宫内膜干细胞在制备用于预防或治疗肺纤维化药物的应用制造技术

技术编号:19721806 阅读:34 留言:0更新日期:2018-12-12 00:33
本发明专利技术公开宫内膜干细胞在制备用于预防或治疗肺纤维化药物的应用,属于生物医学技术领域,本发明专利技术药物包含宫内膜干细胞,药物的溶剂为氯化钠水溶液。本发明专利技术药物可明显改善肺纤维化现象,下调肺组织中α‑SMA、collagen、IL‑6的表达水平,上调肺组织中IL‑10的表达水平;同时,还下调脾组织TNF‑α的表达水平。

【技术实现步骤摘要】
宫内膜干细胞在制备用于预防或治疗肺纤维化药物的应用
本专利技术属于生物医学
,尤其涉及宫内膜干细胞在制备用于预防或治疗肺纤维化药物的应用。
技术介绍
肺纤维化是一种以肺部永久性损伤为特征的、并伴随着高死亡率的严重疾病,通常是由于严重的外部创伤、自发免疫反应或药物不良副反应等因素引起肺的永久性损伤。研究表明,肺纤维化的进程大致分为以下3个阶段:第一阶段,肺脏受到损伤或其他有害刺激,成纤维细胞的细胞外基质(ECM)使细胞被活化;第二阶段,活化的ECM使细胞发生结构和表型的改变,产生大量ECM,胞内的促分裂素原活化蛋白激酶和核转录因子通路被激活,同时T细胞被激活,产生各种细胞因子;第三阶段,损伤因素持续存在,成纤维细胞继续被激活,产生更多的ECM,细胞因子持续不断的引起组织炎症和胶原过度表达,ECM不断沉积,肺纤维化逐渐形成,最终导致特发部位肺功能丧失[1]。肺纤维化发病过程是一个复杂的病理过程,且有多种细胞及细胞因子参与。TNF-α(肿瘤坏死因子)是临床检验肺纤维化的一个重要指标;研究发现,在纤维化的肺部组织中,TNF-α的mRNA水平显著高于正常肺组织[2],抑制TNF-α的合成及功能可减轻或调节肺纤维化进程,延缓进入肺纤维化急性期。也有研究表明,IL-6(白细胞介素-6)能促进肺纤维化的发生,IL-6的表达增加可引起严重的炎症反应,导致肺组织的某些区域结构被破坏,造成严重损伤,ECM不断沉积,逐渐形成肺纤维化。而IL-10(白细胞介素-10)则能抑制肺纤维化,IL-10可减少由TGF-β刺激产生的Ⅰ型胶原的表达,从而阻止博来霉素诱导的肺纤维化进程。近些年,虽然随着技术手段的进步,肺纤维化机制和治疗药物的研究取得一定进展,但是发病机理尚未完全阐释清楚,并且缺乏有效的治疗方法。有学者指出,在损伤-炎症-修复三期过程中,任何一项或多项过程的失调,均可以导致肺纤维化的发生,提示我们可通过干预以上过程来预防纤维化的形成[3]。目前,肺纤维化的主要治疗策略有抗炎、抗纤维化和抗氧化等,治疗手段主要有药物治疗和手术治疗等。但是,药物治疗具有较大的副作用;而肺移植作为目前治疗肺纤维化最有效的手段,由于捐献器官资源缺乏、排斥反应、感染、并发症和费用昂贵等缺陷,限制了其应用。最近有文献报道脐带间充质干细胞、胚胎干细胞等治疗可改善博来霉素诱导的肺纤维化症状,但目前尚无报道:宫内膜干细胞在预防或治疗肺纤维化中的应用。参考文献[1]潘有禄,黄文海,沈正荣等.肺纤维化发生机制及治疗研究进展[J].中国药学杂志.2012,47(23):1873-76.[2]HigginsDF,KimuraK,BernhardtWM,etal.HypoxiapromotesfibrogenesisinvivoviaHIF-1stimulationofepithelial-to-mesenchymaltransition[J].JClinInvest.2007,117(12):3810-20.[3]WilsonMS,WynnTA.Pulmonaryfibrosis:pathogenesis,etiologyandregulation.[J].MucosalImmunol.2009,2(2):103-21.
技术实现思路
本专利技术目的在于克服现有技术存在的不足,而提供宫内膜干细胞在制备用于预防或治疗肺纤维化药物的应用,宫内膜干细胞可明显改善肺纤维的现象。为实现上述目的,本专利技术采取的技术方案为:宫内膜干细胞(EMSC)在制备用于预防或治疗肺纤维化药物的应用。另外,本专利技术还提供一种用于预防或治疗肺纤维化的药物组合物,其包含宫内膜干细胞。作为上述技术方案的改进,药物组合物中所述宫内膜干细胞的密度为1.0×105~5.0×106个/mL。优选地,药物组合物中所述宫内膜干细胞的密度为2.0×105~2.0×106个/mL。作为上述技术方案的进一步改进,药物组合物中所述宫内膜干细胞的密度为1.0×106个/mL。