白簕叶总多酚的用途制造技术

本发明专利技术提供一种白簕叶总多酚的用途，用于制备对神经细胞具有抗衰老作用的食品和/或药物，并且能用于制备对PC12细胞具有抗衰老作用的食品和/或药物。白簕叶总多酚在抗氧化和神经氧化损伤修复方面的多途径作用机制,进一步提高了中草药的临床价值,并且对于临床上开发出高效、低毒的AD治疗药物有很大帮助，有利于寻找出可能治疗抗神经细胞氧化损伤的抗衰老剂。

【技术实现步骤摘要】
白簕叶总多酚的用途
本专利技术涉及的一种白簕叶的用途研究，具体涉及一种白簕叶总多酚的用途。
技术介绍
白簕(Acanthopanxtrifoliatus(L.)Merr.)，为五加科(Araliaceae)五加属(Acanthopanax)的一种攀援状灌木，又被称为禾掌簕、三叶五加、三加皮等，广泛分布于我国的中部和南部，是一种民间常用的草药，其味苦、涩、微寒，具有祛风除湿、舒筋活血、消肿解毒的功效，用于治疗感冒、咳嗽、风湿、坐骨神经痛等症。另外，白簕香味独特，民间流行以簕菜作为保健蔬菜，白簕作为一种药食同源植物，现已开发出与其有关的保健药品，具有广阔的应用前景。白簕叶中含有多种化学成分，其富含皂苷、三萜羧酸、黄酮、糖苷等化学成分。据报道，白簕叶中含有多种三萜类成分，国内外学者从白簕叶中分离鉴定了四种成分，即石吊兰素，贝壳杉烯酸，蒲公英菇醇和蒲公英菇醇乙酸醋。经研究发现，这些成分具有很好的止咳和祛痰作用。近年来大量研究表明，白簕提取物具有很好的抗氧化活性，其植物黄酮经研究证明具有良好的抗氧化、抗菌作用，分离纯化的多糖成分经实验证明，其抗氧化能力呈现出很好的量效关系。众多研究为开发利用白簕提取物提供了理论依据，为白簕资源的深入利用和高价值的产品开发提供了有价值的参考。咖啡酰奎宁酸类总多酚是白簕的有效成分群之一，这类成分在灯盏细辛中广泛存在，而且金银花、咖啡豆、苍耳等植物中也被发现含有丰富的咖啡酰奎宁酸类总多酚。这类化合物具有多种不同的生物活性，国内外许多学者对于咖啡酰奎宁酸进行了植物化学和药理学方面的研究，发现了这类成分具有很好的药理活性，能够有效地抑制血小板聚集，在抗血栓、抗氧化和自由基损伤等方面发挥了很大作用。盛艳梅等通过建立大鼠脑缺血再灌注的损伤模型，探讨了3,5-二咖啡酰奎宁酸对于脑神经的保护作用。她们采用了大鼠线栓法证明了，咖啡酰奎宁酸类化合物在大鼠模型中，能够有效的改善其神经行为，进而能够使得脑梗死的比率显著下降。因此，对于开发出理想的抗脑缺血损伤药物具有很大的帮助。有研究发现，黑大豆种皮中多酚能够抑制活性氧(ROS)在细胞中的积累，从而抑制自由基引起的DNA氧化损伤。白簕的嫩茎、嫩叶在民间通常可作为蔬菜食用，也常被制成茶叶饮用，受到大多数人的青睐。近年来有关白簕化学成分的研究屡见不鲜，这些研究发现，白簕中含有丰富的挥发油、酚类化合物、黄酮类、皂苷类、多糖等成分，还包括多种矿物质、维生素、氨基酸、蛋白质等。对于白簕的不同部位，多酚的含量有所不同，研究发现，相比白簕根、茎中的多酚含量，白簕叶中的多酚含量明显要高；对于白簕中丰富的黄酮类化合物，研究考察了各部位黄酮的含量差异情况，发现白簕叶中黄酮含量均高于其他部位。由此可见，白簕叶的生理活性有待进一步研究。因此，需要对现有技术进行改进。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是提供一种高效的白簕叶总多酚的用途。为解决上述技术问题，本专利技术提供一种白簕叶总多酚的用途：用于制备对神经细胞具有抗衰老作用的食品和/或药物。作为对本专利技术白簕叶总多酚的用途的改进，其特征在于：用于制备对PC12细胞具有抗衰老作用的食品和/或药物。本专利技术白簕叶总多酚的用途的技术优势为：白簕叶总多酚在抗氧化和神经氧化损伤修复方面的多途径作用机制,进一步提高了中草药的临床价值,并且对于临床上开发出高效、低毒的AD治疗药物有很大帮助，有利于寻找出可能治疗抗神经细胞氧化损伤的抗衰老剂。附图说明下面结合附图对本专利技术的具体实施方式作进一步详细说明。