维生素B12液态有机肥的制备方法及该有机肥培养富含维生素B12蔬菜的应用技术

一种维生素B12液态有机肥的制备方法及该有机肥培养富含维生素B12蔬菜的应用，属于农产品培养技术领域。该维生素B12液态有机肥的制备方法包括以下步骤：1）取豆腐黄水盛放于锥形瓶中，灭菌处理,自然冷却至35℃后，接入10

【技术实现步骤摘要】
维生素B12液态有机肥的制备方法及该有机肥培养富含维生素B12蔬菜的应用
本专利技术属于农产品培养
，具体涉及一种维生素B12液态有机肥的制备方法及该有机肥培养富含维生素B12蔬菜的应用。
技术介绍
维生素B12又叫钴胺素，为浅红色的针状结晶，是一种含有3价钴的多环系化合物，4个还原的吡咯环连在一起变成为1个咕啉大环（与卟啉相似），见光易分解。它的主要生理功能是参与制造骨髓红细胞，防止恶性贫血；防止大脑神经受到破坏。近年来，在药理作用、食品等发面的研究有较大进展。目前，人们对于维生素B12的认知程度并不高，大多数人都不知道缺乏维生素B12会对人体带来哪些危害。自然界中的维生素B12主要是通过草食动物的瘤胃和结肠中的细菌合成的，因此，其膳食来源主要为动物性食品，其中动物内脏、肉类、蛋类是维生素B12的丰富来源，豆制品经发酵会产生一部分维生素B12，人体肠道细菌也可以合成一部分，但植物性食品中一般不含维生素B12。因此，我们致力于开发一种是蔬菜富含维生素B12的培养方法，使素食主义者的日常饮食中能补充到需要的维生素B12。从豆制品经发酵后会产生一部分维生素B12我们受到了启发，我国大部分豆制品加工厂会产生大量加工废水，其中最主要的来源是生产过程中黄豆清洗浸泡产生的泡豆水以及磨浆产生的豆腐黄水，豆腐黄水就成了被利用的对象，经谢氏丙酸菌发酵后产生的发酵液富含维生素B12，将发酵液用来培养菠菜不仅能减少由于直接使用维生素B12带来的高成本，而且能为豆腐黄水对环境的污染提供一种有效的环保的解决方案，实现经济、健康和环境的三赢。
技术实现思路
针对现有技术存在的问题，本专利技术的目的在于设计提供一种维生素B12液态有机肥的制备方法及该有机肥培养富含维生素B12蔬菜的应用的技术方案。所述的一种维生素B12液态有机肥的制备方法，其特征在于包括以下步骤：1）取豆腐黄水盛放于锥形瓶中，灭菌处理,自然冷却至35℃后，接入106CFU/mL～107CFU/mL谢氏丙酸菌，并在30℃恒温箱中培养72h；2）取步骤1）得到的发酵液离心处理，离心后取上层清液，4℃保存备用，得到维生素B12液态有机肥。所述的一种维生素B12液态有机肥的制备方法，其特征在于所述的步骤1）中豆腐黄水灭菌条件为：121℃、15min。所述的一种维生素B12液态有机肥的制备方法，其特征在于所述的步骤2）中离心条件为：4℃，8000r/min离心10min。所述的有机肥在培养富含维生素B12蔬菜中的应用。所述的应用，其特征在于包括以下步骤：1）将蔬菜种子发育成壮苗；2）取维生素B12液态有机肥1～2L,加入购自韶关市曲江康如生物科技有限公司的500倍高浓缩栽培营养液果蔬栽培营养液4mLA液，混匀后再加入4mLB液，再加入20～24mg酪蛋白和20～24mg浓度为10～12mg/ml的ε-多聚赖氨酸，使溶质充分溶解在其中，补充蒸馏水至2.1L，调节pH至5.8～6.3，然后倒入水培管；3）待苗龄到18～20天时，将步骤1）中的幼苗从土壤中起出，对幼苗消毒、清洗进行处理；4）将处理好的的蔬菜幼苗定植到步骤2）的水培管中，并用黑色纱网对透光的小孔做避光处理；5）将水培管放置室外通风、见光处，温度20℃，每隔24h用酸度计测一次pH值，若低于6.3，用0.5%的NaOH液加以调整，培养至成熟期。所述的应用，其特征在于所述的步骤1）中将蔬菜种子发育成壮苗具体为：将蔬菜种子播种在定植杯中，定植杯中先装入陶粒，高度距杯底2cm，播后用细沙覆盖，淋水，置于阳光充足的地方，温度20℃，2～3片真叶时定苗，每杯留1株壮苗。所述的应用，其特征在于所述的步骤3）中小苗处理步骤为：a用清水洗掉根系的土壤或其他栽培基质；b剪掉老根或死根、死皮及多余的侧生根；c用水培植物消毒液浸泡根系15～20分钟，杀菌，消毒，并起到驯化作用；d再次用清水冲洗2遍。本专利技术结合豆腐黄水发酵和蔬菜的水培技术，并采用酪蛋白做维生素B12保护剂，ε-多聚赖氨酸做杀菌剂，培养出富含维生素B12的蔬菜。该技术最大程度的保留了蔬菜的营养价值，同时使蔬菜富含维生素B12，具有很好的市场前景。与现有技术相比，本专利技术具有如下优点：1.利用工业废水的豆腐黄水经谢氏丙酸菌发酵产生维生素B12，制备的新型液态维生素B12液态有机肥，环保又经济。2.采用酪蛋白做蛋白保护剂，防止维生素B12被光解。3.利用含维生素B12的豆腐黄水发酵液应用与水培富含维生素B12的蔬菜，可以解决动物性食物是维生素B12唯一膳食来源问题，对于严格素食主义有着预防因维生素B12缺乏而引起急性贫血、营养不良等作用。附图说明图1为实施例1中在添加0L,1L豆腐黄水发酵液的水培营养液水培0h,12h,24h,36h,48h菠菜，收集的根、茎、叶部位的维生素B12含量；图2为在添加0L,2L豆腐黄水发酵液的水培营养液水培0h,12h,24h,36h,48h菠菜，收集的根、茎、叶部位的维生素B12含量。具体实施方式以下结合实施例来进一步说明本专利技术。实施例11）种子发育将菠菜种子播种在定植杯中，杯中先装入陶粒，高度距杯底2cm，播后用细沙覆盖，淋水，置于阳光充足的地方，温度20℃左右，2～3片真叶时定苗，每杯留1株壮苗。2）豆腐黄水发酵取豆腐黄水2L，盛放于5L锥形瓶中，扎口，高温蒸汽灭菌锅121℃条件下灭菌15min，自然冷却至35℃左右后，将浓度为106CFU/mL的谢氏丙酸菌（Propionibacteriumshermannii）接入，放入30℃恒温培养箱中培养72h，每隔24h测一次pH与OD值。发酵液在4℃，8000r/min条件下离心10min，得到维生素B12液态有机肥。取1mL72h的维生素B12液态有机肥用高效液相色谱仪测维生素B12的浓度。3）营养液配制取步骤2）得到的维生素B12液态有机肥1L,加入购自韶关市曲江康如生物科技有限公司的500倍高浓缩栽培营养液果蔬栽培营养液4mLA液（成分：氮1%，磷3%，钾5%，钙1%，微量元素等），混匀后再加入4mLB液（成分：氮3%，添加铁元素等），混匀，最后加入20mg酪蛋白（蛋白保护剂）和等量的ε-多聚赖氨酸（可食用杀菌剂），使其充分溶解在其中，补加蒸馏水至2.1L,调节pH至6.3，倒入水培管。4）清洗根将小苗从土壤中起出，做特殊处理，如下：①用清水洗掉根系的土壤或其他栽培基质；②剪掉老根或死根、死皮及多余的侧生根；③用水培植物消毒液浸泡根系15分钟，杀菌，消毒，并起到驯化作用；④再次用清水冲洗2遍后，定植到栽培容器上。5）定植将清洗好的植株定植到水培管中，并用黑色纱网对透光的小孔做避光处理。6）培养将水培管放置室外通风、见光处，温度20℃左右，每隔24h用酸度计测一次pH值，若低于6.3，用0.5%的NaOH液加以调整，培养至成熟期。7）菠菜中维生素B12含量的测定收取0h,12h,24h,36h,48h菠菜的根、茎、叶，称取1g样品研磨后，加进10mL的醋酸钠缓冲液（pH=6.0）中，水浴90℃40min,待冷却至室温，10000r离心15min,取上清调节pH=7.0，过0.22微米滤膜后用高效液相色谱测菠菜中各个部位维生素B12的含量。数据：测得维生素B12液态有机肥中维生素B12含量本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种维生素B12液态有机肥的制备方法，其特征在于包括以下步骤：1）取豆腐黄水盛放于锥形瓶中，灭菌处理,自然冷却至35℃后，接入106CFU/mL～107 CFU/mL谢氏丙酸菌，并在30℃恒温箱中培养72h；2）取步骤1）得到的发酵液离心处理，离心后取上层清液，4℃保存备用，得到维生素B12液态有机肥。

