一种具有抗氧化活性的牡丹籽多肽口服液的制备方法技术

技术编号:19712315 阅读:71 留言:0更新日期:2018-12-08 18:20
本发明专利技术涉及新型资源蛋白的深加工技术领域和保健品领域,具体涉及一种具有抗氧化活性的牡丹籽多肽的制备方法。本发明专利技术牡丹籽多肽抗氧化能力极高,且制备方法简单、生产成本低,可以实现工业化生产。本发明专利技术牡丹籽多肽口服液,成分简单,抗氧化效果好,能够显著提高过氧化氢酶、超氧化物歧化酶的活力,降低丙二醛的含量;并且本发明专利技术口服液中无糖类产品的添加,尤其适合糖尿病患者使用。

【技术实现步骤摘要】
一种具有抗氧化活性的牡丹籽多肽口服液的制备方法
本专利技术涉及新型资源蛋白的深加工
和保健品领域,具体涉及一种具有抗氧化活性的牡丹籽多肽口服液的制备方法。
技术介绍
随着社会的发展和人们生活水平的提高,针对目前人们因生活水平的提高而带来的诸如高血压、肥胖病、高血脂等各种各样的现代富贵病,具有一定保健功能的食品应运而生,满足了人们以食疗为主的需求。其中,人体自身或外界刺激均会在机体内产生对人体不利的自由基,从而使人体衰老或威胁人类的健康。因此,在食品生产中,为了消除自由基带来的影响,人们常常使用化学合成的抗氧化剂,虽然效果好,但是本身存在一定的安全性。因此,人们往往更倾向于使用天然的、可靠的、安全的抗氧化产品。牡丹籽是近年来新开发的一种油料作物,油脂和蛋白质含量丰富,营养价值很高。彭瑶瑶研究了牡丹籽油和蛋白质的提取工艺、油脂的精炼工艺以及蛋白质的功能特性,采用碱溶酸沉法对牡丹籽蛋白进行了提取,优化了提取工艺并对所得蛋白做了分析。将压榨法提油后的籽粕粉碎,用碱溶酸沉法提取蛋白,其最佳工艺条件为:料水比1:35、pH11、提取温度40℃、提取时间2h。在此条件下,蛋白提取率达到87.20%,并测得牡丹籽蛋白的等电点为pH3.9。利用此工艺分别提取了超声波辅助溶剂萃取法提油后籽粕和压榨法提油后籽粕中的蛋白,将所提蛋白冷冻干燥制成蛋白粉,测定其纯度分别为92.87%和91.28%。对所得的牡丹籽蛋白的分析发现牡丹籽蛋白具有良好的吸水性、吸油性、乳化性、乳化稳定性和起泡性,而两种不同提油方法所得籽粕中的蛋白质的功能特性、分子结构、相对分子质量分布和氨基酸组成的差异均不明显。最后,利用大孔树脂吸附法提取了水酶法提油后所得的水解液中水解蛋白并研究了其体外抗氧化活性。确定D201-C为最优树脂,其对牡丹籽水解蛋白的吸附率为77.08%,所吸附的水解蛋白的蛋白纯度达到91.64%,所吸附的水解蛋白含活性肽26.35%,且具有较强的清除DPPH·自由基、·OH自由基和O2-·自由基的能力;其中当水解蛋白浓度为5mg/mL时,DPPH·自由基、·OH自由基和O2-·自由基清除率均在20%左右(彭瑶瑶.牡丹籽油脂和蛋白的提取、精制和性能研究[D].江南大学,2014.)。牡丹籽多肽是牡丹籽蛋白的酶解产物,不仅易于被人体吸收利用,还能调节机体的生理功能,尤其是抗氧化功能。作为一种新型的天然抗氧化产品,牡丹籽多肽具备一定的营养保健和应用推广的价值。因此,获取抗氧化活性更强的牡丹籽多肽是目前亟需的。
技术实现思路
本专利技术的主要目的是,提供一种具有抗氧化活性的牡丹籽多肽口服液的制备方法。本专利技术牡丹籽多肽口服液具有较强的抗氧化能力,并且配方成分简单,不含糖,尤其适宜糖尿病患者使用。为实现上述目的,本专利技术采用以下技术方案:本专利技术目的之一,提供一种牡丹籽多肽的制备方法,包括以下步骤:(1)配制1.0-5.0%牡丹籽蛋白溶液,并调节溶液的pH值至6-8,置于50-70℃水浴锅中保温至牡丹籽蛋白的溶液达到50-70℃时,加入0.05-0.2g中性蛋白酶,酶解2.5-5h,并保持酶解反应pH值恒定;酶解结束后,置于沸水浴灭酶5-15min,冷却至室温;(2)取步骤(1)的牡丹籽蛋白酶解液,调节pH值至7.5-8.5,置于50-70℃水浴锅中,待溶液的温度达到50-70℃时,加入0.005-0.015g碱性蛋白酶,充分混匀后,酶解2.5-5h,并保持酶解反应pH值恒定,酶解结束后,置于沸水浴中灭酶5-15min;待溶液冷却至室温后,于6000rpm/min离心10min,过滤、冷冻干燥后即得牡丹籽多肽。