利用枝条对构树进行培育的方法技术

本发明专利技术涉及构树培育技术领域，具体地说，涉及一种利用枝条对构树进行培育的方法。其包括如下步骤：步骤一，枝条生根培养；步骤二，根系处理；步骤三，根段的消毒；步骤四，愈伤组织的诱导；步骤五，丛生状不定芽诱导；步骤六，植株培育。通过本发明专利技术的方法能够有效地将无毒组培苗的获得率提升至95％以上。

【技术实现步骤摘要】
利用枝条对构树进行培育的方法
本专利技术涉及构树培育
，具体地说，涉及一种利用枝条对构树进行培育的方法。
技术介绍
构树，又名构桃树、构乳树、楮树、楮实子、沙纸树、谷浆树、假杨梅等，为桑科构属多年生木本植物。构树具有速生、适应性强、分布广、易繁殖、热量高、轮伐期短等特点。其在中国的温带、热带均有分布，不论平原、丘陵或山地都能生长，其叶是很好的猪饲料，其韧皮纤维是造纸的高级原料，材质洁白，其根和种子均可入药，树液可治皮肤病，具有较高经济价值。树木的繁殖主要有种子繁殖、扦插繁殖、组织培养等方式。但就构树而言，构树的种子繁殖方式存在繁殖时间较长、人工授粉较难等问题；构树的扦插繁殖方式存在受季节限制且种苗质量较低的问题。故采用种子繁殖和扦插繁殖并不能较佳地运用于构树的商业化培育中。虽然采用组织培养培育构树，在效率上要远远高于种子繁殖和扦插繁殖的方式。但是目前国内外对构树的组织培养研究较少，尚未见有报道。
技术实现思路
本专利技术提供了一种利用枝条对构树进行培育的方法，其能够克服现有技术的某种或某些缺陷。根据本专利技术的利用枝条对构树进行培育的方法，其包括如下步骤：步骤一，枝条生根培养选择生长健壮、无病虫害、一年生、半木质化的构树枝条，冲洗后修剪成5-10cm的茎段，每根茎段处至少留有2个腋芽，之后用生根剂对茎段进行浸泡；另取珍珠岩铺设成厚度为10-20cm的珍珠岩层，浇水使得珍珠岩层达到饱和状态；之后将浸泡过生根剂后的茎段扦插至珍珠岩层处，并在珍珠岩层上方支小拱棚、覆盖塑料薄膜，控制温度为28±2℃，培养约30天；步骤二，根系处理在步骤一中的枝条生根且根长至10-15cm时，取出整株，用流水至少冲洗30min，之后用滤纸吸干根系处的多余水分；选取最粗壮的且尚未韧皮化的根尖，切成3-5cm的根段；步骤三，根段的消毒将步骤二中获取的根段于超净工作台处在无菌环境下用75％的酒精浸泡10-15s，后用无菌水冲洗3-5s；之后用0.1％的HgCl2溶液浸泡8-10min，后用无菌水冲洗3-5次；步骤四，愈伤组织的诱导在消毒的培养皿中将经步骤三处理的根段的两端的变色部分切除，之后将根段切成0.5-1cm的小段，接种至经灭菌处理的培养基处，在26±2℃的黑暗环境中培养30-50天，得到愈伤组织；步骤五，丛生状不定芽诱导在步骤四中的愈伤组织生长到直径约0.5cm左右时，切下并转接到分化培养基处，并置于温度为26±2℃，光照为1000-2000lx、10-14h/d的环境中进行培养，得到丛生状不定芽；步骤六，植株培育。通过本实施例中的一种利用枝条对构树进行培育的方法，能够将无毒组培苗的获得率提升至95％以上。作为优选，步骤四中的基础培养基采用MS培养基，该MS培养基与常规MS培养基相比，其KNO3和NH4NO3的浓度均为700mg/L且PH值为5.8。从而能够较佳地提升愈伤组织的发生率。作为优选，所述MS培养基中添加有浓度为1.5-2.0mg/L的6-BA以及浓度为0.1-0.2mg/L的NAA的MS培养基。