氨基正己酰氨基甲环酰氨基正己酰碱性氨基酸，其合成，活性和应用，本发明专利技术公开了下式的(N‑氨基正己酰氨甲环酰)‑氨基正己酰‑AA(式中AA为L‑Lys残基和L‑Arg残基)。公开了它们的制备方法、公开了它们的抗肿瘤活性，公开了它们的抗肿瘤转移活性，以及公开了它们的抗炎活性活性，因而本发明专利技术公开了它们在制备抗肿瘤药物，抗肿瘤转移药物和抗炎药物中的应用。
【技术实现步骤摘要】
氨基正己酰氨基甲环酰氨基正己酰碱性氨基酸，其合成，活性和应用
本专利技术涉及(N-氨基正己酰氨甲环酰)-氨基正己酰-AA，涉及它们的制备方法、涉及它们的抗肿瘤活性，涉及它们的抗肿瘤转移活性,以及涉及它们的抗炎活性活性，因而本专利技术涉及它们在制备抗肿瘤药物，抗肿瘤转移药物和抗炎药物中的应用。本专利技术属于生物医药领域。
技术介绍
侵袭和转移过程是恶性肿瘤的基本生物学特征，是肿瘤研究工作的困境之一。癌症转移是肿瘤患者发病和死亡的主要原因，约占癌症死亡人数的90％。目前对肿瘤浸润转移的研究已从不同方面进行了深入的探讨。其中，尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)系列在肿瘤侵袭转移中的作用成为当今研究的热点之一。尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)系统，这是一种丝氨酸蛋白酶家族，在肿瘤的浸润转移起着至关重要的作用。该系统包括尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)、尿激酶受体(uPAR)、纤溶酶原激活物抑制剂(PAI)，该系统涉及多种生理和病理过程，包括细胞迁移，血管生成，炎症，胚胎发育，肿瘤生长和转移。氨基正己酸能与纤溶酶原激活物产生竞争性抑制，使纤溶酶原不能激活为纤溶酶，是临床上治疗纤溶性出血药物。氨甲环酸与纤溶酶原结合，同样能发挥抗纤溶作用。两者分别能通过阻止uPA/uPAR相互作用和抑制纤溶酶活化来达到抑制uPA系统的相关作用。氨基正己酸和氨甲环酸抑制uPA系统的最低有效剂量分别为3.8mmol/kg和3.2mmol/kg。专利技术人认为它们的毒副作用与它们的最低有效剂量高有直接关系。专利技术人认识到先将两种已知的uPA系统抑制剂合理组合，再连接氨基酸而构建的新型u-PA抑制剂在低剂量下就应具有抗肿瘤、抗肿瘤转移和抗炎三重作用。根据这种认识，经过3年探索，发现用碱性氨基酸(L-Lys和L-Arg)修饰的氨基正己酰甲环酰氨基正己酸衍生物在0.5μmol/kg剂量下不仅具有抗肿瘤转移活性，而且同时具有抗肿瘤和抗炎的活性。因为药物的毒副作用都可以随剂量降低而消失，所以有效剂量比氨基正己酸和氨甲环酸至少降低6400倍表明了这种结构修饰有突出的技术效果。根据这些发现，专利技术人提出了本专利技术。
技术实现思路
本专利技术的第一个内容是提供下式的(N-氨基正己酰氨甲环酰)-氨基正己酰-AA(式中AA为L-Lys残基和L-Arg残基)。本专利技术的第二个内容是提供(N-氨基正己酰氨甲环酰)-氨基正己酰-AA(AA为L-Lys残基和L-Arg残基)的合成方法，该方法包括：(1)Boc-氨甲环酸与氨基正己酸甲酯缩合得Boc-氨甲环酰基氨基正己酸甲酯(1)；(2)Boc-氨甲环酰基-氨基正己酸甲酯在氯化氢的乙酸乙酯溶液中脱Boc得氨甲环酰基氨基正己酸甲酯(2)；(3)Boc-氨基正己酸与氨甲环酰基氨基正己酸甲酯(2)缩合得(N-Boc-氨基正己酰氨甲环酰)-氨基正己酸甲酯(3)；(4)化合物3皂化脱甲基得到(N-Boc-氨基正己酰氨甲环酰)-氨基正己酸(4)；(5)化合物4在氯化氢的乙酸乙酯溶液中脱Boc得(N-氨基正己酰氨甲环酰)-氨基正己酸(7)；(6)化合物4与AA-OBzl(AA为L-Lys残基和L-Arg残基)缩合得(N-Boc-氨基正己酰氨甲环酰)-氨基正己酰基氨基酸苄酯(5a,b)。(7)化合物5a,b先氢解脱苄氧羰基、再在氯化氢的乙酸乙酯溶液中脱Boc得到(N-氨基正己酰基氨甲环酰)-氨基正己酰-AA(6a,b)(AA为L-Lys残基和L-Arg残基)。本专利技术的第三个内容是评价(N-氨基正己酰氨甲环酰)-氨基正己酰-AA(AA为L-Lys残基和L-Arg残基)抑制C57BL/6小鼠抗肺癌转移活性。本专利技术的第四个内容是评价(N-氨基正己酰氨甲环酰)-氨基正己酰-AA(AA为L-Lys残基和L-Arg残基)对S180小鼠肿瘤生长的抑制应用。