固液分离方法和装置及在其中使用的移液器吸头、粒子及试剂盒制造方法及图纸

本发明专利技术提供无需有滤器等的复杂的结构的管嘴的固液分离方法、固液分离装置及在其中使用的移液器吸头、粒子及试剂盒。本发明专利技术从上述开口向在尖端形成开口的抽吸管嘴的内部抽吸含粒子的悬浮液，使抽吸的悬浮液中所含的粒子的至少一部分沉降到至达到尖端开口的开口近前侧而在上述抽吸管嘴内阻塞，经尖端开口而排出内部的液体的固液分离方法。

【技术实现步骤摘要】
固液分离方法和装置及在其中使用的移液器吸头、粒子及试剂盒
本专利技术涉及固液分离方法、固液分离装置及在其中使用的移液器吸头、粒子及试剂盒。
技术介绍
提取试样液中的特定的成分时，已知用滤器过滤或添加吸附特定的成分的固体，分离固体和液体的方法(BF分离)。BF分离一般是分离液体和个体的固液分离之一。作为BF分离的方法，进行离心沉降法或由磁力的分离等。但是，在分析装置内实施这些方法时，复杂的机构和控制是必要的。从而，提议在分注管嘴(移液器吸头)设置作为吸附剂的个体或滤器，在抽吸－排出动作时提取特定的成分(参照例如专利文献1、2)。【现有技术文献】【专利文献】【专利文献1】特开2013-47680号公报【专利文献2】特开2003-254877号公报【专利技术概要】【专利技术要解决的课题】由于如专利文献1、2一样的分注管嘴有在管嘴内部进行细加工的必要，制造工序复杂。进而，有增加制造成本的方面。本专利技术是考虑如上所述的事情而进行的，提供无需有滤器等的复杂的结构的管嘴的固液分离方法、固液分离装置及在其中使用的试剂盒。【用于解决课题的手段】本专利技术提供固液分离方法，其从上述开口向在尖端形成开口的抽吸管嘴的内部抽吸含粒子的悬浮液，使抽吸的悬浮液中所含的粒子的至少一部分沉降而在上述抽吸管嘴内阻塞，经阻塞上述粒子的抽吸管嘴的开口而排出内部的液体。再者，从不同的观点来看，本专利技术提供固液分离装置，其具备：安装了在尖端形成开口的抽吸管嘴的抽吸部，控制上述抽吸部的动作的控制部，及支持收容含粒子的液体的容器的容器支持体，上述控制部以将上述悬浮液的至少一部分从上述开口抽吸到抽吸管嘴的内部，使抽吸的悬浮液中所含的粒子的至少一部分沉降而在上述抽吸管嘴内阻塞，经内部阻塞上述粒子的抽吸管嘴的开口而排出内部的液体的方式控制。另外，本专利技术提供在上述的固液分离方法中使用、在尖端开口附近无滤器的作为抽吸管嘴的移液器吸头。再者，本专利技术提供在上述的固液分离方法中使用的粒子。再另外，本专利技术提供固液分离用试剂盒，其含：在上述的固液分离方法中使用、在尖端开口附近无滤器的作为抽吸管嘴的移液器吸头和在上述固液分离方法中使用的粒子，上述移液器吸头的最小的开口直径比上述粒子的最大直径大，并且比上述粒子的最大直径的6倍小。【专利技术效果】根据本专利技术的固液分离方法由于使抽吸的悬浮液中所含的粒子的至少一部分沉降而阻塞，经阻塞上述粒子的抽吸管嘴的开口而排出内部的液体，伴随液体的排出，粒子残留在抽吸管嘴的内部，与排出的液体分离。对于根据本专利技术的固液分离装置而也发挥同样的作用效果。【附图说明】【图1】是显示本实施方式的固液分离装置的一例的图。【图2】是本实施方式的固液分离装置的(a)柱塞的移动，(b)显示注射器内压的Pt曲线、(c)显示固液分离的样式的图。【图3】是显示本实施方式的试剂盒的外观的一例的图。【图4A】是在本实施方式的固液分离的成功事例中的Pt曲线的一例。【图4B】是在本实施方式的固液分离的失败事例中的Pt曲线的一例。【图4C】是在本实施方式的固液分离的失败事例中的Pt曲线的一例。【图5A】是显示在实施例中使用的载体的制作中使用的筛的网目尺寸的图。【图5B】是显示在实施例中使用的第1～第10载体的粒度分布的表。