图1为白簕叶总多酚的细胞毒性实验(与对照组比较:*p<0.05，**p<0.01)；横坐标为细胞存活率；图2为不同浓度Aβ25-35作用24h后对PC12细胞存活率的影响(与对照组比较:*p<0.05，**p<0.01)；横坐标为细胞存活率；图3为Aβ25-35的半数损伤浓度；横坐标为细胞存活率；图4为白簕叶总多酚对Aβ25-35诱导的PC12细胞氧化损伤模型的作用(与对照组比较:*p<0.05，**p<0.01)；横坐标为细胞存活率；图5为白簕叶总多酚作用后PC12细胞β-半乳糖苷酶染色结果；A-模型组(AAPH)；B-正常组；C-白簕叶总多酚15mg/L+AAPH；D-白簕叶总多酚30mg/L+AAPH；E-白簕叶总多酚60mg/L+AAPH。*p<0.05代表显著差异，**p<0.01代表极显著差异。具体实施方式下面结合具体实施例对本专利技术进行进一步描述，但本专利技术的保护范围并不仅限于此。本专利技术所使用的白簕采集于广东省凤凰山(干燥)；PC12细胞购自中国科学院上海细胞库。实施例1、白簕叶总多酚的制备方法，包括以下步骤：1)、将白簕叶粉碎，过10目筛，取干燥的白簕叶粉末1kg，加入4L体积分数为70％的乙醇溶液进行超声提取4次，每次2h，将提取液合并，于60℃加热减压浓缩至浸膏状，加1L的45℃蒸馏水混悬，用石油醚萃取4次去脂，取水相于60℃加热减压浓缩至浸膏状，然后进行真空冷冻干燥至无水分，得到粗多酚粉末；2)、称取100g的树脂(树脂为HPD100型大孔树脂)，向其中加入3～4倍于树脂体积的无水乙醇浸泡24h(树脂充分溶胀)，将浸泡后的树脂装于层析柱(Φ1.7cm×50cm的玻璃层析柱)中，控制使树脂层无气泡产生，取无水乙醇上柱洗脱液，在洗脱液加等体积蒸馏水至洗脱液不变浑后停止，然后再用蒸馏水洗脱至其中乙醇含量小于10％；待蒸馏水流尽后，加入树脂3倍量的质量分数5％NaOH浸泡，3h后用蒸馏水洗脱树脂至洗脱液经pH计测定呈中性，再加入树脂3倍量质量分数5％HCl溶液浸泡3h，用蒸馏水洗至中性，得到用于纯化的大孔树脂柱；3)采用步骤2中的用于纯化的大孔树脂柱，以浓度为1.0mg/mL白簕叶粗多酚作为上样液，通过1mol/L的盐酸溶液调节上样液pH为3.0，调节上样速率，以2mL/min的速度上柱，上柱量为30mL；然后先用2BV的蒸馏水以2BV/min冲洗大孔树脂上的杂质，再用40mL体积浓度为50％乙醇溶液进行洗脱，洗脱速度为2mL/min，可得白簕叶总多酚化合物。实验：选取大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤株PC12细胞株作为靶细胞，以白簕叶提取物总多酚为研究对象，分别对于Aβ25-35诱导的细胞氧化损伤及AAPH诱导的细胞氧化应激体外模型进行干预，旨在研究白簕叶总多酚对神经细胞衰老的影响。涉及的主要研究内容有：1)细胞毒效学研究：为验证白簕叶总多酚本身是否对PC12细胞存在毒性作用，本实验采用MTT法检测白簕叶总多酚对PC12细胞的毒性，对给药后的细胞存活率进行测定，计算给药的安全浓度。2)细胞衰老模型构建：建立Aβ25-35诱导的PC12细胞氧化损伤模型；建立以AAPH诱导的氧化应激引起的细胞衰老为基础的抗衰老活性测定体系。3)细胞药效学研究：以白簕叶总多酚对PC12细胞氧化损伤模型进行干预，采用MTT法检测细胞存活率，从而研究白簕叶总多酚对该损伤机制的影响；以纯化后的白簕叶总多酚为研究对象对AAPH诱导的氧化应激模型进行干预，采用β-半乳糖苷酶染色法观察药物组对该氧化损伤机制的抑制作用。主要试剂RPMI-1640完全培养基的配制：在超净工本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.白簕叶总多酚的用途，其特征在于：用于制备对神经细胞具有抗衰老作用的食品和/或药物。

【技术特征摘要】
1.白簕叶总多酚的用途，其特征在于：用于制备对神经细胞具有抗衰老作用的食品和/或药物。2.根据权利...

【专利技术属性】
技术研发人员：张晓丹，杨东风，祁哲晨，汪紫莹，梁宗锁，
申请(专利权)人：浙江理工大学，
类型：发明
国别省市：浙江,33