作为上述技术方案的进一步改进,药物组合物的溶剂为氯化钠水溶液。作为上述技术方案的更进一步改进,所述氯化钠水溶液中氯化钠的质量体积比为0.8%~1.0%。作为上述技术方案的更进一步改进,所述氯化钠水溶液中氯化钠的质量体积比为0.9%。作为上述技术方案的改进,所述宫内膜干细胞取自于原代培养至传代第十二次培养的宫内膜干细胞。另外,本专利技术还提供所述药物组合物的制备方法,其包括以下步骤:S1)将氯化钠加入水中溶解,并进行除菌,即得氯化钠水溶液;S2)在无菌条件下,培养宫内膜干细胞;当宫内膜干细胞的密度达到80%~100%时,用胰蛋白酶消化,并收集宫内膜干细胞;S3)在无菌条件下,将收集的宫内膜干细胞悬于氯化钠水溶液中;宫内膜干细胞与氯化钠水溶液混合时的温度为20~26℃。另外,本专利技术还提供一种包含所述的药物组合物的药物制剂,所述药物制剂还包含药学上可接受的辅料,所述药物制剂的剂型是静脉注射的溶剂或腹腔注射的溶剂。在上述技术方案中,“药学上可接受的辅料”包括任何和所有生理上相容的抗细菌、抗真菌剂,以及含少量的能提高货架期或有效性的辅助物质,如湿润剂或乳化剂、防腐剂或缓冲液。本专利技术的有益效果在于:本专利技术提供宫内膜干细胞在制备用于预防或治疗肺纤维化药物的应用,宫内膜干细胞能下调肺组织中α-SMA、collagen、IL-6的表达水平,上调肺组织中IL-10的表达水平;同时,还下调脾组织TNF-α的表达水平;宫内膜干细胞能明显改善肺纤维化现象。附图说明图1显示肺组织的HE染色结果;图2显示α-SMA的表达水平;图2A为α-SMA的免疫印迹图谱,其中β-Tublin(微管蛋白)作为对照;图2B定量统计α-SMA的表达量;图3定量统计collagen、IL-6、IL-10和TNF-α的表达量;图3A定量统计collagen的表达量;图3B定量统计IL-6的表达量;图3C定量统计IL-10的表达量;图3D定量统计TNF-α的表达量。具体实施方式为更好地说明本专利技术的目的、技术方案和优点,下面将结合具体实施例和附图对本专利技术作进一步说明。实施例1本实施例提供一种用于预防或治疗肺纤维化的药物组合物,药物组合物包括原代培养的宫内膜干细胞和氯化钠水溶液,药物组合物中宫内膜干细胞的密度为1.0×105个/mL;氯化钠水溶液中氯化钠的质量体积比为0.9%。本实施例还提供所述药物组合物的制备方法,其包括以下步骤:S1)将氯化钠加入水中溶解,并进行除菌,即得氯化钠水溶液;S2)在无菌条件下,将宫内膜干细胞(EMSC)接种于10cm细胞培养皿,并将培养皿置于37℃、CO2浓度为5%的细胞培养箱中进行培养;当宫内膜干细胞的密度达到80%~100%(优选为90%~95%)时,用胰蛋白酶消化,并收集宫内膜干细胞;S3)在无菌条件下,将收集的宫内膜干细胞悬于氯化钠水溶液中,分装至1mL注射器备用;宫内膜干细胞与氯化钠水溶液混合时的温度为20~26℃。实施例2本实施例提供一种用于预防或治疗肺纤维化的药物组合物,药物组合物包括原代培养的宫内膜干细胞和氯化钠水溶液,药物组合物中宫内膜干细胞的密度为1.0×106个/mL;氯化钠水溶液中氯化钠的质量体积比为0.9%。本实施例还提供所述药物组合物的制备方法,其包本文档来自技高网
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【技术保护点】
1.宫内膜干细胞在制备用于预防或治疗肺纤维化药物的应用。

【技术特征摘要】
1.宫内膜干细胞在制备用于预防或治疗肺纤维化药物的应用。2.一种用于预防或治疗肺纤维化的药物组合物,其特征在于,包含宫内膜干细胞。3.如权利要求2所述的药物组合物,其特征在于,药物组合物中所述宫内膜干细胞的密度为1.0×105~5.0×106个/mL。4.如权利要求3所述的药物组合物,其特征在于,药物组合物中所述宫内膜干细胞的密度为1.0×106个/mL。5.如权利要求3所述的药物组合物,其特征在于,药物组合物的溶剂为氯化钠水溶液。6.如权利要求5所述的药物组合物,其特征在于,所述氯化钠水溶液中氯化钠的质量体积比为0.8%~1.0%。7.如权利要求6所述的药物组合物,其特征在于,所述氯化钠水溶液中氯化钠的质量体积比为0.9%。8....

【专利技术属性】
技术研发人员:徐洋
申请(专利权)人:南方医科大学广东圣赛生物科技有限公司
类型:发明
国别省市:广东,44

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