一种水曲柳种子提取物、提取分离方法及其应用技术

本发明专利技术属于植物提取分离技术领域，特别涉及一种水曲柳种子提取物、提取分离方法及其应用，包含以下22种组分：Nuzhenide、Isooleonuezhenide、Jaspolyoleoside B、Safghanoside A、Excelside B、Lucidumoside A、Safghanoside G、Oleopolynuzhenide A、GI‑3、Jaspolyanoside、(8E)‑Ligstroside、Nicotiflorine、Oleuricine A、Sclerosteroid J、3β,28‑dihydroxyoleana‑11,13(18)‑diene、熊果酸、秦皮醇、茴香内酯、(+)‑8‑hydroxypinoresinol、AL072、D‑aromadendrane‑4β,10α‑diol、酪醇，其中环烯醚萜类13个，三萜类3个，香豆素类2个，1个木质素类，1个脂肪酸内酯类以及2个其他类。本发明专利技术水曲柳种子提取物在制备降血糖、皮肤增白及健脑健忆药物中具备应用前景。

【技术实现步骤摘要】
一种水曲柳种子提取物、提取分离方法及其应用
本专利技术属于植物提取分离
，特别涉及一种水曲柳种子提取物、提取分离方法及其应用。
技术介绍
水曲柳(FraxinusmandschuricaRupr)为木犀科(Oleaceae)梣属(Fraxinus)植物的一种，分布于朝鲜、日本、俄罗斯以及中国大陆等。在中国，水曲柳主要分布于中国东北黑龙江的大兴安岭东部和小兴安岭、吉林的长白山等地。生长于海拔700米至2100米的地区，一般生长在山坡疏林中或河谷平缓山地。水曲柳一直作为优质木材，有广泛的用途，比如制作家具、运动器材、及农具手柄等生活用途。其树皮具有抗炎镇痛之功效，常作秦皮的替代品使用。《新华本草纲要》记载了它的皮味苦，性寒有，具有清热燥湿，清肝明目的功能，用于肠炎、痢疾、月经不调、白带、慢性支气管炎、急性结膜炎、疟疾的治疗。水曲柳种子的采摘时间一般在九月末到十月初，从种子的胚芽时期到成熟大约需要140天左右，成熟种子的长度约1.4～1.6cm。水曲柳种子的化学成分系统研究未见报道，同属植物种子研究表明，种子含有的主要成分与树皮、叶相似，其主要化学成分是香豆素类、环烯醚萜类和苯乙醇苷类化合物，环烯醚萜主要以苷的形式或者与苯乙醇形成酯。近年来的研究表明，环烯醚萜类化合物作为梣属植物的主要代谢产物，具有多种值得关注的生理活性，例如降血糖、保肝、抗氧化、促进皮肤再生、利尿等，在植物化学研究中逐渐成为了热点。
技术实现思路
本专利技术水曲柳种子提取物在制备降血糖、皮肤增白及健脑健忆药物中具备应用前景。本专利技术提供了一种水曲柳种子提取物，包含以下22种组分：如式S2-1-2所示的Nuzhenide、式S2-2-2所示的Isooleonuezhenide、式S2-4-1所示的JaspolyoleosideB、式S2-2-3所示的SafghanosideA、式S2-4-2所示的ExcelsideB、式S3-1所示的LucidumosideA、式S3-2所示的SafghanosideG、式S3-3所示的OleopolynuzhenideA、式S2-2-4-1所示的GI-3、式E2-4所示的Jaspolyanoside、式E-5-1所示的(8E)-Ligstroside、式EA-6-3所示的Nicotiflorine、式EA-6-7所示的OleuricineA、式m-m-6-2所示的SclerosteroidJ、式m-1所示的3β,28-dihydroxyoleana-11,13(18)-diene、式m-3所示的熊果酸、式M-6-2-1所示的秦皮醇、式M-6-2-2所示的茴香内酯、式m-2所示的(+)-8-hydroxypinoresinol、式M-6-89所示的AL072、式M-6-3所示的D-aromadendrane-4β,10α-diol、式E2-1所示的酪醇；一种上述水曲柳种子提取物的提取分离方法，包括如下步骤：S1，将水曲柳种子制成粉末，用相当于3倍粉末重量的体积浓度为