【图5C】是显示在实施例中使用的载体及管的特征的图。【图5D】是显示在实施例中固液分离成功的载体和管的组合的表。【图6A】是显示连续重复100次本实施方式的固液分离时的第11～15次的Pt曲线的图。【图6B】是显示连续重复100次本实施方式的固液分离时的第13次的Pt曲线的图。【图6C】是显示连续重复100次本实施方式的固液分离时的第14次的Pt曲线的图。【图7】是显示在本实施方式的固液分离中变更排液速度时的各排液速度的Pt曲线的图。【图8A】是显示在实施例中设为载体浓度60％时的Pt曲线的图。【图8B】是显示在实施例中设为载体浓度5％时的Pt曲线的图。【图8C】是显示在实施例中设为载体浓度0.1％时的Pt曲线的图。【图9A】是显示在实施例中将载体的比重设为7.9时的Pt曲线的图。【图9B】是显示在实施例中将载体的比重设为6.0时的Pt曲线的图。【图9C】是显示在实施例中将载体的比重设为4.0时的Pt曲线的图。【图9D】是显示在实施例中将载体的比重设为1.1时的Pt曲线的图。【图10A】是显示在实施例中将溶剂的比重设为1.9时的Pt曲线的图。【图10B】是显示在实施例中将溶剂的比重设为1.2时的Pt曲线的图。【图10C】是显示在实施例中将溶剂的比重设为0.7时的Pt曲线的图。【图11A】是显示在实施例中将溶剂的粘度设为400cP时的Pt曲线的图。【图11B】是显示在实施例中将溶剂的粘度设为60cP时的Pt曲线的图。【图11C】是显示在实施例中将溶剂的粘度设为1cP时的Pt曲线的图。【图11D】是显示在实施例中将溶剂的粘度设为0.3cP时的Pt曲线的图。【图12A】是显示在实施例中将悬浮液的温度设为0.5℃时的Pt曲线的图。【图12B】是显示在实施例中将悬浮液的温度设为25℃时的Pt曲线的图。【图12C】是显示在实施例中将悬浮液的温度设为98℃时的Pt曲线的图。【图13A】是显示在实施例中使用含20％表面活性剂的悬浮液时的Pt曲线的图。【图13B】是显示在实施例中使用含8％表面活性剂的悬浮液时的Pt曲线的图。【图13C】是显示在实施例中使用不含表面活性剂的悬浮液时的Pt曲线的图。【图14A】是在实施例中组合使用不合格的载体和合格的支持体时的闭塞(阻塞)的概念图。【图14B】是显示在实施例中使用不合格的载体时的Pt曲线的图。【图14C】是显示在实施例中以合格的支持体作为载体单独使用时的Pt曲线的图。【图14D】是显示在实施例中组合使用不合格的载体和合格的支持体时的Pt曲线的图。【图15】是对在实施例中连续稀释式的BF分离操作进行说明的图。【图16】是显示实施例13的荧光强度测定的结果的图。【图17】是显示实施例14的荧光强度测定的结果的图。【图18】是实施例15的凝胶荧光成像的照片。【图19】是实施例15的银染色的照片。【图20】是实施例16的凝胶荧光成像的照片。【图21】是实施例16的银染色的照片。【图22】是显示实施例17的TMR-ACTH部分肽的荧光强度测定的结果的图。【图23】是显示实施例17的全血来源肽的荧光强度测定的结果的图。【图24】是对保留回(RetentionBack)式的BF分离操作进行说明的图。【图25】是显示使用实施例18的无修饰氧化硅载体的脱盐处理前后的TMR-ACTH部分肽的荧光强度测定的结果的图。【图26】是显示使用实施例18的无修饰氧化硅载体的脱盐处理前后的全血来源肽的荧光强度测定的结果的图。【图27】是显示使用实施例18的ODS修饰氧化硅载体的脱盐处理前后的TMR-ACTH部分肽的荧光强度测定的结果的图。【图28】是显示使用实施例18的ODS修饰氧化硅载体的脱盐处理前后的全血来源肽的荧光强度测定的结果的图。【图29】是显示使用实施例18的氨基甲硅烷基修饰氧化硅载体的脱盐处理前后的TMR-ACTH部分肽的荧光强度测定的结果的图。【图30】是显示使用实施例18的氨基甲硅烷基修饰氧化硅载体的脱盐处理前后的全血来源肽的荧光强度测定的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.固液分离方法，其中从上述开口向在尖端形成开口的抽吸管嘴的内部抽吸含粒子的悬浮液，使抽吸的悬浮液中所含的粒子的至少一部分沉降而在上述抽吸管嘴内阻塞，经使上述粒子阻塞的抽吸管嘴的开口而排出内部的液体。

