一种尿微量白蛋白/尿肌酐检测试剂盒制造技术

本发明专利技术公开了一种尿微量白蛋白/尿肌酐检测试剂盒，所述试剂盒包括尿肌酐检测试剂和尿微量白蛋白检测试剂，所述尿肌酐检测试剂包括用于消除内源性肌酸和肌氨酸的试剂R1、用于将肌酐转化成肌酸的试剂R2和用于检测过氧化氢的发光底物1；尿微量白蛋白检测试剂包括固定化兔抗人血清白蛋白多克隆抗体、用于使尿微量白蛋白与固定化兔抗人血清白蛋白多克隆抗体结合的试剂R3、用于与尿微量白蛋白结合的碱性磷酸酶标记试剂R4和用于检测碱性磷酸酶的发光底物2。本发明专利技术对尿微量白蛋白和尿肌酐均采用化学发光的方法检测，并且发光都是辉光，所以该检测方法不但可以使两个指标都在化学发光仪上检测，而且能使测量更精准、更方便、更快捷。

【技术实现步骤摘要】
一种尿微量白蛋白/尿肌酐检测试剂盒
本专利技术涉及体外诊断试剂
，具体涉及一种尿微量白蛋白/尿肌酐检测试剂盒。
技术介绍
ACR(尿微量白蛋白/尿肌酐比值)在评判糖尿病肾病早期诊断中起着重要的作用，现在检测该指标主要有两种方法：一是通过尿微量白蛋白/尿肌酐的尿液分析测试卡对ACR值进行测量，二是分别测量尿微量白蛋白和尿肌酐的值，然后通过计算得到其值。尿微量白蛋白测量方法有酶联免疫法，放射免疫法、免疫比浊法、胶体金法、透射比浊法和免疫浊度法；肌酐检测方法主要有干化学和酶法。对ACR的检测的现有技术和测量方法存在的缺点主要体现在以下几个方面：1)测量不精确，有些方法通过直观的颜色深浅对ACR进行判断，而不能通过仪器读数获得更精确的值；2)测量受到仪器的限制，实际临床中为了得到更为准确的ACR值，对尿微量白蛋白和尿肌酐分别测量，然后计算其比值，由于尿微量白蛋白和尿肌酐的测量方法是在不同的方法学基础上建立起来的，所以要用不同的仪器分别测量。3)测量步骤繁琐，由上一点提到的需要用到不同的仪器，必然导致对同一样本分别进行处理，才能保证分别测量尿微量白蛋白和尿肌酐的值的准确；4)测量干扰大，有些肌酐和尿微量白蛋白的测量方法，最终的结果是基于显色反应，由于尿样本身带有不同程度的颜色，所以必然会给检测带来干扰。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服现有技术的不足之处而提供了一种尿微量白蛋白/尿肌酐检测试剂盒，以解决ACR测量繁琐、测量结果不精确的问题。为实现上述目的，本专利技术采取的技术方案如下：一种尿微量白蛋白/尿肌酐检测试剂盒，所述试剂盒包括尿肌酐检测试剂和尿微量白蛋白检测试剂，所述尿肌酐检测试剂包括用于消除内源性肌酸和肌氨酸的试剂R1、用于将将肌酐转化成肌酸的试剂R2和用于检测过氧化氢的发光底物1，所述试剂R1包括肌酸酶和肌氨酸氧化酶，所述试剂R2包括肌酐酶；尿微量白蛋白检测试剂包括固定化兔抗人血清白蛋白多克隆抗体、用于使尿微量白蛋白与固定化兔抗人血清白蛋白多克隆抗体结合的试剂R3、用于与尿微量白蛋白结合的碱性磷酸酶标记的试剂R4和用于检测碱性磷酸酶的发光底物2，所述试剂R4包括碱性磷酸酶标记的鼠抗人血清白蛋白单克隆抗体。所述兔抗人血清白蛋白多克隆抗体包被在发光板或反应杯中。本专利技术的试剂盒主要包括对肌酐的检测和对尿微量白蛋白的检测。肌酐检测主要通过酶法-化学发光法进行检测，肌酐在肌酐酶的作用下生成肌酸、肌酸在肌酸酶的作用下生成肌氨酸、肌氨酸在肌氨酸氧化酶的作用下生成过氧化氢，过氧化氢通过和发光底物1，2-二氧杂环丁烷硼酸在碱性条件下发生反应，从而产生恒定的辉光。尿微量白蛋白的检测通过酶促化学发光免疫分析法对其进行测量，固定在发光板上的兔抗人血清白蛋白多克隆抗体能特异性的捕获尿液中的尿微量白蛋白，碱性磷酸酶标记的特异性抗体又能与尿液中的尿微量白蛋白结合，从而形成夹心结构，然后在体系中加入特异性发光底物9，10-二氢吖啶衍生物，在进行磷酸酶的作用下产生恒定的辉光。