90％的乙醇溶液渗漏提取三次，每次浸泡48h后再开始渗漏，合并三次提取液并减压浓缩，得浸膏；S2，将S1中浸膏用水分散溶解，依次分别用二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取，对各萃取剂层减压浓缩，得二氯甲烷萃取混合物、乙酸乙酯萃取混合物、正丁醇萃取混合物；其中，减压浓缩的条件均为：45℃、－0.1MPa；S3，将二氯甲烷萃取混合物经100～200目硅胶柱层析分离，石油醚-乙酸乙酯溶液梯度洗脱，得7个馏分，各馏分分别用300～400目硅胶柱层析分离，用石油醚-乙酸乙酯溶液梯度洗脱，分离得到式m-1、m-2、m-3、M-6-2-1、m-m-6-2、M-6-89、M-6-2-2、M-6-3的8种化合物；S4，将乙酸乙酯萃取混合物用60～100目硅胶以质量比1:1拌样，干燥后上100～200目硅胶柱，用二氯甲烷-甲醇溶液梯度洗脱，然后用甲醇冲洗，得7个馏分，各馏分分别用200～300目硅胶柱层析分离，用二氯甲烷-甲醇溶液梯度洗脱，然后用小孔树脂柱层析，甲醇-水系统洗脱，得式E2-4、E-5-1、EA-6-3、EA-6-7、E2-1的5种化合物；S5，将正丁醇萃取混合物用聚酰胺树脂柱层析进行富集，得白色固体，用相当于白色固体4/5重量的60～100目硅胶拌样，干燥后干法上100～200目的硅胶柱，用二氯甲烷-甲醇溶液梯度洗脱，甲醇冲洗，得7个馏分，各馏分分别经300～400目的硅胶柱层析，用二氯甲烷-甲醇溶液梯度洗脱，然后用小孔树脂柱、硅胶柱中的一种或两种或同种反复使用做层析，得式S2-1-2、S2-2-2、S2-4-1、S2-2-3、S2-4-2、S3-1、S3-2、S3-3、S2-2-4-1的9种化合物；其中，S5中二氯甲烷-甲醇溶液中两者的体积比为100：1～0：1；小孔树脂柱进行层析时洗脱剂均为甲醇-水溶液，且两者的体积比为1:9～9:1；。一种上述的水曲柳种子提取物在皮肤增白药物、益智健脑药物、降血糖药物方面的应用。优选地，所述水曲柳种子提取物中秦皮醇、AL072、LucidumosideA、SclerosteroidJ、熊果酸、Nuzhenide在抑制酪氨酸酶活性上的应用。优选地，所述水曲柳种子提取物中秦皮醇、AL072、LucidumosideA、SclerosteroidJ、熊果酸、茴香内酯、OleuricineA、Nuzhenide、SafghanosideA在抑制乙酰胆碱酯酶活性上的应用。优选地，所述水曲柳种子提取物中秦皮醇、AL072、LucidumosideA、SclerosteroidJ、Isooleonuezhenide、茴香内酯、熊果酸、OleuricineA、Nuzhenide、SafghanosideA在抑制α-葡萄糖苷酶活性上的应用。与现有技术相比，本专利技术的有益效果：本专利技术利用薄层色谱、硅胶柱色谱、MCI-CHP20P、高效液相色谱HPLC等现代色谱分离技术，通过NMR、UV等现代波谱分析技术，从水曲柳种子中首次提取分离的化合物22个，环烯醚萜类13个，三萜类3个，香豆素类2个，1个木质素类，1个脂肪酸内酯类以及2个其他类。水曲柳种子提取物中部分化合物具有良好的α-葡萄糖苷酶、酪氨酸酶和乙酰胆碱酯酶抑制活性，在制备降血糖、皮肤增白及健脑健忆药物中具备应用前景。具体实施方式下面是对本专利技术的一个具体实施方式进行详细描述，但应当理解本专利技术的保护范围并不受具体实施方式的限制。实施例1一种水曲柳种子提取物的提取分离方法，包括以下步骤：S1，将水曲柳种子30kg制成粉末，用相当于3倍粉末重量的体积浓度为90％的乙醇溶液渗漏提取三次，每次浸泡48h后再开始渗漏，合并三次提取液，45℃、－0.1MPa条件下减压浓缩，得浸膏1.441kg；S2，将S1中浸膏用适量水分散溶解，依次分别用二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取，对各萃取剂层在45℃、－0.1MPa条件下减压浓缩，得二氯甲烷萃取混合物(0.388kg)、乙酸乙酯萃取混合物(0.089kg)、正丁醇萃取混合物(0.433kg)还有水层部分(0.485kg)。