【技术特征摘要】
2017.05.31 JP 2017-1087651.固液分离方法，其中从上述开口向在尖端形成开口的抽吸管嘴的内部抽吸含粒子的悬浮液，使抽吸的悬浮液中所含的粒子的至少一部分沉降而在上述抽吸管嘴内阻塞，经使上述粒子阻塞的抽吸管嘴的开口而排出内部的液体。2.权利要求1所述的固液分离方法，其中上述液体的排出是在抽吸的粒子大致均一地分散的悬浮液的尖端开口附近和离尖端开口最远部发生由沉降导致的粒子浓度的差异之后退行，伴随排出，排出可通过使粒子阻塞的抽吸管嘴的液体的工序。3.权利要求2所述的固液分离方法，其中在上述悬浮液中，含目标物质的试样液和吸附目标物质的粒子混合在一起，上述液体的排出是使吸附目标物质的粒子留在开口近前侧的工序。4.权利要求3所述的固液分离方法，其中上述目标物质是期望的肽或核酸，上述液体含上述期望的肽或核酸以外的肽及/或核酸、盐。5.权利要求3所述的固液分离方法，其中上述试样液是全血、血清或血浆。6.权利要求3所述的固液分离方法，其中上述试样液是通过将全血、血清或血浆用微波炉加热而得到的上清。7.权利要求3所述的固液分离方法，其中上述试样液是通过将全血、血清或血浆用微波炉加热而得到的上清的脱盐处理液。8.权利要求3～7之任一项所述的固液分离方法，其中上述粒子是使上述目标物质吸附的多孔性材料的粒子。9.权利要求3～8之任一项所述的固液分离方法，其中上述粒子以氧化硅、氧化铝、氧化锆或聚苯乙烯作为材料。10.权利要求1～9之任一项所述的固液分离方法，其中上述粒子对于粒径及粒径分布而有120μm以上的D90-D10，并且D50是170μm以上。11.权利要求1～10之任一项所述的固液分离方法，其中上述抽吸管嘴的最小的开口直径比上述粒子的最大直径大，并且比上述粒子的最大直径的6倍小。12.权利要求3所述的固液分离方法，其中在排出上述液体之后，将从吸附目标物质的粒子溶出目标物质的溶出液抽吸到抽吸管嘴内，使由抽吸的溶出液混合的粒子的至少一部分沉降到开口近前侧，使溶出液和溶出的目标物质经尖端开口排出。13.权利要求1～12之任一项所述的固液分离方法，其中上述悬浮液的抽吸是将抽吸管嘴的尖端浸到悬浮液，使抽吸管嘴内的气压成为相对于外部的气压成为负压的工序，上述粒子的沉降是使抽吸管嘴内的气压保持一定的工序，上述液体的排出是使抽吸管嘴内的气压成为相对于外部的气压成为正压的工序。14.权利要求13所述的固液分离方法，其中抽吸管嘴内的气压的控制是在抽吸管嘴的后端连接含柱塞的注射器的状态下控制柱塞的位置的工序，上述悬浮液的抽吸是使柱塞移动而使含抽吸管嘴的注射器内部的容积增大的工序，上述粒子的沉降是使柱塞静止而保持相同的位置的工序，上述液体的排出是使柱塞移动而使含抽吸管嘴的注射器内部的容积减少之后，使柱塞静止而保持相同的位置的工序。15.权利要求1～14之任一项所述的固液分离方法，其用于BF分离。16.权利要求1～15之任一项所述的固液分离方法，其中上述悬浮液中的上述粒子的浓度是10～100mg...

【专利技术属性】
技术研发人员：岸本聪美，加畑博幸，香月隆伸，
申请(专利权)人：希森美康株式会社，三菱化学株式会社，
类型：发明
国别省市：日本,JP