优选的,步骤(1)配制2.0%牡丹籽蛋白溶液,并调节溶液的pH值至7.5,置于65℃水浴锅中保温至牡丹籽蛋白的溶液达到65℃时,加入0.1g中性蛋白酶,酶解3.5h,并保持酶解反应pH值恒定;酶解结束后,置于沸水浴灭酶10min,冷却至室温。进一步优选的,步骤(1)中性蛋白酶酶活力为0.5-1.0AU/g。优选的,步骤(2)取步骤(1)的牡丹籽蛋白酶解液,调节pH值至8.0,置于60℃水浴锅中,待溶液的温度达到60℃时,加入0.01g碱性蛋白酶,充分混匀后,酶解3.0h,并保持酶解反应pH值恒定,酶解结束后,置于沸水浴中灭酶10min;待溶液冷却至室温后,于6000rpm/min离心10min,过滤、冷冻干燥后即得牡丹籽多肽。进一步优选的,步骤(2)碱性蛋白酶酶活力为:2-3AU/g。不同的牡丹籽蛋白酶解处理方法,所得的牡丹籽多肽的抗氧化能力会有明显差异。本专利技术通过对不同蛋白酶的筛选、对酶解过程中底物浓度、蛋白酶的用量、酶解时间、酶解温度以及酶解pH值进行不断调整,发现在本专利技术酶解条件下,制备得到的牡丹籽多肽在0.55mg/mL浓度下对DPPH·自由基清除率高达71.46%;在3.5mg/mL浓度条件下对·OH自由基的清除率高达73.23%;在3.0mg/mL浓度条件下对O2-·清除率高达83.56%。此外,本专利技术制备得到的牡丹籽多肽对Fe2+具有较强的螯合能力,0.6mg/mL本专利技术牡丹籽多肽对Fe2+的螯合率高达75.35%。本专利技术目的之二,提供一种具有抗氧化活性的牡丹籽多肽口服液,包括以下成分及其重量:牡丹籽多肽0.1-1g,大豆球蛋白碱性多肽0.01-0.05g和甜菊糖苷0.005-0.05g,溶于100mL水;所述牡丹籽多肽按以上所述制备方法制得。优选的,所述具有抗氧化活性的牡丹籽多肽口服液,由以下成分及其重量份组成:牡丹籽多肽0.5g,大豆球蛋白碱性多肽0.02g和甜菊糖苷0.01g;溶于100mL水。本专利技术牡丹籽多肽与大豆球蛋白碱性多肽和甜菊糖苷有效组合得到的口服液,具有较强的抗氧化能力,能够显著提高过氧化氢酶、超氧化物歧化酶的活力,降低丙二醛的含量。本专利技术牡丹籽多肽口服液,可以缓解并满足人们对天然的抗氧化保健产品的需求,而且牡丹籽多肽口服液不仅具备抗氧化活性,而且拥有天然的抗菌特性以及生理保健功能,可以大大延长货架期,为人们提供天然的安全的营养补充。本专利技术目的之三,提供所述的有抗氧化活性的牡丹籽多肽口服液的制备方法,包括以下步骤:S1.牡丹籽多肽的制备;S2.准确称取牡丹籽多肽、大豆球蛋白碱性多肽和甜菊糖苷,加入蒸馏水,搅拌溶解均匀,经滤膜过滤后,真空灌装并封口,灭菌后检验入库,即得。优选的,所述步骤S2所用滤膜为0.45μm滤膜。本专利技术目的之四,提供所述牡丹籽多肽制备方法制备得到的牡丹籽多肽和/或所述的有抗氧化活性的牡丹籽多肽口服液在制备抗氧化、抗衰老产品中的应用。与现有技术相比,本专利技术具有以下优势:(1)本专利技术牡丹籽多肽抗氧化能力极高,且制备方法简单、生产成本低,可以实现工业化生产。(2)本专利技术牡丹籽多肽口服液,成分简单,抗氧化效果好,能够显著提高过氧化氢酶、超氧化物歧化酶的活力,降低丙二醛的含量;并且本专利技术口服液中无糖类产品的添加,尤其适合糖尿病患者使用。附图说明构成本专利技术的一部分的说明书附图用来提供对本专利技术的进一步理解,本专利技术的示意性实施例及其说明用于解释本专利技术,并不构成对本专利技术的不当限定。图1中性蛋白酶酶解牡丹籽蛋白得到牡丹籽多肽还原力的响应面曲线图和等高线图:在pH7.5,酶解温度65℃,酶解时间3.5h下,酶本文档来自技高网
...