【技术特征摘要】
1.一种维生素B12液态有机肥的制备方法，其特征在于包括以下步骤：1）取豆腐黄水盛放于锥形瓶中，灭菌处理,自然冷却至35℃后，接入106CFU/mL～107CFU/mL谢氏丙酸菌，并在30℃恒温箱中培养72h；2）取步骤1）得到的发酵液离心处理，离心后取上层清液，4℃保存备用，得到维生素B12液态有机肥。2.如权利要求1所述的一种维生素B12液态有机肥的制备方法，其特征在于所述的步骤1）中豆腐黄水灭菌条件为：121℃、15min。3.如权利要求1所述的一种维生素B12液态有机肥的制备方法，其特征在于所述的步骤2）中离心条件为：4℃，8000r/min离心10min。4.如权利要求1所述的有机肥在培养富含维生素B12蔬菜中的应用。5.如权利要求4所述的应用，其特征在于包括以下步骤：1）将蔬菜种子发育成壮苗；2）取维生素B12液态有机肥1～2L,加入购自韶关市曲江康如生物科技有限公司的500倍高浓缩栽培营养液果蔬栽培营养液4mLA液，混匀后再加入4mLB液，再加入20～24mg酪蛋白和20～24mg浓...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱炫，向沙沙，郑谊青，沈宇标，陈杰，
申请(专利权)人：浙江工商大学，
类型：发明
国别省市：浙江,33