上述检测试剂盒中操作简单，由于ACR指标中，肌酐和尿微量白蛋白的检测都是通过化学发光的方法来实现，所以两种物质的检测能在同一台化学发光仪上同时进行检测，便于该指标的自动化；试剂盒测量结果更加精确，由于ACR中两物质都是通过化学发光的方法实现，并所选用的发光底物都能产生恒定的辉光，所以比一般的测量方法线性更宽，测量更准确；干扰少，该专利技术是通过检测相对发光值而达到物质含量的测定的目的，所以不像其它测量方法一样，需要排除样本本身颜色的干扰。作为本专利技术所述的尿微量白蛋白/尿肌酐检测试剂盒的优选实施方式，所述发光底物1为1，2-二氧杂环丁烷硼酸；所述发光底物2为9，10-二氢吖啶衍生物。作为本专利技术所述的尿微量白蛋白/尿肌酐检测试剂盒的实施方式，所述试剂R1包括下述浓度的组分：肌酸酶5～30KU/L和肌氨酸氧化酶2～10KU/L；所述试剂R2包括下述浓度的组分：肌酐酶10～30KU/L；所述试剂R3包括下述浓度的组分：甘氨酸1～10g/L和氧化三甲胺2～15g/L；所述试剂R4包括下述浓度的组分：碱性磷酸酶标记的鼠抗人血清白蛋白单克隆抗体0.001～0.1mg/L。作为本专利技术所述的尿微量白蛋白/尿肌酐检测试剂盒的优选实施方式，所述试剂R1包括下述浓度的组分：肌酸酶8～20KU/L和肌氨酸氧化酶5～8KU/L；所述试剂R2包括下述浓度的组分：肌酐酶20～30KU/L；所述试剂R3包括下述浓度的组分：甘氨酸2～7g/L、氧化三甲胺5～10g/L。所述试剂R4包括下述浓度的组分：碱性磷酸酶标记的鼠抗人血清白蛋白单克隆抗体0.025～0.075mg/L。作为本专利技术所述的尿微量白蛋白/尿肌酐检测试剂盒的优选实施方式，所述试剂盒还包括缓冲液、抗干扰剂、酶保护剂、表面活性剂和防腐剂。作为本专利技术所述的尿微量白蛋白/尿肌酐检测试剂盒的优选实施方式，所述缓冲液为磷酸缓冲液、HEPES缓冲液或TAPS缓冲液；抗干扰试剂为维生素C氧化酶、胆红素氧化酶、过氧化氢酶中的至少一种；酶保护剂为海藻糖、蔗糖、甘露醇、聚乙二醇、牛血清白蛋白中的至少一种；表面活性剂为吐温20、tritonX-100、十二烷基-β-D麦芽糖苷中的至少一种；防腐剂为叠氮钠、生物防腐剂中的至少一种。作为本专利技术所述的尿微量白蛋白/尿肌酐检测试剂盒的优选实施方式，所述生物防腐剂为KY100或Proclin300。作为本专利技术所述的尿微量白蛋白/尿肌酐检测试剂盒的优选实施方式，所述试剂R1包括下述浓度的组分：缓冲液0.01～0.1mol/L、肌酸酶5～30KU/L、肌氨酸氧化酶2～10KU/L、酶保护剂0.1～2wt％、表面活性剂0.005～0.01wt％、抗干扰试剂0.1～26KU/mL、DMSO0.5～4wt％和防腐剂0.005～0.2wt％；所述试剂R2包括下述浓度的组分：缓冲液0.01～0.1mol/L、肌酐酶10～30KU/L，NaN30.001～0.01wt％、表面活性剂0.005～0.01wt％、酶保护剂0.1～2wt％和防腐剂0.005～0.2wt％；发光底物1：1，2-二氧杂环丁烷硼酸；所述试剂R3包括下述浓度的组分：缓冲液0.005～0.05mol/L、牛血清白蛋白0.05～20wt％、甘氨酸1～10g/L和氧化三甲胺2～15g/L；所述试剂R4包括下述浓度的组分：缓冲液0.01～1mol/L、牛血清白蛋白0.1～5wt％、碱性磷酸酶标记的鼠抗人血清白蛋白单克隆抗体0.001～0.1mg/L和防腐剂0.005～0.2wt％；发光底物2：9，10-二氢吖啶衍生物。作为本专利技术所述的尿微量白蛋白/尿肌酐检测试剂盒的优选实施方式，所述维生素C氧化酶的浓度为1～20KU/L、胆红素氧化酶的浓度为0.5～5KU/L和过氧化氢酶的浓度为0.1～1KU/L。