【技术保护点】
1.一种牡丹籽多肽的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)配制1.0‑5.0%牡丹籽蛋白溶液,并调节溶液的pH值至6‑8,置于50‑70℃水浴锅中保温至牡丹籽蛋白的溶液达到50‑70℃时,加入0.05‑0.2g中性蛋白酶,酶解2.5‑5h,并保持酶解反应pH值恒定;酶解结束后,置于沸水浴灭酶5‑15min,冷却至室温;(2)取步骤(1)的牡丹籽蛋白酶解液,调节pH值至7.5‑8.5,置于50‑70℃水浴锅中,待溶液的温度达到50‑70℃时,加入0.005‑0.015g碱性蛋白酶,充分混匀后,酶解2.5‑5h,并保持酶解反应pH值恒定,酶解结束后,置于沸水浴中灭酶5‑15min;待溶液冷却至室温后,于6000rpm/min离心10min,过滤、冷冻干燥后即得牡丹籽多肽。

【技术特征摘要】
1.一种牡丹籽多肽的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)配制1.0-5.0%牡丹籽蛋白溶液,并调节溶液的pH值至6-8,置于50-70℃水浴锅中保温至牡丹籽蛋白的溶液达到50-70℃时,加入0.05-0.2g中性蛋白酶,酶解2.5-5h,并保持酶解反应pH值恒定;酶解结束后,置于沸水浴灭酶5-15min,冷却至室温;(2)取步骤(1)的牡丹籽蛋白酶解液,调节pH值至7.5-8.5,置于50-70℃水浴锅中,待溶液的温度达到50-70℃时,加入0.005-0.015g碱性蛋白酶,充分混匀后,酶解2.5-5h,并保持酶解反应pH值恒定,酶解结束后,置于沸水浴中灭酶5-15min;待溶液冷却至室温后,于6000rpm/min离心10min,过滤、冷冻干燥后即得牡丹籽多肽。2.根据权利要求1所述制备方法,其特征在于,步骤(1)配制2.0%牡丹籽蛋白溶液,并调节溶液的pH值至7.5,置于65℃水浴锅中保温至牡丹籽蛋白的溶液达到65℃时,加入0.1g中性蛋白酶,酶解3.5h,并保持酶解反应pH值恒定;酶解结束后,置于沸水浴灭酶10min,冷却至室温。3.根据权利要求1或2所述制备方法,其特征在于,步骤(1)中性蛋白酶酶活力为0.5-1.0AU/g。4.根据权利要求1所述制备方法,其特征在于,步骤(2)取步骤(1)的牡丹籽蛋白酶解液,调节pH值至8.0,置于60℃水浴锅中,待溶液的温度达...

【专利技术属性】
技术研发人员:李迎秋高蕾蕾孙桂金田文利赵祥忠汲德群姜建明李芳
申请(专利权)人:齐鲁工业大学
类型:发明
国别省市:山东,37

网友询问留言 已有0条评论
  • 还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。

1