从而能够大幅提升愈伤组织的发生率，使得愈伤组织的发生率能够提升至80-100％。作为优选，所述MS培养基中还添加有占总体积比为10％的椰汁，以及浓度为0.8-1.2g/L的水解乳蛋白。从而能够有效地促进愈伤组织的增殖和分化。本专利技术中的缩略词：KNO3硝酸钾NH4NO3硝酸铵6-BA6-苄氨基嘌呤NAA萘乙酸具体实施方式为进一步了解本专利技术的内容，结合实施例对本专利技术作详细描述。应当理解的是，实施例仅仅是对本专利技术进行解释而并非限定。实施例1本实施例提供了一种利用枝条对构树进行培育的方法，其包括如下步骤：步骤一，枝条生根培养选择生长健壮、无病虫害、一年生、半木质化的构树枝条，冲洗后修剪成5-10cm的茎段，每根茎段处至少留有2个腋芽，之后用生根剂对茎段进行浸泡；另取珍珠岩铺设成厚度为10-20cm的珍珠岩层，浇水使得珍珠岩层达到饱和状态；之后将浸泡过生根剂后的茎段扦插至珍珠岩层处，并在珍珠岩层上方支小拱棚、覆盖塑料薄膜，控制温度为28±2℃，培养约30天；步骤二，根系处理在步骤一中的枝条生根且根长至10-15cm时，取出整株，用流水至少冲洗30min，之后用滤纸吸干根系处的多余水分；选取最粗壮的且尚未韧皮化的根尖，切成3-5cm的根段；步骤三，根段的消毒将步骤二中获取的根段于超净工作台处在无菌环境下用75％的酒精浸泡10-15s，后用无菌水冲洗3-5s；之后用0.1％的HgCl2溶液浸泡8-10min，后用无菌水冲洗3-5次；步骤四，愈伤组织的诱导在消毒的培养皿中将经步骤三处理的根段的两端的变色部分切除，之后将根段切成0.5-1cm的小段，接种至经灭菌处理的培养基处，在26±2℃的黑暗环境中培养30-50天，得到愈伤组织；步骤五，丛生状不定芽诱导在步骤四中的愈伤组织生长到直径约0.5cm左右时，切下并转接到分化培养基处，并置于温度为26±2℃，光照为1000-2000lx、10-14h/d的环境中进行培养，得到丛生状不定芽；步骤六，植株培育。通过本实施例的培育方法，能够有效地降低培育过程中的污染率，进而能够大大提升无毒苗的获取率。为对本实施例中的方法进行验证，特采用不同来源的外植体以本实施例的方法进行培育，并获取数据如表1所示。表1不同来源外植体的培育获取无毒组培苗的获得率外植体来源无毒组培苗的获得率(％)构树枝条培养获取的根系98构树原生根系85构树叶片72构树枝条73通过表1可以看出，通过步骤一的处理，能够大大提升构树无毒组培苗的获得率。实施例2本实施例也提供了一种利用枝条对构树进行培育的方法，其与实施例1的区别在于：步骤四中的基础培养基采用MS培养基，该MS培养基与常规MS培养基相比，其KNO3和NH4NO3的浓度均为700mg/L且PH值为5.8。本实施例中MS培养基的详细配比如表2所示。表2本实施例中的MS培养基的配比表本实施例中，通过将KNO3和NH4NO3的浓度控制为700mg/L，能够有效地降低铵盐的浓度，同时由于添加有浓度为1.5-2.0mg/L的6-BA以及浓度为0.1-0.2mg/L的NAA，能够有效地提升愈伤组织的发生率。实施例3本实施例也提供了一种利用枝条对构树进行培育的方法，其与实施例2的区别在于：所述MS培养基中添加有浓度为1.5-2.0mg/L的6-BA以及浓度为0.1-0.2mg/L的NAA的MS培养基。从而能够较佳地提升愈伤组织的发生率。实施例4本实施例也提供了一种利用枝条对构树进行培育的方法，其与实施例3的区别在于：所述MS培养基中还添加有占总体积比为10％的椰汁，以及浓度为0.8-1.2g/L的水解乳蛋白。