，梯度洗脱程序为：0～25分钟，30％流动相A，70％流动相B；25～75分钟，30％→45％流动相A，70％→55％流动相B；75～110分钟，45％→100％流动相A，55％→0％流动相B；110～120分钟，100％流动相A，0％流动相B；流速为每分钟1ml，检测波长为320nm；测定方法：分别精密吸取参照物溶液和供试品溶液各5μl，注入液相色谱仪，记录120分钟的色谱图；供试品特征图谱中应呈现4个特征峰，其中特征峰1应与相应的参照物峰保留时间相同；与柚皮苷参照物峰相应的峰为S峰，计算特征峰2～4的相对保留时间，特征峰2、3的相对保留时间应在规定值的±5％之内，特征峰4的相对保留时间应在规定值的±6％之内，规定值为：1.49(峰2)、1.74(峰3)、3.19(峰4)。本专利技术所述的橘红珠含量测定方法包括如下步骤：供试品溶液的制备：取供试品粉末，过二号筛，取约50mg，精密称定，置10ml容量瓶中，精密加入甲醇5ml，超声处理30分钟(150W，40kHz)，放冷，加50％甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，作为供试品溶液；对照品溶液的制备：取柚皮苷、野漆树苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml分别含柚皮苷400μg、野漆树苷10μg的溶液，作为对照品溶液；色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-0.3％醋酸溶液(体积比为35∶65)为流动相；检测波长为283nm、338nm；测定方法：分别精密吸取对本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种橘红珠药材质量检测方法，包括外观性状鉴别、显微鉴别、薄层鉴别、水分测定、总灰分测定、特征图谱鉴别和含量测定，其特征在于所述薄层鉴别包括以下步骤：供试品溶液的制备：取待检供试品粉末按1:5‑10的料液比，加甲醇，超声处理，取上清液作为供试品溶液；对照品溶液的制备：取柚皮苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；展开剂：乙酸乙酯∶丙酮∶冰乙酸∶水＝8∶4∶0.3∶1；鉴别方法：取供试品和对照品溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，展开，取出，晾干，喷5％三氯化铝乙醇溶液，在105℃加热1分钟，置波长365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

【技术特征摘要】
1.一种橘红珠药材质量检测方法，包括外观性状鉴别、显微鉴别、薄层鉴别、水分测定、总灰分测定、特征图谱鉴别和含量测定，其特征在于所述薄层鉴别包括以下步骤：供试品溶液的制备：取待检供试品粉末按1:5-10的料液比，加甲醇，超声处理，取上清液作为供试品溶液；对照品溶液的制备：取柚皮苷对照品，加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液；展开剂：乙酸乙酯∶丙酮∶冰乙酸∶水＝8∶4∶0.3∶1；鉴别方法：取供试品和对照品溶液各2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，展开，取出，晾干，喷5％三氯化铝乙醇溶液，在105℃加热1分钟，置波长365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。2.如权利要求书1所述的检测方法，其特征在于所述外观性状鉴别包括以下步骤：检视待检测供试品的外观性状，拍照记录；使用游标卡尺测量果实横向直径与纵向直径，以其平均值作为果实直径；供试品呈近球形、半球形或圆柱形，表面墨绿色或灰绿色，密布茸毛，有皱纹及小油室，先端有花柱脱落的痕迹，基部有呈圆形果柄的疤痕；质坚硬，不易切开，断面平整，黄白色或淡红棕色，有脉络纹，外缘有一列不整齐的下凹的油室，气芳香，味苦、微辛，果实直径小于6cm。3.如权利要求书2所述的检测方法，其特征在于所述果实直径小于4cm。4.如权利要求书1所述的检测方法，其特征在于所述显微鉴别包括以下步骤：供试品制备：供试品粉碎，取适量于载玻片上，滴水合氯醛溶液将粉末浸润后，酒精灯加热，再滴加适量稀甘油溶液，制成检材；鉴别方法：将检材置于显微镜下观察；供试品粉末黄棕色至棕褐色；中果皮薄壁细胞形状不规则，壁不均匀增厚，有的作连珠状或在角隅处特厚；果皮表皮细胞表面观多角形、类方形或长方形，垂周壁增厚，气孔类圆形，直径18～31μm，副卫细胞5～7个，侧面观外被角质层，靠外方的径向壁增厚；可见碎断的非腺毛，碎断细胞多至十数个，最宽处直径约33μm，具壁疣或外壁光滑、内壁粗糙，胞腔内含淡黄色或棕色颗粒状物；草酸钙方晶成片或成行存在于中果皮薄壁细胞中，呈多面形、菱形、棱柱形、长方形或形状不规则，直径1～32μm，长5～40μm；导管为螺纹导管和网纹导管，偶见石细胞及纤维。5.如权利要求书1所述的检测方法，其特征在于所述水分测定包括以下步骤：供试品制备：供试品粉碎，过二号筛，取2～5g，平铺于干燥至恒重的扁形称量瓶中；测定方法：精密称定装有供试品的称量瓶，开启瓶盖在100～105℃干燥5小时，将瓶盖盖好，移置干燥器中，放冷30分钟，精密称定，再在上述温度干燥1小时，放冷，称重，至连续两次称重的差异不超过5mg为止，根据减失的重量，...

【专利技术属性】
技术研发人员：李泮霖，苏薇薇，廖弈秋，彭维，
申请(专利权)人：中山大学，
类型：发明
国别省市：广东,44