作为本专利技术所述的尿微量白蛋白/尿肌酐检测试剂盒的优选实施方式，所述试剂R1中的缓冲液的pH为6.0～8.0；试剂R2中的缓冲液的pH为7.5～8.5；所述试剂R3中的缓冲液的pH为7.0～8.0；所述试剂R4中的缓冲液的pH为7.0～8.0。与现有技术相比，本专利技术的有益效果为：1)操作简单，由于ACR指标中，肌酐和尿微量白蛋白的检测都是通过化学发光的方法来实现，所以两种物质本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种尿微量白蛋白/尿肌酐检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括尿肌酐检测试剂和尿微量白蛋白检测试剂，所述尿肌酐检测试剂包括用于消除内源性肌酸和肌氨酸的试剂R1、用于将肌酐转化成肌酸的试剂R2和用于检测过氧化氢的发光底物1，所述试剂R1包括肌酸酶和肌氨酸氧化酶，所述试剂R2包括肌酐酶；尿微量白蛋白检测试剂包括固定化兔抗人血清白蛋白多克隆抗体、用于使尿微量白蛋白与固定化兔抗人血清白蛋白多克隆抗体结合的试剂R3、用于与尿微量白蛋白结合的碱性磷酸酶标记的试剂R4和用于检测碱性磷酸酶的发光底物2，所述试剂R4包括碱性磷酸酶标记的鼠抗人血清白蛋白单克隆抗体；所述试剂R3包括甘氨酸和氧化三甲胺；所述发光底物1为1，2‑二氧杂环丁烷硼酸；所述发光底物2为9，10‑二氢吖啶衍生物。

【技术特征摘要】
1.一种尿微量白蛋白/尿肌酐检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括尿肌酐检测试剂和尿微量白蛋白检测试剂，所述尿肌酐检测试剂包括用于消除内源性肌酸和肌氨酸的试剂R1、用于将肌酐转化成肌酸的试剂R2和用于检测过氧化氢的发光底物1，所述试剂R1包括肌酸酶和肌氨酸氧化酶，所述试剂R2包括肌酐酶；尿微量白蛋白检测试剂包括固定化兔抗人血清白蛋白多克隆抗体、用于使尿微量白蛋白与固定化兔抗人血清白蛋白多克隆抗体结合的试剂R3、用于与尿微量白蛋白结合的碱性磷酸酶标记的试剂R4和用于检测碱性磷酸酶的发光底物2，所述试剂R4包括碱性磷酸酶标记的鼠抗人血清白蛋白单克隆抗体；所述试剂R3包括甘氨酸和氧化三甲胺；所述发光底物1为1，2-二氧杂环丁烷硼酸；所述发光底物2为9，10-二氢吖啶衍生物。2.根据权利要求1所述的尿微量白蛋白/尿肌酐检测试剂盒，其特征在于，所述试剂R1包括下述浓度的组分：肌酸酶5～30KU/L和肌氨酸氧化酶2～10KU/L；所述试剂R2包括下述浓度的组分：肌酐酶10～30KU/L；所述试剂R3包括下述浓度的组分：甘氨酸1～10g/L和氧化三甲胺2～15g/L；所述试剂R4包括下述浓度的组分：碱性磷酸酶标记的鼠抗人血清白蛋白单克隆抗体0.001～0.1mg/L。3.根据权利要求1所述的尿微量白蛋白/尿肌酐检测试剂盒，其特征在于，所述试剂R1包括下述浓度的组分：肌酸酶8～20KU/L和肌氨酸氧化酶5～8KU/L；所述试剂R2包括下述浓度的组分：肌酐酶20～30KU/L；所述试剂R3包括下述浓度的组分：甘氨酸2～7g/L、氧化三甲胺5～10g/L；所述试剂R4包括下述浓度的组分：碱性磷酸酶标记的鼠抗人血清白蛋白单克隆抗体0.025～0.075mg/L。4.根据权利要求1～3任一项所述的尿微量白蛋白/尿肌酐检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括缓冲液、抗干扰剂、酶保护剂、表面活性剂和防腐剂。5.根据权利要求4所述的尿微量白蛋白/尿肌酐检测试剂盒，其特征在于，所述缓冲液为磷酸缓冲液、HEPES缓冲液或TAPS缓冲液；抗干扰...

【专利技术属性】
技术研发人员：齐宗献，李民友，丘传添，林伟荣，罗宁，
申请(专利权)人：广州市进德生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：广东,44