从而能够较佳地提升愈伤组织的增殖率和分化率。为验证步骤四中不同培养基对根组织培育构树的影响，特设计多组实验进行验证，该多组实验中所采用的外植体为同一批次且每组投入的外植体数量均为100，所不同之处在于每组实验中在步骤四中所采用的培养基有所区别，在同等条件下进行培育，并记录相关数据，能够得到表3中的数据。表3不同培养基对组织培育的影响通过表3可以看出，通过降低MS培养基中的铵盐浓度能够明显地增加愈伤组织的发生率，通过添加NAA和6-BA能够大幅度提高愈伤组织的发生率且能够大幅提升愈伤组织本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.利用枝条对构树进行培育的方法，其包括如下步骤：步骤一，枝条生根培养选择生长健壮、无病虫害、一年生、半木质化的构树枝条，冲洗后修剪成5‑10cm的茎段，每根茎段处至少留有2个腋芽，之后用生根剂对茎段进行浸泡；另取珍珠岩铺设成厚度为10‑20cm的珍珠岩层，浇水使得珍珠岩层达到饱和状态；之后将浸泡过生根剂后的茎段扦插至珍珠岩层处，并在珍珠岩层上方支小拱棚、覆盖塑料薄膜，控制温度为28±2℃，培养约30天；步骤二，根系处理在步骤一中的枝条生根且根长至10‑15cm时，取出整株，用流水至少冲洗30min，之后用滤纸吸干根系处的多余水分；选取最粗壮的且尚未韧皮化的根尖，切成3‑5cm的根段；步骤三，根段的消毒将步骤二中获取的根段于超净工作台处在无菌环境下用75％的酒精浸泡10‑15s，后用无菌水冲洗3‑5s；之后用0.1％的HgCl2溶液浸泡8‑10min，后用无菌水冲洗3‑5次；步骤四，愈伤组织的诱导在消毒的培养皿中将经步骤三处理的根段的两端的变色部分切除，之后将根段切成0.5‑1cm的小段，接种至经灭菌处理的培养基处，在26±2℃的黑暗环境中培养30‑50天，得到愈伤组织；步骤五，丛生状不定芽诱导在步骤四中的愈伤组织生长到直径约0.5cm左右时，切下并转接到分化培养基处，并置于温度为26±2℃，光照为1000‑2000lx、10‑14h/d的环境中进行培养，得到丛生状不定芽；步骤六，植株培育。...

【技术特征摘要】
1.利用枝条对构树进行培育的方法，其包括如下步骤：步骤一，枝条生根培养选择生长健壮、无病虫害、一年生、半木质化的构树枝条，冲洗后修剪成5-10cm的茎段，每根茎段处至少留有2个腋芽，之后用生根剂对茎段进行浸泡；另取珍珠岩铺设成厚度为10-20cm的珍珠岩层，浇水使得珍珠岩层达到饱和状态；之后将浸泡过生根剂后的茎段扦插至珍珠岩层处，并在珍珠岩层上方支小拱棚、覆盖塑料薄膜，控制温度为28±2℃，培养约30天；步骤二，根系处理在步骤一中的枝条生根且根长至10-15cm时，取出整株，用流水至少冲洗30min，之后用滤纸吸干根系处的多余水分；选取最粗壮的且尚未韧皮化的根尖，切成3-5cm的根段；步骤三，根段的消毒将步骤二中获取的根段于超净工作台处在无菌环境下用75％的酒精浸泡10-15s，后用无菌水冲洗3-5s；之后用0.1％的HgCl2溶液浸泡8-10min，后用无菌水冲洗3-5次；步骤四，愈伤组织的诱导在消毒的培养皿中将经步骤三处理的根段的两端的变色部分切除，之后将根段切...

【专利技术属性】
技术研发人员：崔晓东，
申请(专利权)人：云南兴构农业产业发展有限公司，
类型：发明
国别省市：云南,53