本专利技术的第五个内容是评价(N-氨基正己酰氨甲环酰)-氨基正己酰-AA(AA为L-Lys残基和L-Arg残基)对ICR小鼠炎症的抑制作用。附图说明图1(N-氨基正己酰氨甲环酰)-氨基正己酰-AA的合成路线.5a和6a中AA为L-Lys残基；5b和6b中AA为L-Arg残基。i)二环己基碳二亚胺(DCC),1-羟基苯并三唑(HOBt),N-甲基吗啉(NMM),干燥四氢呋喃(THF)；ii)氯化氢的乙酸乙酯溶液(4M)；iii)CH3OH,2MNaOH；iv)Pd/C,H2,CH3OH；氯化氢的乙酸乙酯溶液(4M)。具体实施方式为了进一步阐述本专利技术，下面给出一系列实施例。这些实施例完全是例证性的，它们仅用来对本专利技术进行具体描述，不应当理解为对本专利技术的限制。实施例1制备(N-Boc-氨甲环酰)-氨基正己酸甲酯(1)将0.69g(2.68mmol)Boc-氨甲环酸混悬于50mL干燥四氢呋喃中，在0℃下依次加入0.66g(3.20mmol)二环己基碳二亚胺(DCC)和0.44g(3.26mmol)1-羟基苯并三唑(HOBt)，搅拌30min。然后加入0.49g(2.70mmol)氨基正己酸甲酯，并用N-甲基吗啉(NMM)调节溶液pH至9，室温搅拌6h后TLC(二氯甲烷/甲醇＝30/1)显示反应完成。减压浓缩除去溶剂，残留物用50mL乙酸乙酯溶解，过滤得滤液。滤液先后用20mL饱和NaHCO3溶液洗涤3次，20mL饱和NaCl溶液洗涤3次，20mL饱和KHSO4溶液洗涤3次，20mL饱和NaCl溶液洗涤3次，20mL饱和NaHCO3溶液洗涤3次，20mL饱和NaCl溶液洗涤3次，乙酸乙酯层用无水硫酸钠干燥12h。过滤，滤液减压浓缩至干，得到0.83g(80％)标题化合物，为无色固体。ESI-MS(m/e)：385[M+H]+。实施例2制备N-氨甲环酰基-氨基正己酸甲酯·盐酸盐(2)搅拌下将6.00g(15.62mmol)化合物1与60mL氯化氢的乙酸乙酯溶液(4M)在-10℃缓慢混合，并保持-10℃搅拌5h。TLC(二氯甲烷/甲醇＝30/1)显示反应完成。减压浓缩，残留物用无水乙酸乙酯溶解，得到的溶液减压浓缩。该操作重复3次。固体再用无水乙醚充分悬浮，去乙醚，得到的无色固体直接用于下一步反应。ESI-MS(m/e):322[M+H]+。实施例3制备(N-Boc-氨基正己酰氨甲环酰)-氨基正己酸甲酯(3)采用实施例1的方法，从3.36g(14.55mmol)Boc-氨基正己酸和4.67g(14.57mmol)化合物2得到淡黄色固体。该固体用乙酸乙酯充分磨洗，得到6.20g(85％)标题化合物，为无色固体。ESI-MS(m/e)：498[M+H]+。实施例4制备(N-Boc-氨基正己酰氨甲环酰)-氨基正己酸(4)将6.20g(12.47mmol)化合物3溶于20mL甲醇，0℃用NaOH水溶液(2M)调节pH至12。控制0℃和pH12搅拌4h，TLC(二氯甲烷/甲醇＝25/1)显示反应完成。反应混合物用饱和KHSO4溶液调节pH至7，减压浓缩。残留物继续用饱和KHSO4溶液调节pH至2，用乙酸乙酯萃取，将乙酸乙酯层合并，用饱和NaCl溶液洗涤至中性。乙酸乙酯相用无水硫酸钠干燥12h。过滤，滤液减压浓缩至干，得到4.60g(76％)标题化合物，为无色固体。ESI-MS(m/e)：484[M+H]+。实施例5制备(N-氨基正己酰氨甲环酰)本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.下式的(N‑氨基正己酰氨甲环酰)‑氨基正己酰‑AA，
【技术特征摘要】
1.下式的(N-氨基正己酰氨甲环酰)-氨基正己酰-AA，式中AA为L-Lys残基和L-Arg残基。2.权利要求1的(N-氨基正己酰氨甲环酰)-氨基正己酰-AA的制备方法，该方法包括：(1)Boc-氨甲环酸与氨基正己酸甲酯缩合得Boc-氨甲环酰基氨基正己酸甲酯(1)；(2)Boc-氨甲环酰基-氨基正己酸甲酯在氯化氢的乙酸乙酯溶液中脱Boc得氨甲环酰基氨基正己酸甲酯(2)；(3)Boc-氨基正己酸与氨甲环酰基氨基正己酸甲酯(2)缩合得(N-Boc-氨基正己酰氨甲环酰)-氨基正己酸甲酯(3)；(4)化合物3皂化脱甲基得到(N-Boc-氨基正己酰氨甲环酰)-氨基正己酸(4)；(5)化合物4在氯化氢的乙酸乙酯溶液中脱Boc得(...
【专利技术属性】
技术研发人员：赵明，彭师奇，王玉记，吴建辉，黄凌燕，
申请(专利权)人：首都医科大学，
类型：发明
国别省市：北京,11
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