S3，将二氯甲烷萃取混合物经100～200目硅胶柱层析分离，石油醚-乙酸乙酯溶液(40:1～1:1)梯度洗脱，得7个馏分：Fr1(石油本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种水曲柳种子提取物，其特征在于，包含以下22种组分：如式S2‑1‑2所示的Nuzhenide、式S2‑2‑2所示的Isooleonuezhenide、式S2‑4‑1所示的Jaspolyoleoside B、式S2‑2‑3所示的Safghanoside A、式S2‑4‑2所示的Excelside B、式S3‑1所示的Lucidumoside A、式S3‑2所示的Safghanoside G、式S3‑3所示的Oleopolynuzhenide A、式S2‑2‑4‑1所示的GI‑3、式E2‑4所示的Jaspolyanoside、式E‑5‑1所示的(8E)‑Ligstroside、式EA‑6‑3所示的Nicotiflorine、式EA‑6‑7所示的Oleuricine A、式m‑m‑6‑2所示的Sclerosteroid J、式m‑1所示的3β,28‑dihydroxyoleana‑11,13(18)‑diene、式m‑3所示的熊果酸、式M‑6‑2‑1所示的秦皮醇、式M‑6‑2‑2所示的茴香内酯、式m‑2所示的(+)‑8‑hydroxypinoresinol、式M‑6‑89所示的AL072、式M‑6‑3所示的D‑aromadendrane‑4β,10α‑diol、式E2‑1所示的酪醇；...

【技术特征摘要】
1.一种水曲柳种子提取物，其特征在于，包含以下22种组分：如式S2-1-2所示的Nuzhenide、式S2-2-2所示的Isooleonuezhenide、式S2-4-1所示的JaspolyoleosideB、式S2-2-3所示的SafghanosideA、式S2-4-2所示的ExcelsideB、式S3-1所示的LucidumosideA、式S3-2所示的SafghanosideG、式S3-3所示的OleopolynuzhenideA、式S2-2-4-1所示的GI-3、式E2-4所示的Jaspolyanoside、式E-5-1所示的(8E)-Ligstroside、式EA-6-3所示的Nicotiflorine、式EA-6-7所示的OleuricineA、式m-m-6-2所示的SclerosteroidJ、式m-1所示的3β,28-dihydroxyoleana-11,13(18)-diene、式m-3所示的熊果酸、式M-6-2-1所示的秦皮醇、式M-6-2-2所示的茴香内酯、式m-2所示的(+)-8-hydroxypinoresinol、式M-6-89所示的AL072、式M-6-3所示的D-aromadendrane-4β,10α-diol、式E2-1所示的酪醇；2.如权利要求1所述的水曲柳种子提取物的提取分离方法，其特征在于，包括如下步骤：S1，将水曲柳种子制成粉末，用相当于3倍粉末重量的体积浓度为90％的乙醇溶液渗漏提取三次，每次浸泡48h后再开始渗漏，合并三次提取液并减压浓缩，得浸膏；S2，将S1中浸膏用水分散溶解，依次分别用二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取，对各萃取剂层减压浓缩，得二氯甲烷萃取混合物、乙酸乙酯萃取混合物、正丁醇萃取混合物；其中，减压浓缩的条件均为：45℃、－0.1MPa；S3，将二氯甲烷萃取混合物经100～200目硅胶柱层析分离，石油醚-乙酸乙酯溶液梯度洗脱，得7个馏分，各馏分分别用300～400目硅胶柱层析分离，用石油醚-乙酸乙酯溶液梯度洗脱，分离得到式m-1、m-2、m-3、M-6-2-1、m-m-6-2、M-6-89、M-6-2-2、M-6-3的8种化合物；S4，将乙酸乙酯萃...

【专利技术属性】
技术研发人员：白乃生，马忠孝，郭森，王姗姗，王天义，彭赛男，田梦琪，王梦旭，白璐，
申请(专利权)人：西北大学，
类型：发明
国别省市：陕西,61